材料和试剂

大鼠

设备

注意：ro d和倾斜线网是由在五金店购买的材料自制的。

杆（30.0cm L×1.0cm）
丝网（69.5cm W×45cm L，3cm间隙）

程序

运动协调在HI损伤后评估21天（P28）[参见Vannucci等人（1999）关于由我们修改的HI方案的描述]（Ferrari等人 >，2010）。简而言之，将怀孕的Wistar大鼠水坝（处于胎龄E17）置于12小时光照 - 黑暗循环中，随意获取食物和水。出生日是出生后第0天（P0），并且在P1上，将幼仔从每个水坝中剔除至10只幼崽，并在水坝中随机混合，每个实验产生20只幼崽。在第P7天，将所有幼仔从大坝中移出，称重，性别并随机分配到一组：假手术或HI-处理的。然后将它们麻醉，分离左颈动脉并永久结扎。假手术只麻醉，切口，立即缝合和伤口清洁没有任何进一步的操作。恢复后，幼崽返回大坝90分钟，然后将它们移除并暴露于8％氧气90分钟，此时它们返回坝。

试棒保持试验和丝网上升试验
在P21，将幼仔断奶并随机分成每笼5只幼仔。所有行为训练和测试在上午8点和下午4点之间进行，并且幼崽在运动评估之前至少30分钟被带到测试室以最小化应激相关的混杂。每个小狗在两次测试中的每一次之前连续3天每天训练5次。在测试当天，每个动物进行五个独立试验的每个试验，试验之间的休息时间为5分钟。对于酒吧保持测试，幼仔在他们的家笼中花费他们的休息时间，并且对于丝网上升测试，幼崽花费其在网格顶部的封闭平台中的休息时间。所有幼犬在每次训练和测试后立即放回原来的笼子里。
酒吧举行测试
如先前由Tchekalarova等人（2005）所述，并且由Ferrari等人（2010）和Infante等人（2013年）稍微修改的（2013年）），允许幼崽抓住直径为1cm并且长30cm的木条，其悬挂在填充的软表面上方50cm处。测量在具有前肢的棒夹持棒上花费的时间最大为120秒。显示的结果是每只幼仔的5次记录的平均值（Sham，n = 11; HI，n = 23）。该试验解决运动协调和功能障碍
丝网上升测试
如前所述（Tchekalarova等人，2005; Thonhoff等人，2007; Ferrari等人，2010; Infante等人， et al。，2013），将小狗放置在网格的底部，并且测量小狗上升网格的时间长达120秒。 1cm厚的塑料网是45cm长和15cm宽，并且以70°的角度放置，与顶部的升高的封闭平台接触，并且在底部具有填充的软表面。作为上升的刺激，同窝幼仔放置在上面的封闭平台上，并允许适应环境5分钟，然后测试。显示的结果是每只幼仔的5次记录的平均值（Sham，n = 19; HI，n = 25）。该试验解决运动协调障碍和社会驱动力

代表数据

图1.栏持有测试

图2. 丝网上升测试

图3. HI损害运动协调（Ferrari 等人 > 2010）

笔记

与所有行为实验一样，动物必须由执行评估的单个人每天处理。测试室必须安静，只有进行评估的个人才能在房间内
当进行丝网上升测试时，至关重要的是在顶部有兄弟姐妹，以提供动机，以获得更均匀的结果。

致谢

这项工作得到国防部，国家卫生研究院和NICHD的支持。

参考文献

Ferrari，D.C.，Nesic，O.B.and Perez-Polo，J.R。（2010）。氧气复苏不能改善新生儿缺氧/缺血引起的脑水肿。 J Neurosci Res 88（9）：2056-2065。
Infante，S.K.，Rea，H.C.和Perez-Polo，J.R。（2013）。新生儿缺氧缺血在子代中的跨代效应。 Int J Dev Neurosci 31（6）：398-405。
Tchekalarova，J.，Kubova，H。和Mares，P。（2005）。产后咖啡因暴露：对发育过程中运动技能和运动活动的影响 Behav Brain Res 160（1）：99-106。
Thonhoff，J.R.，Jordan，P.M.，Karam，J.R.，Bassett，B.L.and Wu，P。（2007）。 ALS大鼠模型中早期疾病进展的鉴定 Neurosci Lett 415（3）：264-268。
Vannucci，R.C.，Connor，J.R.，Mauger，D.T.，Palmer，C.，Smith，M.B.，Towfighi，J。和Vannucci，S.J。（1999）。围产期缺氧缺血性脑损伤的大鼠模型 J Neurosci Res 55（2）：158-163。