材料和试剂

'Micro-Tom'（筑波大学的Ezura教授和Mizoguchi教授，<茄科> cv。'Micro-Tom'，在茄科家族中的模型植物）。 'Micro-Tom'是矮矮表型栽培种，最初首次报道于1989年，通过杂交佛罗里达篮和俄亥俄4013-3（第12代）固定（Martí等人，2006） 1）。

图1.茄属cv。 'Micro-Tom'
营养液[Ootsuka house 5（OAT house 5）OATagurio Co.Ltd。2776（ http://www.oat-agrio.co.jp/en/product/index.html ）

MS（Murashige和Skoog）矿物盐（Wako Pure Chemical Industries，Siyaku，目录号：392-00991）

Gamborg's B-5维生素（Sigma-Aldrich，目录号：G1019）

蔗糖（Wako Pure Chemical Industries，Siyaku，目录号：193-00025）

琼脂（Bacto琼脂）（BD，目录号：214010）

营养液（见配方）

MS（Murashige和Skoog）培养基（Li，2011）（参见配方）

设备

岩棉（一种矿棉）（A0 25/40,25×25×40mm）（Nitoubou Co.Ltd。目录号：762-090）
鼓风机（空气泵，100V，工作压力0.012MPa）（YASUNAGA CORPORATION，型号：LP-30A（图2A）
三通管（金属6mm口径）（Nissei Sangyo Corporation，目录号：25424）（图2B和2C）
6mm硅管（孔径4mm）（图2B）
气石（17 x 17 x 60毫米）（图2D）

图2.水耕培养系统的部件A. 鼓风机，B。6 mm硅管，C.三通管，D.气石（17 x 17 x 60 mm）
浅容器（根据您的项目规模大小。在这种情况下，我们使用一个10厘米深的容器，一个很好的例子是Tupperware。我们应该使用防光型容器，因为它们保护藻类。）
穿孔的聚苯乙烯泡沫板（2.5cm厚，3.5cm孔直径，孔之间的距离为约12cm）（图3）

图3.穿孔聚苯乙烯泡沫板（2.5厘米厚，3.5厘米孔径）
植物盒（DUCHEFA Biochemie，Steri Vent Low容器，目录号：S1682.0048和Standard Closure lids，目录号：S1681.0032）
海绵（日常使用型）

程序

在温室（图4A-B）中

图4.使用水培培养生长'Micro-Tom'植物。A.从种子发芽到移栽幼苗进入水耕培养; B.从开花到成熟。
1. 将种子浸泡在浅水容器中的蒸馏水中过夜以发芽（图4A）
2. 将发芽的种子转移到岩棉（图4A）
3. 生长"微汤姆"幼苗约2周（图4A）
4. 转移"微汤姆"幼苗，通过用岩棉除去它们 ?并将它们放入聚苯乙烯泡沫板中的孔中（图4A）。
5. 加入1/2公式营养液（稀释至一半用水浓缩）到容器中（将其填充到约2/3）并使用鼓风机将气泡送入番茄根部区植物（图5）。花在播种后约45天开花，并且在播种后约53天果实开始生长更大。成熟开始于播种后约70天（图4B）注意：通过使用三通管，您可以从1发送气泡鼓风机进入多个容器以提高效率。值得的提到根区通常不适当的气泡供应导致植物生长不良和最终腐烂症状。水耕文化不腐烂，因为它不断接受空气供应，但需要 ?改变约一次非常7天（与新的营养液）。比容器小的聚苯乙烯泡沫板可能离开水培培养物暴露于光，这可以导致藻类生长。如植物生长继续水栽培会慢慢消耗，这 ?可以在聚苯乙烯泡沫板和聚苯乙烯泡沫板之间留下薄的空气空间文化，导致生长的问题。泡沫板需要 ?相同尺寸并且很好地适合容器，优选地具有海绵/岩石羊毛被浸泡在文化中。
  
  图5.水培文化系统
  
  图6，'Micro-tom'植物在水培培养（16小时光照/8小时黑暗，26℃）中生长
在植物屋
除了在温室条件下生长外，我们还开发了在植物室中水培生长的方案（在26℃下6小时光照/8小时黑暗）。
1. 播种灭菌的种子并在植物盒中生长'Micro-Tom'植物（MS 含有2％蔗糖的培养基）中培养3周（图7）（Li，2011）
2. 从箱子中提取3周植物，以免伤害他们的根（图7）
3. 在提取的幼苗的茎上轻轻地缠绕海绵（图7）
  
  图7.在MS培养基中生长的3周植物准备转移海绵是幼苗的根茎并放置 ?进入聚苯乙烯泡沫板的孔中
4. 将带有海绵的幼苗转移到聚苯乙烯泡沫板的孔中（图5）
5. 使用吹风机在同一个发送气泡水耕文化方案（在温室中）。根生长在水培中 2至3周后培养（图8）
  
  图8. 2?3周后，'Micro-Tom'在水培培养基中的根部
  
  注：每个容器的植物密度是一个重要的考虑因素较高的密度可导致增加霉变等问题。为一个容器约30×50厘米大小，考虑生长15植物或更少以避免疾病和其他问题（图5-6）。

食谱

营养液
KNO _{3 808 mg/L
MgSO 4 7H 2 O 492mg/L
Ca（NO 3）/sup> 4H 2 O 944mg/L
NH 4 H H 2 PO 4 152mg/L
微量元素50 mg/L
Mn 0.77ppm
B 0.32ppm
Fe 2.85 ppm
Cu 0.020ppm
Zn 0.040ppm
Mo 0.020ppm}
Murashige和Skoog（MS）培养基
1. Murashige和Skoog（MS）矿物盐
2. Gamborg的B-5维生素
3. 2％蔗糖
4. 0.8％琼脂（Bacto琼脂）
5. 用KOH调节pH至5.7

致谢

这项工作得到教育，文化，体育，科学技术部（日本）[科学研究助理（No. 20510190和23580039至R M）]的支持。

参考文献

Aoki，K.，Yano，K.，Suzuki，A.，Kawamura，S.，Sakurai，N.，Suda，K.，Kurabayashi，A.，Suzuki，T.，Tsugane，T.，Watanabe， Ooga，K.，Torii，M.，Narita，T.，Shin，IT，Kohara，Y.，Yamamoto，N.，Takahashi，H.，Watanabe，Y.，Egusa，M.，Kodama，M.，Ichinose ，Y.，Kikuchi，M.，Fukushima，S.，Okabe，A.，Arie，T.，Sato，Y.，Yazawa，K.，Satoh，S.，Omura，T.，Ezura，H.and Shibata ，D。（2010）。对来自番茄的全长cDNA的大规模分析（ Solanum lycopersicum ）栽培品种Micro-Tom是茄科基因组学的参考系统。 BMC Genomics 11：210.

Li，X。（2011）。拟南芥生长方案 - 一般指南生物协议 Bio101：e126。

Marti，E.，Gisbert，C.，Bishop，G.J.，Dixon，M.S.and Garcia-Martinez，J.L。（2006）。番茄cv的遗传和生理表征。 Micro-Tom。 J Exp Bot 57（9）：2037-2047。

Suzuki，M.，Takahashi，S.，Kondo，T.，Dohra，H.，Ito，Y.，Kiriiwa，Y.，Hayashi，M.，Kamiya，S.，Kato，M.，Fujiwara， Fukao，Y.，Kobayashi，M.，Nagata，N.and Motohashi，R。（2015）。番茄果实发育中的质体蛋白质组学分析 PLoS One 10（9）：e0137266。