第一部分。正电子发射断层扫描（micro-PET）成像

在活体动物的内体位置处的肿瘤的成像比皮下肿瘤的成像更具挑战性。我们已经优化了以下方案中概述的程序，以研究基因修饰的小鼠和原位模型中的肺肿瘤。简言之，在施用[18 F] - 氟脱氧葡萄糖（18 F-FDG）剂量之前将小鼠麻醉，并在整个探测期间保持麻醉摄取和成像，确保在任何时候小鼠是温暖的。小鼠处理和麻醉使用的标准化对于确保数据再现性和可比性是至关重要的。

材料和试剂

Lacryvisc Gel 10 G（3 mg/ml carbomere in benzalconium chloride）（Alcon）（ http://www.alcon.com ）
1-cc结核菌素注射器（B.BraunEspa?a，型号：Omnifix-F）
30-G针（B.BraunEspa?a，型号：Sterican）
加热垫[例如 Gaymar Mul-T-Pads（Gaymar industries）（ http：//www。 gaymar.com/）]
加热泵保持加热垫的温度[例如 Gaymar TP600（Gaymar industries）（ http：//www.gaymar.com/）]
具有内源性肺肿瘤（即我们自己的K-Ras ^{G12V 诱导型小鼠模型，Guerra等人，2003）的遗传修饰的小鼠模型，肺原位肿瘤的原位移植（Ambrogio等人，2014）或尾静脉注射的肺肿瘤细胞（Ambrogio等人，2014）（图1） />

图1.可通过PET-CT扫描检测的鼠肺肿瘤的类型 PET-CT技术可用于检测不同来源的肺肿瘤：从左侧，内源性肺肿瘤（<在遗传工程改造的小鼠模型中由K-Ras 驻留敲入等位基因诱导的肿瘤），尾静脉注射的肺癌细胞系或原位植入的肺肿瘤（鼠或人肺腺癌）。比例尺：200μM}
必要时使用特殊的小鼠饮食（Cussó等人，2014）
吸入麻醉：
七氟烷[例如 Sevoflo（Abbott Laboratories，目录号：05458-02）（http://www.abbottanimalhealth.com/veterinary-professionals/products/anesthesia/sevoflo.html ）]
从O 2浓缩器获得的氧气
每天从局部回旋加速器（例如<40> mCi的[18 F]）中递送的[^{18 F] FDG（0.01至0.1μg/mCi） FDG，在pH6.0下缓冲的1ml生理盐水溶液中的放射化学纯度为95％至99％，用于?10个微PET扫描）}
生理盐水：0.9％（w/v）NaCl（B.BraunEspa?a）
Lacryvisc Gel 10 G（3mg/ml carbomere in benzalconium chloride）（Alcon）（ http://www.alcon.com < a>）

设备

O 2浓缩器（Eickemeyer Veterinary Equipment，型号：Oxymat e3）
红外加热灯Philips PAR38 IR 175W E27（皇家飞利浦电子）
具有诱导室和用于小鼠McKinley，2型（Everest tecnologia veterinaria）的吸入掩模的七氟烷/基于氧的麻醉系统
剂量校准器（也称为活度计）[例如 VDC-505剂量校准器（Veenstra Instruments）（ http://www.dosecalibrator.com/）]
微型PET-CT成像系统[例如eXplore Vista PET-CT（GE Healthcare）（图2）; Argus PET-CT（SEDECAL）（ http://www.sedecal.com/）]

图2.小鼠的Micro-PET-CT机器（Argus SEDECAL）
用于图像采集，处理和分析的工作站（ Dell PowerEdge）符合以下规格：
1. PE1950 Xeon 5120 1.86 GHz/4 MB 1066 FSB处理器
2. PE1950 PCIX Riser（2插槽）
3. PE1950挡板组件
4. 2 GB FB 667 MHz内存（2 x 1 GB双列DIMM）
Alienware Dell Studio XPS Desktop 435 MT PC（用于3DOSEM图像重建）符合以下规格：
1. 处理器：Intel Core i7 Quad CPU 940 4 x 2.93 GHz
2. 内存：6144 MB（6 x 1,024）1067 MHZ DDR3
3. 图形：ATI Radeon HD 3450 256 Mb GDDR2

软件

用于图像采集，处理和分析的eXplore Vista PET-CT MMWKS软件（Desco等人，2005）或AMIDE软件（Loening和Gambhir，2003）

