材料和试剂

棉花
75％乙醇
盐酸氯胺酮（100mg/ml）（Ketaject，Phoenix Pharmaceuticals，NDC编号：57319-542-02）
甲苯噻嗪盐酸盐（100mg/ml）（AnaSed注射液，LLOYD，NADA数：139-236）
舒舒卡因（盐酸利多卡因）2％果冻（AstraZeneca，NDC编号：0186-0330-01）
杆菌肽锌软膏（USP 500U/g）（Fougera Pharmaceuticals，NDC编号：0168-0011-31）
盐水（0.9％氯化钠注射液USP）

设备

敞篷
高压灭菌器
铝箔
Dumont＃5 forcep（Fine Science Tools，目录号：11254-20）
Dumont＃3c forcep（Fine Science Tools，目录号：11231-20）
Cohan-Vannas弹簧剪（Fine Science Tools，目录号：15000-02）
精细剪刀（Fine Science Tools，目录号：14060-09）
UNIFY丝绸手术缝[小（P-3）13毫米，反向切割3/8圆针。 4-0 18"/45厘米螺纹]（AD手术）
酒精垫（PDI，目录号：B603）
手套
显微镜
照明器（AmScope，目录号：型号HL250-AY）
加热垫（Harvard Apparatus，目录号：507220F）

程序

手术前一天
1. 用紫外线杀菌照射灭菌罩1小时。
2. 高压灭菌包裹铝箔的外科工具，一些棉包裹铝箔和另一N + 1（N是待缝合的小鼠的数量）铝箔。手术工具包括两个Dumont＃5镊子，一个Dumont＃3c镊子，一个Cohan-Vannas弹簧剪刀和一个精细剪刀。
3. 在手术前一天用75％乙醇消毒缝合针和线。
手术当天
1. 将所有的手术工具和一些酒精垫放在消毒罩中
2. 用100mg/kg氯胺酮盐酸盐和10mg/kg盐酸赛拉嗪的混合物腹膜内麻醉小鼠。
3. 用酒精垫清洁老鼠，然后把它放在一个灭菌的铝箔。将所有的工具放在另一个箔。用75％乙醇喷涂手套。
4. 在显微镜和照明器下，使用无菌针和线在Dumont＃5镊子的帮助下缝合眼睑如下：做2-3针，拧紧线，做两个结，并用细剪刀切割线尽可能短。对于超过三天的单眼剥夺，在缝合之前使用弹簧剪刀剪下睫毛和眼睑的边缘。如果出血，在继续之前先用棉花停止。
5. 在缝合的眼睑上涂上薄层的xylocaine 2％果冻和杆菌肽锌软膏。
6. 将鼠标放在加热垫上。
7. 用75％乙醇喷洒手术工具，用酒精垫清洁，并将其放回铝箔。处理用于鼠标的脏铝箔。
8. 对其他小鼠重复步骤2-7
9. 将所有的小鼠放回笼子里，确保它们完全恢复。
10. 清洁所有的手术工具和罩用75％乙醇。用紫外线杀菌照射灭菌至少一小时。
单眼剥夺后
1. 在剥夺期结束时，麻醉小鼠，取出缝线，分离盖边缘。用无菌盐水冲洗眼睛，并在显微镜下检查透明度。只要使用没有角膜混浊或感染迹象的小鼠。

致谢

该协议改编自已发表的文章：Ma等人。（2013）。这项工作得到了H.W.T. 来自国立卫生研究院（EY019049和EY022478）和Kirchgessner基金会。

参考文献

Hubel，D.H。和Wiesel，T.N。（1963）。非常年轻，视觉缺乏经验的小猫在条纹皮质中的细胞接受区域。 J Neurophysiol 26（6）：994-1002。
Ma，W. P.，Li，Y. T.和Tao，H. W.（2013）。皮层抑制的下调在关键时期介导眼部优势可塑性。 Neurosci 33（27）：11276-11280。