材料和试剂
100 μL 带针头的气密注射器：50 毫米长，23 号，点式 5，侧孔（Thermo Scientific，目录号：36520050）
2,500 μL 带针头的气密注射器：65 毫米长，23 号，点式 5，侧孔（Thermo Scientific，目录号：365Q2131）
20 mL 卷边顶空瓶（Thermo Scientific，目录号：CHCV20-14）
20 mm Si/PTFE 隔垫（Cronus，目录号：VCS-2004-1000）
20 mm 铝压接帽（Cronus，目录号：VCC-2002CS-1000）
20 mm 磁性卷边帽（Cronus，目录号：VCC-2002BM-500）
20 mm 手动压接器（Cronus，目录号：VTC-20）
1.8 mL，9 mm 螺旋盖小瓶（Cronus，目录号：VZS-0209C-100）
9 mm PTFE/红色橡胶螺纹闭合（Cronus，目录号 VKB-0203-09CB-5000）
51毫米，23 号汉密尔顿针，点式 5，侧孔（Hamilton，目录号：7729-06）
17 mm 进样口隔膜（Thermo Scientific，目录号：31303211）
3 毫升一次性塑料注射器（通用）
带鲁尔锁和注射器针头适配器的塑料二通阀（Vernier，目录号：PS-2WAY）
高纯度氦 (He)气，99.999%（Afrox，Baseline 5.0，目录号：524203-SE-C）
79 微升·大号-1 C 2 H 4 气体标准，平衡氮气（N 2 ）气体（Afrox，目录号：GOC mix 3292）
TG-BOND Q+ 多孔层开管毛细管柱（Thermo Scientific，目录号：26005-6030）
0.32 mm 石墨封装套圈（Thermo Scientific，目录号：29053487）
5 mm 玻璃分流衬垫（Thermo Scientific，目录号：45350030）
石墨衬垫密封件（Thermo Scientific，目录号：29033406）

设备
长嘴钳（通用）
直虹膜剪刀（通用）
带火焰离子化检测器的气相色谱仪（ Thermo Scientific，型号：Trace GC Ultra ）
自动进样器（Thermo Scientific，型号：Triplus RSH）
顶空工具（Thermo Scientific，目录号：1R77010-1125）
空气发生器（Peak Scientific，型号：Precision Zero Air）
N 2发生器（Peak Scientific，型号：Precision Nitrogen）
H 2发生器（Peak Scientific，型号：Precision Hydrogen）
带仪表和入口杆的 2 级气体调节器，带 5/8'' 左手 BSP 螺母（Afrox，目录号：W019220）
分析天平（Adam Precision，型号：PW184）

软件
Thermo Xcaliber 3.0.63.3（ Thermo Fisher Scientific Inc.）
Excel（微软 Office 2016）

程序
气相色谱仪 (GC) 的硬件设置

按照制造商的说明手册执行 GC 的以下设置：
在分流/不分流进样器中安装 5 mm 玻璃分流衬管和石墨密封件。
在隔垫支架和隔垫支架之间放置一个 17 mm 涂层隔垫，然后用手拧紧进样器盖。图 1 显示了构成喷油器一部分的布局和组件的图表以及照片。

图 1. GC 分流/不分流进样器的组件和布局。 A. 从 Thermo Scientific (2010) 转载的图表。 B. 组件照片。
使用 0.32 mm 石墨封装套圈连接火焰离子化检测器 (FID) 和分流衬管之间的 TG-BOND Q+ 毛细管柱。色谱柱插入分流衬管和 FID 的深度分别为 40 毫米和 94 毫米。图 2 说明了柱箱内安装的色谱柱，以及如何确定色谱柱插入进样器和 FID 的正确深度。

