材料和试剂

无菌罩
不可再吸收丝：Prolene 7.0（Ethicon，目录号：F1839）
可再吸收丝：Vicryl 4.0（Ethicon，目录号：V134）
Syringues（BD Biosciences，目录号：309659）
2条鞋带（约20厘米）
气管导管（Fine Science Tools，目录号：RSP-ETT1605）
气管内管（Kent Scientific Corporation，目录号：RSP-ETT1605）
大鼠成年雄性Wistar大鼠加权约300g（Charles River Laboratories International）
皮肤Betadine 10％
抗生素：阿莫西林（Clamoxyl 100 mg/kg/24 h）
三色染料（Masson）试剂盒（Sigma-Aldrich，目录号：HT15）
抗肌节α肌动蛋白抗体[EA-53]（Abcam，目录号：ab9465）

设备

气体麻醉输送系统（Minerve）
通风器（Kent Scientific Corporation，型号：TOPO220）
精细弯曲钳（Fine Science Tools，目录号：11272-30）
Shaver（Kent Scientific Corporation，目录号：CL8787）
Rasor刀片（Fine Science Tools，目录号：10008-13）
Scalpel（Fine Science Tools，目录号：10011-00）
针架（Fine Science Tools，目录号：12001-13）
牵开器（Fine Science Tools，目录号：17012-11）

程序

麻醉
1. 诱导严重麻醉，同时提供3.5％异氟烷和1.5％氧气。高百分比的异氟烷以便诱导作为开胸术的深度麻醉需要执行。
2. 将大鼠放入诱导室。用纸巾盖住盒子，将动物放在黑暗的环境中减少压力）。
3. 将通气系统设置为50呼吸 ?循环/分钟。压力设置为30mmHg和潮气量每个循环为2.5/3ml;根据大鼠体重（0.5ml/100g体重重量）。压力不得超过2 mmHg。这些参数已设置 ?与鼠一起使用。
4. 将气管导管插入通气系统，如果不清洁导管，内部压力不得超过5至6 mmHg。
5. 一旦达到深度麻醉（呼吸频率低于每分钟50个周期和脚垫反射损失），打开抽吸系统，并从诱导室中取出老鼠。
  用细弯曲的镊子拉出鼠舌，并在a的帮助下 ?光找出气管孔径。将气管插入气管
  
  图1.老鼠嘴的解剖
6. 快速插入气管插管通风系统。确保没有错误的方式通过检查肺肿胀。如果食管已经插管，操作者将清楚地注意到胃膨胀并且必须移除管立即。
7. 在大鼠没有正确插管的情况下，操作者必须让其从麻醉完全恢复重新启动从步骤A1开始的过程
8. 将气管管连接到动物的牙齿，然后到其鼻子。
手术
1. 将大鼠在背外侧卧，并将光线放在它的顶部
2. 附加动物的左前脚，以拉伸它。
3. 剃掉胸部和胸骨的左侧部分。
4. 用Betadine消毒皮肤。
5. 切割皮肤与45度角从胸骨。
6. 使用圆头镊子，从更表面的皮肤分离 ?肌肉层（胸大肌），然后从更深的分离肌肉层（serratus anterior）。
7. 牢牢握住6 ^th肋切割在第6 ^和第5肋之间的肋间肌，诱导胸廓切开术。在6 ^th和5 ^th之间插入卷收器。
8. 进行心包切开术用精细弯曲的钳子：从使心包的心尖部分释放左心室。
9. 使用永久性丝，继续左前结扎冠状动脉。进入心室肌与旋转运动，这允许停留在肌肉内部并避免穿透内部心室。
10. 减少异氟烷通量至1.5％。
11. 取出牵开器，将排水管放入心腔。
12. 停止麻醉。
13. 关闭胸部：用非永久性丝加入2个肋。然后 ?关闭肌肉层。关闭第二肌肉层，然后皮肤。
14. 排空腔，用Betadine清洁皮肤。
手术后护理和康复
1. 通过每48小时和在一周内肌内注射（200mg/kg）来施用抗生素。
2. 使动物左脚自由，并删除气管管。
3. 停止通风，但检查动物的恢复。如果它停止呼吸，立即放回通风。直到动物完全恢复了强烈的呼吸并开始显示管不适。
4. 取出试管，同时用注射器吸出粘液
5. 将大鼠在背部躺在石南花下，检查它，直到它完全清醒。
6. 24小时和48小时后给予抗生素。
7. 48小时后死亡率非常低。

代表数据

图2.梗塞和健康大鼠心脏的体外表征的示意图; （PET）描述。 18F-氟脱氧葡萄糖（FDG）-PET是人和大鼠中的参考心脏成像技术，因为其能够准确地区分健康的坏死心肌基于心肌细胞的代谢活性。（1）通过Fluorodeoxyglucose-PET在体内记录在相同大鼠中的垂直长轴切片（上半部分）和通过μIMAGER^TM体外记录的垂直长轴切片。（2）免疫组织化学数据（下半部分）显示梗塞区段内的纤维化发展（Masson三色的蓝色）和细胞骨架元件的减少（棕色的α-肌质肌动蛋白染色）。显示来自具有大MI的大鼠和假手术大鼠的图片。放大率* 40。（Bousquenaud et al。，2012）

笔记

通过其形状和直径，大鼠左前冠状动脉的解剖学显示出强烈的个体间变异性。因此，不管操纵器的经验的准确性和水平如何，该外科模型提供了可变程度的心肌梗塞。在规划使用的动物数量以获得显着结果时，必须考虑这一点。
动物的存活率非常依赖于手术后的恢复速度。建议在开始缝合肌肉时开始减少异氟烷通量，并在皮肤伤口闭合后立即停止麻醉。这只能在实验者快速工作时才能进行，因为从异氟烷麻醉中的恢复快。

致谢

这项工作得到了国家研究基金，心血管疾病研究学会，卢森堡文化，高等教育和研究部以及"法国基金会"的资助。

参考文献

Bousquenaud，M.，Maskali，F.，Poussier，S.，Marie，P.Y.，Boutley，H.，Karcher，G.，Wagner，D.R。和Devaux，Y。阿昔单抗增强（1）（8）F-氟脱氧葡萄糖正电子发射断层扫描术表征和预测早期重建在大鼠梗塞模型中。 Int J Cardiovasc Imaging 28（6）：1407-1415。
Bousquenaud，M.，Maskali，F.，Poussier，S.，Zangrando，J.，Marie，PY，Boutley，H.，Fay，R.，Karcher，G.，Wagner，DRand Devaux，。腺苷在心肌梗死边界和偏远地区的心脏保护作用 EJNMMI Res 3（1）：65.
Bousquenaud，M.，Wagner，D.R.，Maskali，F.，Marie，P.Y.and Devaux，Y。（2013b）。由FDG-PET证实的大量左心室梗死后的长期生存，并且仅保留完整的隔膜。 Int J Clin Exp Med 6（1）：84-85。