程序

准备，镇静和麻醉小鼠
1. 饮食条件。对于胸部肿瘤的检测，小鼠描述在Materials and Reagents，Pag。 1）配制的商业高脂肪饮食（例如，饮食D12451 从研究饮食，45％的总卡路里来自脂肪）或，或者，向日葵种子，其中富含植物脂肪 ?在分析前24小时。这将减少葡萄糖摄取心肌，在很大程度上消除干扰这是由于在标准饲喂下高的心脏摄取条件（Cussóet al。，2014）。
2. 运输小鼠到成像单元前一天探索，准备饮食，并确定自己的体重。
3. 在笼子上放置一个红外灯，以保持小鼠在注射前保持温暖。
4. 小心握住鼠标，使其尾部靠近红外线灯（?5cm），3?4分钟。小心不要暴露整体动物到灯，以避免过度的身体加热
5. 一旦尾静脉扩张，将小鼠引入麻醉 ?室，其中将通过吸入诱导6％的深麻醉七氟丙烷在100％氧气中以1.5L/min的速率。
  注意：或者也可以使用i.p.注射含有氯胺酮（200mg/kg）和赛拉嗪（10mg/kg）的混合物。
管理放射性标记的探针
1. 转移麻醉的小鼠到注射区，并使用结核菌素屏蔽注射器和30-G针头，向其中注射[18 F] FDG ?在尾部（图3），剂量为18.5MBq，体积为0.2ml 生理盐水（0.9％NaCl），用a
  