图 2. TG-BOND Q+ 毛细管色谱柱的安装。 A. 安装在分流/不分流进样器和火焰离子化检测器 ( FID)之间的 GC 柱温箱中的色谱柱视图。 B. 为 FID 测量色谱柱的插入深度。 C. 测量进样器的色谱柱插入深度时套圈位置的详细信息。
He气供应连接到 GC。
检查 Peak Scientific 气体发生器的运行情况，以按照表 1 中指定的压力和流速向 FID 提供燃料和补充气体。

表 1. 从气体发生器到 FID 的供气压力和流量规格气体压力（千帕）流量范围 (mL min -1 ) 氢242030–50 干燥的空气420300–600 氮气242010–60
按照表 2 汇总在 Xcaliber 软件的“仪器设置”页面中为 GC 配置的色谱测量参数。
表 2. GC 测量参数列表多变的单元价值载气-他进气方式-分裂喷油器基础温度摄氏度100 衬垫毫米5个分流毫升分-140 隔垫吹扫毫升分-15个运营商模式-恒压压力千帕140 柱子-TG-BOND Q+ 固定相-二乙烯基苯均聚物柱长米30 柱径毫米0.32 柱膜厚度微米10 烤箱起始温度摄氏度60 升温速率°C最低-10 烤箱最终温度摄氏度60 FID 基准温度摄氏度200 H 2流速毫升分-135 空气流量毫升分-1350 N 2流量毫升分-130 FID 范围-1个 FID增益-1个模拟滤波器状态-在采样深度毫米25 注射器灌装速度毫升分-150 注射速度毫升分-150 注射深度毫米50 进针速度毫米秒-125
在 Thermo Xcaliber 软件中配置处理设置

使用“Processing Setup”选项导入“.raw”文件进行峰识别。 “.raw”文件应表示来自由低浓度 C 2 H 4气体组成的气体注入的 GC 迹线。
按照表 3 了解要配置到软件中的变量集。
表 3. GC 软件在峰识别方面的处理参数页多变的价值鉴别探测器类型模拟峰值检测安讯士
预计时间（分钟）1.64
窗口（秒）5.00
查看宽度0.75
检测平滑点1个基线窗口60
面积噪声系数5个
峰值噪声系数10
ICIS 峰值检测最高峰
最小峰高 (S/N)3.0
校准组件类型目标化合物加权平等的
校准曲线线性的
单位nL
起源忽略
回复区域
关卡1个0.075 2个0.150
3个0.301
4个0.752
5个1.505
6个3.010
78.809
8个16.709
924.609
1044.359
1183.859

描述了部分处理设置的示例，说明保留时间为 1.64 分钟。

图 3.用于峰识别的 Xcaliber 处理设置示例
在 Xcaliber 软件中为校准标准品和样品创建序列设置

使用 Xcaliber 中的“序列设置”窗口创建一个序列文件，其中包含 11 个校准标准条目。重要的是要参考标题“Inst Meth”下的仪器方法文件和“Proc Meth”下的处理方法。
在“校准文件”标题下的序列表中给出校准文件的文件路径和名称。
为计划数量的样品创建一个序列文件，并在标题“Cal File”下输入要使用的校准文件的名称。
请注意，托盘支架和插槽位置仅对校准标准 1 至 6 很重要，因为其余的注射都是手动完成的。
图 4 进一步说明了创建序列文件的详细信息。

图 4. 在 Xcaliber 软件中创建序列文件的步骤
收集植物材料

从最靠近顶芽的复合叶中分离出两张小叶（两个小叶各来自两个顶芽），方法是在自然脱落层手动将它们折断。使用直锋利的虹膜剪刀去除多达 20 个顶芽（长度为 4-8 毫米，取决于芽阶段和大小）。将传单和芽分别插入 20 和 2 mL 小瓶中，如图 5 所示。这将分别产生 0.2 和 1.1 g 的芽和叶的最小质量。植物材料的实际质量并不重要，因为计算的 C 2 H 4释放速率已标准化为植物材料的单位质量。请参阅等式 5。

