材料和试剂

设备

程序

通过在室温下在摇动条件下在1ml除草溶液中浸泡约100粒种子（三次重复）来稀释拟南芥种子15分钟。用蒸馏水洗至少五次，以去除漂白剂。
注意：在无菌条件下执行步骤1-3。
划痕后，去除多余的水，种子与1％TZ溶液在30℃暗处24至48小时孵育种子（24小时后观察种子，如果出现染色，继续步骤3）。取热杀死（100℃，1小时）种子作为阴性对照
染色后，用蒸馏水将种子洗2-3次
将染色的种子浸泡在清洁剂中1-2小时。
按照步骤4，如果种皮内的颜料在染色后阻碍清晰的视觉
在立体显微镜下观察种子。
根据染色模式和颜色强度评估种子。在染色的种子中，具有亮红色染色的种子是完全存活的，而部分染色的种子可以产生正常或异常幼苗。粉红色或灰色红色指示死亡组织。完全未染色的种子是不存活的。图1显示了存活（正常），异常和死亡或非存活种子的TZ染色模式

图1. TZ染色的不同模式显示可见，异常和死亡或非活性种子
平行地，将约100个种子无划痕地放置在用蒸馏水浸泡在培养室中的两层Whatman 1号滤纸上以用于发芽测定（进行一式三份的发芽测定）。通过考虑超过睾丸的胚根突起作为发芽的种子来评分种子发芽。要得分萌发，计数不。的种子与胚根突起作为发芽的种子，并计算发芽百分比对总数。的种子

食谱

笔记

致谢

该协议改编自Porter等人（1947）和Wharton（1955）。这项工作得到生物技术部（授权号BT/PR10262/GBD/27/77/2007）和印度政府植物基因组研究国家研究所的支持。

参考文献

Porter，R.，Durrell，M。和Romm，H。（1947）。使用2,3,5-三苯基四唑氯化物作为种子发芽率的量度。 a> Plant Physiol 22（2）：149
Verma，P.，Kaur，H.，Petla，B.P.，Rao，V.，Saxena，S.C.and Majee，M。（2013）。蛋白L-ISOASPARTYL METHYLTRANSFERASE2 在鹰嘴豆中差异表达，并增强种子活力和通过减少异常的异天冬氨酸积累主要在种子核蛋白中的长寿。植物生理学161（3）：1141-1157。
Wharton，M.J。（1955）。使用四唑测试来确定芸苔属种子的存活力。 Proc Int Seed Test Assoc 20：81-88。