  图3.管理探针。尾静脉将放射性探针注射到麻醉的小鼠中防护注射器
2. 一旦注射，维持小鼠麻醉，以0.2L/min在100％氧气中提供3％的七氟醚避免在[18 F] FDG摄取期间由于小鼠运动引起的肌肉摄取）时间，即30-45分钟。
  注意：对于微PET-CT成像，在[ ^{F] FDG期间进行微CT图像采集（5分钟）吸收期。在[ ¹⁸ F] FDG管理后等待25-40分钟，然后 ?进行微CT研究;将进行微PET研究紧接在微CT完成之后。麻醉在获取微PET-CT成像期间所需的浓度（0.2L/min）低于用于麻醉的浓度感应（1.5L/min）}
执行图像采集
1. 在将小鼠放在探查台上之前，给予眼睛润滑剂（Lacryvisc Gel 10G），以避免小鼠的角膜损伤麻醉，因为在这些条件下，闪烁反射丢失。在图像采集期间，小鼠必须用面罩麻醉在100％氧气中以0.2L/min提供3％的七氟醚
2. 将微PET机探测台上的加热垫设置在37°C的恒温下
3. 将小鼠放在探查台上，以尽可能伸展的俯卧位置，以最小化器官重叠
4. 按如下所述执行图像采集。
  1. 执行空白测试。空白测试是没有的空采集 ?任何辐射。它必须每天做，在任何真正的工作之前出来，以评估玻璃检测器的正确功能微PET设备。如果系统正常工作，由确定 ?空白测试，然后用户可以开始正常操作微PET。软件程序MMWKS VISTA CT（Gleason等人，2007; Pascau等人，2012），选项"PET ACQ"被选中，并且选择5分钟持续时间的静态研究，没有任何同位素
  2. 选择胸部，确保所有肺小叶将获得并开始采集第一床位置：PET 扫描被获取为一系列不同的床运动，称为床位置（对于标准身体扫描通常为1-3）。在每个床位置，扫描仪在设定的时间内获取，然后移动大约1cm并开始获取下一床位置。所有的这些单独的框架然后被编织在一起以形成最终的图像，这应该需要10和30分钟之间。如果我们不想看远处转移我们可以避免全身采集和减少总扫描时间。
  3. 将收购分成两部分。选择或创建将保存并创建研究的文件夹所谓的侦察（被研究区域的划界），或者使用以前创建的侦察（如果同一个鼠标的微CT 已经执行，这个给定的鼠标的侦察兵已经可用）。一旦胸区被分隔，选择种类的微PET研究进行，定义的持续时间程序，要使用的同位素和同位素的能量窗（参见下一点肺的方案选择）。
  4. 选择 ?预定义的名为"静态"的微PET采集协议。这个协议允许一个床位;它需要以前的知识感兴趣的解剖区域（在这种情况下，胸部区域）。这个是标准肺肿瘤研究的首选方案。
  5. 执行微PET探索设置同位素的类型为¹⁸ F和 ?将较低能量阈值设置为150KeV。而收购是在进度，确保巧合数在200和之间这用作用于注射的质量控制放射性标记的化合物。巧合数等于由放射性分解产生的检测光子数。如果重合次数不在此范围内，则不会可能执行微PET采集。在最后一个例子中，用户应该再次注射另一剂量的探针，以便有足够的同时检测事件。
5. 一旦微PET 采集完成后，从设备中取出鼠标，断开连接麻醉，并取小鼠到一个温暖的笼子里，他们将醒来他们自己的。
重建微PET图像
1. 选择用于图像重建的选项。图像的三个选项重建在eXplore Vista PET-CT设备中可用： 2D-FBP（滤波反投影），2D-OSEM（有序子集期望 ?最大化）和3D-OSEM。作者的偏好是3D-OSEM与迭代次数设置为80并采用随机衰减和散射校正。以这种方式，我们实现两种适当的成像质量和空间信号定位的补偿合理计算资源和可接受的计算运行时间。
  注意：运行3D-OSEM需要独立的PC。平均运行用于3D-OSEM计算的时间（80次迭代，随机和散射校正）在Dell Studio XPS Desktop 435MT PC上<2分钟。
量化数据
1. 一旦重建了总扫描体积，检查图像直到a 在解剖位置中识别正[18 F] FDG信号与肺肿瘤一致，并且与正常器官摄取不同 ?（例如，心脏，膀胱，肾脏，以及较小程度的棕色）脂肪组织）（图4）。
2. 手动绘制感兴趣区域（ROI）围绕肿瘤的周边。随后，检查相邻软件已自动绘制相同ROI的部分;如果需要调整，可以手动完成。
  注意：3D-OSEM 重建算法采用立方体素。软件预先确定重构的立体体素的大小;在我们的设备，其值为0.7×0.7×0.7mm。因此，肿瘤体积以立方体素的体积单位建立。它必须得到验证所有的肿瘤活性已被包括。 [
3. 从上一步描述的定量，计算标准吸收值（SUV）。
  注意：两种类型的SUV测量可以使用平均值计算 ?SUV（SUV _ave ）和最大SUV（SUV _max ）公式如下：
  SUV _ave = [摄取（MBq）/体积的ROI（cc）]/[小鼠体重[ ¹⁸ F] FDG dose（MBq）x calibration factor] 校准因子从获取填充的幻影获得辐射并且特定于每个PET机器。性能是在每个设备的用户手册中描述。
  SUV _max = ?具有最大活动性的体素（MBq）/体素的体积（cc）]/[小鼠重量（g）x注射[¹⁸ F] FDG剂量（MBq）x校准系数]
  SUV _ave 反映每单位体积的放射性量整个ROI体积。 SUV _max 反映每单位的放射性在ROI内的体素处的体积与最大摄取值。在小鼠的特定情况下，由于大的变异性放射性标记的化合物分布，建议标准化在正常的参考/背景ROI的感兴趣的ROI的结果肺。例如，数据可以表示为肿瘤与的比例背景（TBR）。在图4中，来自肺肿瘤的代表性图像，其中SUV _max值为约1至3MBq/cc，SUV _mean值 ?约0.5至1 MBq/cc。
  
  图4. PET定量的实施例。肺肿瘤PET信号的轴向视图和相应的分析ROI （白色箭头）。黄色箭头表示背景ROI放置在健康肺。

第二部分。计算机断层扫描（微CT）成像

微-CT研究比微PET更简单，因为微CT需要很少或没有制备。然而，小鼠必须在麻醉下固定以避免由运动引起的伪像。同样，为了防止麻醉诱导的低体温，小鼠必须通过加热垫保持在恒定的体温。外源性造影剂通常用于改善肿瘤和周围健康组织之间的信号比，但是为了检测肺肿瘤，不需要对比度。

材料和试剂

加热垫[例如 Gaymar Mul-T-Pads（Gaymar industries）（ http：//www。 gaymar.com/）]
加热泵保持加热垫的温度[例如 Gaymar TP600（Gaymar industries）（ http：//www.gaymar.com/）]
具有内源性肺肿瘤的遗传修饰的小鼠模型（Guerra等人，2003），原发性肿瘤的肺原位植入（Ambrogio等人，2014）或尾静脉注射的肺肿瘤细胞（Ambrogio等人，2014）（图1）
吸入麻醉：
七氟烷[例如 Sevoflo（Abbott Laboratories，目录号：05458-02）（http://www.abbottanimalhealth.com/veterinary-professionals/products/anesthesia/sevoflo.html ）]
从O 2浓缩器获得的氧
Lacryvisc Gel 10 G（3mg/ml carbomere in benzalconium chloride）（Alcon）（ http://www.alcon.com < a>）