图5.叶和芽分别密封在 20 mL（左）和 2 mL（右）小瓶中
记录每个样本的收获时间，作为释放伤口乙烯所需 10 分钟持续时间标准化的参考（参见下一步）。
插入后让小瓶打开 10.0 ± 0.5 分钟，以释放伤口乙烯。这可以很容易地在环境条件下的收获地点实现。
手动压盖器将 20 mL 小瓶与 20 mm Si/PTFE 隔垫和 20 mm 铝压盖一起密封。
确保钳口盖内的隔垫的 PTFE 面朝下，如图 6 所示，即 PTFE 面将接触顶空瓶的斜边。

图 6. Si/PTFE 隔膜在钳口盖内的位置。 A. 顶视图。 B. 底视图。
在 10 分钟的平衡时间后，用手拧紧 2 mL 小瓶上的螺帽。
将每个小瓶密封的时间记录为 3 小时潜伏期的开始时间（参见步骤 H1）。

通过顶空瓶稀释制备和 GC 测量 C 2 H 4校准标样

使用 20 mm 磁性卷边盖和 20 mm Si/PTFE 隔垫密封包含环境空气的6 × 20 mL 顶空瓶。
将 2 级调节器连接到 79 μL · L -1 C 2 H 4气瓶，用螺母内的定制尺寸 Si/PTFE 隔膜密封低压出口。
将调节器的出口压力设置为 50 kPa。重要的是不要超过 100 kPa，因为由于出口配置的性质，它会对设备和人员造成危险。初始压力设置如下：
气缸截止阀处于关闭位置。
将调节器上的控制旋钮逆时针旋转到底，使调节器出口处于关闭位置。
打开钢瓶截止阀并立即再次关闭；这将使进气口阀杆和调节器充满钢瓶气体。
调节器高压表上的读数现在指示气缸压力。
顺时针缓慢转动调节器的控制旋钮，直到低压表读数为 50 kPa。
用分析气从阀侧至调压器低压出口吹扫调压器三次，具体如下：
在程序开始时关闭钢瓶截止阀很重要。
将 23 号针穿过低压出口的隔膜。
监测调节器高压表上的压力，直到它降低到接近零读数。就在仪表达到零之前取下针头。这意味着应在低压表从 50 kPa 下降之前移除针头。只要表压保持正值以防止空气回流到调节器出口，就可以容忍出口压力从 50 kPa 设置小幅下降。
打开钢瓶阀门并再次关闭，再次为进气阀杆和调节器充气。
再次将针插入隔膜并重复步骤 4a–4d 三次。三次吹扫的必要性是为了确保入口杆和调节器内的所有空气都被来自钢瓶的气体所取代，从而确保在制备标准时吸入实际的分析气体。
· L -1 C 2 H 4气瓶的调节器低压出口吸取大量分析气体。图 7 展示了使用气密注射器从钢瓶中抽取气体的技术。

图7.从压力调节器通过隔膜吸取一定体积的 C 2 H 4
表 4 第 3 列指定了注入 20 mL 顶空瓶 s 所需的体积V注射器，图8 中给出了使用 100 μL 注射器的照片说明。30 mm 的针头插入深度为充足的。

图8. 使用 100 μL 注射器稀释顶空瓶中的C 2 H 4气体
注射器技术应包括超过指定体积的体积提取。然后可以将注射器柱塞推回所需体积以消除注射器内的压力影响。
将 1 mL 体积的标准品 1 至 6， V inj注入 GC，其配置如仪器方法以及处理和序列设置所述。图 9 中的照片展示了使用顶空工具的自动进样步骤。

