材料和试剂

设备

植物生长设施
含有蚕豆植物（注1）的防虫笼子
培养皿
潮湿艺术家的画笔（尺寸2或4）
夹笼（图1）
植物标签
记号笔

图1.夹笼。由金属双头发夹（50毫米长），两片塑料管（10和5毫米高，2毫米厚，25毫米直径），两个圆圈的毡（25mm直径，4mm跨，1mm厚）和两片细纱（直径25mm）。将发夹加热并推入塑料管中。毛毡和纱布附着超强力胶。比例尺= 5 mm

软件

程序

收集结果

在第2至7天计算并记录夹子笼中的活成人数量。

表1.来自使用Col-0 拟南芥的实验的一次重复的实施例数据，/strong>

重复
1. 重复整个实验（步骤1-3）至少3次不同的场合。
分析结果
1. 计算野生型拟南芥上存活的时间点 50％（注6）。如果这发生在两天之间（例如在第3天之间）和4）然后平均在这两天活着的成年人的数量。
2. 使用此时间点计算每株植物活着的成虫数量（注7）。
3. 通过在广义线性模型内使用泊松分布的经典线性回归分析。

笔记

笼子应该足够大以使蚕豆植物生长，并且允许足够的光和通风，同时防止蚜虫逃逸。我们使用Perspex笼（47厘米高×54厘米深×24厘米宽），具有细小的网状覆盖物，通过磁条在一端作为门。
实验中5至10个豌豆蚜虫每个拟南芥植物应该是足够的，因为在22℃下在24小时内每个成年体出生约1个若虫。蚜虫在较低温度下繁殖较慢，因此需要更多的成年人来产生相同数量的若虫
确保计算添加到笼子里的成年人数，并在此阶段删除相同数量的成年人。
在所述条件下，豌豆蚜虫应达到成熟阶段8或9天，经历了4次蜕皮。只有成虫蚜虫繁殖。建议使用蚜虫10至14天。
例如，如果您将实验植物放置在3个托盘中进行实验，则随机地为每个植物分配1,2或3个对应于托盘1,2和3的数。这可以使用Microsoft中的RANDBETWEEN函数sup>® Excel。
平均每天在所有重复的野生型拟南芥中存活的成年豌豆蚜虫的数量。然后在线图上将此数据与实验日数绘图。参见参考文献1（Prince ，2014）图6B的示例。
例如，表1中的数据是较大数据集的一部分，其中50％的存活在第3天和第4天之间。因此，数据将计算为：植物1 = 4，植物2 = 3.5，植物3 =工厂4 = 3，工厂5 = 4

致谢

我们感谢安德鲁·戴维斯为夹子的照片。这项工作是由生物技术和生物科学研究委员会（授予号BB/J004553/1至SAH），约翰·因尼斯基金会（SAH），生物技术和生物科学研究委员会学生计划（对DCP）和约翰·内斯基础学生（至TR V）。该协议改编自参考文献1（Prince ，，2014）。

参考文献

Prince，D.C.，Drurey，C.，Zipfel，C.and Hogenhout，S.A。（2014）。富含亮氨酸的重复受体样激酶BRASSINOSTEROID INSENSITIVE1相关激酶1和细胞色素P450 PHYTOALEXIN DEFINIENT3贡献在拟南芥中对蚜虫的先天免疫。植物生理学 164（4）：2207-2219。