材料和试剂

设备

程序

将水稻种子用10％（v/v）过氧化氢表面灭菌30分钟，然后用去离子水彻底冲洗。灭菌的种子在安装在塑料容器中的塑料支撑网（1mm筛网）上发芽1周。选择均一的幼苗，然后转移到含有7L国际水稻研究所（IRRI）营养液的槽中4周，然后剥夺N（没有NH 4 NO 3的IRRI营养液）1周。所有植物在具有16小时光照（30℃）/8小时暗（22℃）光周期的生长室中生长，并且相对湿度控制在约70％。
将植物首先转移到具有7L洗涤溶液（0.1mM CaSO 4）的容器中1分钟，然后转移到具有7L完全营养液的新容器中，所述完全营养液含有0.5mM K + 5分钟摄取，最后到洗涤溶液（0.1mM CaSO 4·7H 2 O）中的溶液（5×10 6 /孔））再次1分钟。确保整个根系统都插在解决方案中。
为了分析硝酸盐积累，将N饥饿的幼苗转移到含有0.5mM KNO 3 NO 3（原子％<15>）的IRRI营养液中， N：80.25％）24小时。
分别收获根和芽并在液体N中研磨，将粉末在70℃下干燥至恒重。使用同位素比质谱仪系统分析约10mg的每个样品的粉末。
从根的^{N浓度计算¹⁵ ^-的流入或累积。 >}

食谱

IRRI营养液 1.25mM NH 4 NO 3 sub/ 0.3mM KH 2 PO 4 4/v/v 0.35mM K 2 SO 4 4/v/v 1 mM CaCl 2 ^。 2H O 1mM MgSO 4 4次。 7H 2 O 0.5mM Na 2 SiO 3子等 20μMNaFeEDTA 20μMH sub 3 BO ₃ 9μMMnCl 2 。 4H 2 O 0.32μMCuSO 4 sub 5H O 0.77μMZnSO 4 sub 7H 2 O 0.39μMNa 2 MoO 4+ ^{2H 2 O O pH 5.5}
0.1mM CaSO 4溶液（1L） 0.0172g CaSO 4 sub 。 2H O 将ddH ₂ O添加到最终量
K ¹⁵ NO ₃ 0.5mM K lt 15+/NO 3/

致谢

该协议改编自Delhon等人（1995）和Tang等人（2012）。

参考文献

Delhon，P.，Gojon，A.，Tillard，P。和Passama，L。（1995）。 NO 3的日间调节 ^{- < 在大豆植物中的摄取I.在白天/夜晚循环期间植物中NO 3+上清液的流入，流出和N利用的变化。 em> J Exp Bot 46（10）：1585-1594。}
Tang，Z.，Fan，X.，Li，Q.，Feng，H.，Miller，A.J.，Shen，Q.and Xu，G。（2012）。敲除大米硝酸盐转运蛋白可改变长距离易位，但不会改变根系流入。植物生理学 160（4）：2052-2063