图 9. 使用顶空工具自动进样
由于 FID 是质量敏感检测器，因此校准是基于注入到分流衬管中的分析气体量，即C 2 H 4 ， V' inj来执行的。表 4 中的值可以通过等式 1 至 3 获得：

v^'= (C_cylinder 〖.V〗_syringe)/〖1×10〗^6 (1), C_vial^'=(C_cylinder.V_syringe)/V_vial (2), V_inj^'=(C_vial^'.V_vial.V_inj)/((V_vial+V_inj ).(〖1×10〗^3 ) )(3).
变量定义如下： C缸 =气瓶中C 2 H 4的浓度（ μL·L -1 ）， V小瓶= 顶空小瓶的体积 (mL)， V注射器= 吸入注射器的体积 (μL)， v ' =注射器中的体积 C 2 H 4 ( μL)， C'小瓶=顶空小瓶中的C 2 H 4浓度 ( nL · L -1 )， V inj = 注入 GC 衬管的总气体体积 (mL)，以及 V' inj =注入 GC 衬管中的 C 2 H 4体积 ( nL )。
表 4. 在顶空瓶中制备标准品 1 至 6 所需的样品瓶和注射器体积 C缸 ( μL·L -1 ) _V小瓶 (毫升)V型注射器 (微升)v' (微升)C'小瓶 ( nL L -1 )静脉注射 (毫升)V'inj _ (nL) 7920201.580 × 10 -3791个0.075 7920403.160 × 10 -31581个0.150 7920806.320 × 10 -33161个0.301 79202001.580 × 10 -27901个0.752 79204003.160 × 10 -215801个1.505 79208006.320 × 10 -231601个3.010
通过原位注射器稀释制备和 GC 测量 C 2 H 4校准标准品

标准品 7 至 11 通过在 2,500 μL 气密注射器中原位稀释制备。
列所示，从气缸中吸出大量气体， V注射器。再次应用抽取超过所需体积的技术，然后将柱塞移动到所需体积。

表 5. 使用原位注射器稀释制备标准品 7 至 11 所需的体积 V型注射器 (微升)V死了 (微升)C缸 (μL L -1 )V'注射-IS (nL) 5061.5798.809 15061.57916.709 25061.57924.609 50061.57944.359 100061.57983.859
此后通过将柱塞设置到 1000 μL 标记，用空气“稀释”分析气体。
在 Xcaliber 软件中的编程校准序列期间，将 1 mL 标准品 7 至 11 手动注入 GC。
将针插入拆分衬里的深度限制为 50 毫米。
观察表 5 中指示的 2,500 μL 注射器的死体积V dead ，该注射器对分析气体的体积有贡献。此值是特定于注射器的。
2 H 4的体积， V' inj -IS ，通过等式 4 以 nL 为单位注入衬里：

V_(inj-IS)^'= ((V_( syringe)+V_dead ).C_cylinder)/〖1×10〗^3 (4).

2 H 4质量控制 (QC) 标准的制备和 GC 测量

对于 20 mL 顶空 QC 小瓶，密封 4 × 20 mL 顶空小瓶，仅包含环境空气，带有 20 mm 铝卷边盖和 20 mm Si/PTFE 隔垫。
× 2 mL 小瓶的螺旋盖。这些小瓶也只包含环境空气。
对于 C 2 H 4 QC 标准品，使用 100 μL 气密注射器吸取 20 μL 和 80 μL 的 C 2 H 4标准品，分别制备 2 mL 和 20 mL 样品瓶的三个技术复制品。
要对 QC 样品的相应气体体积进行采样，从调节器中吸出超过所需体积的气体，将柱塞移回所需的确切体积，然后注入相应的小瓶中。
2 H 4 QC 样品的数据，请参阅表 6 。

