材料和试剂

机构动物护理和使用委员会（IACUC）批准的动物使用协议
C。 difficile 孢子
女性叙利亚金仓鼠（80g-120g）
克林霉素注射液，USP（150mg/ml）（Hospira，目录号：0409-4052）
Dulbecco改良的Eagle培养基（DMEM）

设备

动物喂食针（管饲针）
1 ml注射器
专用BSL2动物设施
缩放

程序

称重每只仓鼠。
向每只仓鼠灌注100μl克林霉素（30mg克林霉素/kg体重）注意：使用DMEM稀释股票克林霉素至适当浓度。
5天后，管饲100μl。艰难梭菌孢子。
注意：
1. 根据所用的艰难梭菌的菌株，感染剂量可以变化。然而，在几个菌株中，接种约100个孢子将导致致死性疾病。
2. 有几种方法可确保可重复的感染剂量[例如悬浮孢子在磷酸盐缓冲盐水（PBS）中]。我们的实验室使用特氟龙涂层管减少孢子粘附。其他实验室可在水中获得可重现的感染剂量。
仔细监控动物的感染征象，包括：湿尾，皮毛大衣不舒服，嗜睡，体重减轻15％。
注意：疾病的体征通常在感染后2-4天观察到。一定要密切监测动物的上述症状。 Moribund动物可以迅速屈服于疾病。
根据您的机构护理和动物使用委员会（IACUC）批准的协议，人类安乐死濒死的动物。计算达到垂死状态所需的时间。

致谢

我们要感谢Charlotte Allen和Ritu Shrestha帮助开发这个协议。该协议基于以前公布的C。艰难梭菌毒力研究（Sambol等人，（2001），其中作者通过流行病学上重要的C分析了仓鼠的感染。艰难梭菌分离株。这项工作是由美国心脏协会国家科学家发展赠款给JAS（No. 11SDG7160013）支持。资助者在研究设计，数据收集和分析，决定发布或准备手稿方面没有任何作用。

参考文献

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