制备C 2 H 4所需的样品瓶和注射器体积 QC样品 C缸 (μL L -1 )V小瓶 (毫升)V型注射器 (微升)v' (微升)C'小瓶 (nL L -1 )静脉注射 (毫升)V'inj _ (nL) 792个201.580 × 10 -37900.50.316 7920806.320 × 10 -33161个0.301
制备的 QC 小瓶总数包括 1 × 2 mL 空白（含环境空气）、1 × 20 mL 空白（含环境空气）、3 × 2 mL C 2 H 4 QC 标准品（含 20 μL C 2 H 4标准品）和 3 × 20 mL C 2 H 4 QC 标准品（含 80 μL C 2 H 4标准品）。
使用带 luer 阀的一次性 3 mL 注射器从 QC 小瓶中进行气体采样，每个注射器连接到 51 毫米长的 23 号针头。图 10 中可以看到带有鲁尔阀的注射器示例。

图10.带鲁尔锁和连接针头的一次性 3 mL 注射器
分别从 20 mL 和 2 mL 小瓶中吸出 1 mL 和 0.5 mL。
一种可取的注射器技术是在吸取所需体积之前将所需体积循环两次，针头固定穿过隔膜。
小心关闭 luer 阀，同时将柱塞保持在所需抽吸量的位置。当从 2 mL 小瓶中取样 0.5 mL 时，这是特别相关的，即气压将使柱塞恢复到小于提取的体积，通过确保在释放注射器柱塞之前关闭阀门来防止这种情况发生。图 11 中的照片序列展示了实现此目的的技术。

图 11. 使用一次性注射器从小体积 (2 mL) 样品瓶中吸取气体样品的技术。 A. 在 luer 锁打开的情况下将针头穿过隔膜。 B. 通过向外移动柱塞来抽取气体样本。 C. 关闭阀门的 luer 锁，同时将柱塞保持在所需体积的位置。
使用干净的 3 mL 注射器冲洗小瓶之间交替的针头，以确保从针头中排出任何 C 2 H 4气体。
在编程序列期间手动将 QC 样品注入 GC 衬管。
注射器可以通过注射器的隔膜以其全长（即 51 毫米）插入，以符合 50 毫米的编程注射深度设置。手动注射过程如图 12 中的照片序列所示。

图 12. 手动进样的步骤顺序。 A. 将针定位在注射器的顶部。 B. 将针插入隔膜。 C. 打开阀门的 luer 锁，同时保持对注射器柱塞的控制，以防止头部压力将柱塞向上推。 D. 向下压柱塞将气体样品注入进样器。
2 H 4由叶和芽进化而来的 GC 测量

进行气体采样，鲁尔阀连接到 23 个 51 毫米长的针头。每个小瓶的 3 小时孵育期包括允许植物材料在密封条件下释放 C 2 H 4的总时间。它包括在收集地点（果园）密封小瓶、运输到实验室和在实验室工作台上等待气体采样的监测时间之间的时间。一旦使用带 luer 阀的注射器从小瓶中采样气体，3 小时的潜伏期就有效终止。
一种可取的注射器技术是在吸取最终所需体积之前，将所需体积循环两次，针头固定穿过隔膜。
从 20 mL 和 2 mL 小瓶中吸出的体积分别为 1 mL 和 0.5 mL。不应发生植物材料的穿孔。在叶子的情况下，这通过将叶子插入小瓶中的技术来防止，即，主要靠着小瓶的壁。在芽的情况下，针的插入受到明显控制，以避免与植物材料接触。此外，针头有一个带侧孔的圆顶尖端。
小心关闭 luer 阀，同时将柱塞保持在适当的位置以获得所需的抽吸量，如 G10 中所述。
记录每个小瓶的采样时间。
使用干净的 3 mL 注射器冲洗在样品瓶之间交替的针头，以确保从针头中排出任何 C 2 H 4气体。
一旦顶空体积被吸入注射器并锁定，注射器就可以在色谱测量序列的持续时间内储存。
根据编程的序列文件将气体样品手动注入 GC。
如 G13 所述，针头可以全长插入注射器的隔膜。

植物材料的称量

在色谱分析之后，用一把钳子取下 20 mL 小瓶盖，然后拧下 2 mL 小瓶的盖子，以便单独称量小瓶及其内容物。
取出内容物并称量与每个样品编号相关的空 20 mL 和 2 mL 小瓶的质量。

数据分析
使用 Xcaliber 软件中的“Quan Browser”功能检索校准标样和样品的定量报告，如图 13 和 14 所示。请注意图 14 中“空白”的峰状态显示为“未找到”软件。这证实了 C 2 H 4不存在，因此无法确定保留时间或计算峰面积。

图13. 来自 Xcaliber “Quan Browser” 软件的校准标样的定量数据示例

Xcaliber “Quan Browser” 软件的样本定量数据示例
在“Quan Browser”窗口中，使用文件菜单“将数据导出到 Excel”来创建一个 Excel 文档，其中包含各个序列的测量数据。
在 Excel 中执行数据处理以计算特定的 C 2 H 4生产率 R，以 μL kg -1 h -1为单位，使用等式 5。变量分配如下：
GC C2H4 = GC 分析的 C 2 H 4体积，即在 Quan Browser 中计算的量 ( nL )， V小瓶= 小瓶体积 (mL)， V inj = 用注射器注入的气体总量 (mL)， m vc = 小瓶和内容物的质量 (g)， m v = 空瓶的质量 (g) 和 t = 密封小瓶的时间与t s 、从小瓶 (h) 中吸出气体的时间 t a之间的差异。
R=((〖GC〗_C2H4.(V_vial+V_inj ))/((V_inj/〖1×10〗^3 ) ).(1/〖1×10〗^6 ))/(((m_vc-m_v)/〖1×10〗^3 ).(t_a-t_s ) )(5).

笔记
根据要分析的植物材料的大小，可以调整植物器官的数量和/或小瓶的大小。
至少五个生物学重复，每个重复有子样本，是可取的，因为在外源C 2 H 4应用（例如，通过乙烯利应用）后， C 2 H 4读数可能会有相当大的变化。
当其他作物的植物组织和小瓶体积分别用作研究材料时，伤口乙烯释放的持续时间和潜伏期可能不同。建议在进行实验之前确定这些时间段。
需要注意的是，准确计时以确保所有样品的孵育时间相同非常重要。
建议在系统定量测量之前对典型样品进行临时定性色谱，以评估 C 2 H 4的预期最高和最低水平。观察到的峰面积可以作为所需校准范围的指南。
2 H 4的保留时间为 1.64 分钟。与预期的 1.64 分钟的轻微偏差可能仍然会发生，即使该协议是完整复制的。 C 2 H 4 （或任何感兴趣的化合物）的保留时间可以通过峰面积的增加来识别或确认，在测量一系列标准品的 GC 痕迹后， C 2 H 4增加专注。
使用所描述的技术可以轻松获得相关系数 > 99.0% 的校准曲线。
值得在序列中间歇性地包括空白和 QC 进样，以计算精度数据并验证未知物的测量。

致谢
这项工作得到了南非荔枝种植者协会和南非农业研究委员会的资助。该协议改编自以前的工作（Kim等人， 2016 年；Cronje等人， 2022 年）。

利益争夺
作者声明没有财务和非财务竞争利益。

参考
, FB, Morgan, PW 和Saltveit , ME (1992)。植物生物学中的乙烯。学术出版社，加利福尼亚州圣地亚哥。 Bindu, GV、Sharma, M. 和Upreti , KK (2017)。芒果 ( Mangifera indica L.)中多效唑对开花起始过程中多胺和乙烯的变化。 Int J Environ Agric Res 3(7)：34-40。 Chervin, C.、 Tira-Umphon , A.、El- Kereamy , A. 和Kanellis , A. (2005)。葡萄的成熟需要乙烯。学报园艺689：251-256。 Cristescu, SM、 Mandon , J.、 Arslanov , D.、De Pessemier , J.、 Hermans , C. 和Harren , FJ (2013)。目前检测植物中乙烯的方法。安博特111(3)：347-360。 Cronje, RB, Hajari , E., Jonker, A., Ratlapane , IM, Huang, X., Theron, KI 和 Hoffman, EW (2022)。叶面喷施乙烯利可诱导芽休眠并影响毛里求斯荔枝 ( Litchi chinensis Sonn.) 休眠和开花相关基因的表达。植物生理学杂志276：153768。 Dubois, M.、Van den Broeck , L. 和Inze , D. (2018)。乙烯在植物生长中的关键作用。植物科学趋势23(4)：311-323。 Gwanpua, SG、Jabbar, A.、 Tongonya , J.、Nicholson, S. 和 East, AR (2018)。使用基于激光的 ETD-300 乙烯检测器测量采后生物学研究中的乙烯。植物方法14：105。 Iqbal, N.、 Trivellini , A.、Masood, A.、Ferrante, A. 和 Khan, NA (2013)。目前对植物乙烯信号的理解：营养有效性的影响。植物生理学生物化学73：128-138。 Kim, JG、Stork, W. 和Mudgett , MB (2016)。被黄单胞菌感染的番茄叶片中乙烯产量的量化。生物协议6(3)：e1723。 Liu, J., Islam, MT, Sapkota, S., Ravindran, P., Kumar, PP, Artlip , TS 和 Sherif, SM (2021)。乙烯介导的桃芽物候、抗寒性和激素生物合成的调节波斯）。植物（巴塞尔） 10（7）：1266。 LG 尼克尔 (1994)。农业和园艺中的植物生长调节剂。 p. 1-14。在：宾夕法尼亚州赫定（编辑）。用于作物保护和害虫防治的生物调节剂。 ACS 研讨会系列卷。 557. 美国化学学会。美国农业部农业研究局。奥尔森，JE (2010)。诱导木本植物芽休眠的光和温度传感和信号。植物分子生物学73(1-2)：37-47。 Pierik, R.、 Tholen , D.、 Poorter , H.、Visser, EJ 和Voesenek , LA (2006)。乙烯的 Janus 面孔：生长抑制和刺激。植物科学趋势11(4)：176-183。 Sanyal, D. 和 Bangerth, F. (1998)。胁迫诱导乙烯进化及其与生长素运输、细胞分裂素水平和苹果幼苗和结果苹果树枝条中花芽诱导的可能关系。植物生长调节24：127-134。热科学 (2010)。分流/不分流进样器概述。 Trace GC Ultra 气相色谱仪操作手册。第 12版。 Thermo Fisher Scientific SpA .,斯特拉达 Rivoltana ，20090 Rodano ，米兰，意大利。 Tseng SH、Chang, PC 和 Chou, SS (2000)。气相色谱顶空进样快速简便测定农产品中乙烯利残留的方法 J食品药物肛门 8(3)：213-217。 Tudela, D. 和 Primo-Millo, E. (1992)。 1-Aminocyclopropane-1-Carboxylic Acid 从根部运输到枝条促进 Cleopatra Mandarin ( Citrus reshni Hort. ex Tan.) 水分胁迫后补水的幼苗的叶片脱落。植物生理学100(1)：131-137。 Wang, F.、Cui, X.、Sun, Y. 和 Dong, CH (2013)。植物生长和胁迫反应中的乙烯信号和调控。植物细胞代表32(7)：1099-1109。 Wang, HC、Huang, HB 和 Huang, XM (2007)。脱落酸和乙烯对荔枝果实成熟的差异影响。植物生长调节52：189-198。 Yang, SF 和 Hoffman, NE (1984)。乙烯生物合成及其在高等植物中的调控。 Ann Rev 植物生理学 35: 155-189。 Yin, J.、 Gao , F.、Hu, G. 和 Zhu, S. (2001)。脱落酸和乙烯对荔枝成熟和着色的调控。学报园艺558：293-296。