设备

O 2浓缩器（Eickemeyer Veterinary Equipment，型号：Oxymat e3）
红外加热灯Philips PAR38 IR 175W E27（皇家飞利浦电子）
具有诱导室和用于小鼠McKinley，2型（Everest tecnologia veterinaria）的吸入掩模的七氟烷/基于氧的麻醉系统
用于呼吸门控的多参数监测器（图5）[例如 Vision Vet（RGB）（http://www.medicalexpo.com/prod/rgb-medical-devices/product-69843-493296.html）]
红外线加热灯
配有诱导室和小鼠吸入面罩的七氟烷/氧基麻醉系统
用于图像采集，处理和分析的工作站（ Dell PowerEdge）符合以下规格：
1. PE1950 Xeon 5120 1.86 GHz/4 MB 1066 FSB处理器
2. PE1950 PCIX Riser（2插槽）
3. PE1950挡板组件
4. 2 GB FB 667 MHz内存（2 x 1 GB双列DIMM）

软件

用于图像采集，处理和分析的eXplore Vista PET-CT MMWKS软件（Desco等人，2005）或AMIDE软件（Loening和Gambhir，2003）

程序

准备，镇静和麻醉小鼠
1. 麻醉小鼠：将小鼠引入麻醉室，其中a 深度麻醉将通过吸入6％七氟烷在100％ ?氧气以1.5L/min的速率。并保持温暖;应用一些眼睛润滑剂（Lacryvisc Gel 10G）到角膜，按规定保护在上面的协议，然后将鼠标放在扫描仪室内。对于micro-CT采集小鼠不需要事先准备（特殊饮食和镇静）。
2. 在启动micro-CT之前，选择胸区并正确设置不同的参数。参数用于CT采集通常设置在以下范围内值：
  1. 电源强度：140至1,000 mA。
  2. 拍摄张数：从1到32。
    注意：镜头数指的是X射线的次数 ?从源发射。虽然更高的拍摄数量导致了 ?更高的信噪比，它也导致更大的采集时间和更大的辐射损伤小鼠（见步骤A4 ）。
  3. 分辨率：标准（200μm），高（100μm）或最大（50μm）
  4. 投影数：从360?到720?。
    注意：投影数量是指的旋转数围绕小鼠的X射线束，以六十进制度表示。双 ?全旋转（720°）与单全旋转（360°）导致图像具有较高的信噪比，但成本较高获得时间，并因此，小鼠的更大的暴露危险能源和麻醉。
  5. 床位数：1 ?一个床位置为胸部成像就足够了。
    注意：更多比一个床位置需要，它们叠加在每个的顶部其他，导致部分图片重叠。
3. 修复鼠标探测表用胶带即使他们麻醉，最小化不自主运动。一旦小鼠准备好探索表，降下Vista-PET-CT的保护屏蔽屏 ?锁定安全钥匙以执行数据采集。
标准微CT数据采集
1. 标准采集参数有：电源强度为 ?150mA，标准分辨率为（200μM）的电压为45kV， 360°和16张照片为1床位置，或8张照片，如果执行2床位置。上述获取参数对应于辐射剂量在0.6Gy的小鼠中
2. 为了选择采集区域观察由微CT机生成的侦察图像。这个侦察员给出一个投影，用户可以看到主题是如何放置。
3. 选择，借助激光，开始和结束用户想要获取（例如，胸部）的ROI 地区）。我们还可以从micro-PET研究中选择以前的侦察已经在同一会话中完成，只要它对应同样的鼠标和我们没有改变其处置探索表
胸部CT的呼吸道选通
1. 从外部监控设备获取呼吸信号同时与微CT扫描（图5;呼吸运动人为因素在CT采集中是重要的，特别是在情况下胸部研究）。采集后，根据外部信号。这产生两个独立的扫描，对应于吸入和呼气（分组中间阶段也是可能的）。
  
  图5.动物处理和 ?监测。将装有电极的鼠标引入PET-CT ?机器（左图）;生命常数监控（VisionVet，RGB http：//www .medicalexpo.com/prod/rgb-medical-devices/product-69843-493296.html ） ?记录ECG，温度和呼吸频率（右图）
2. 停止麻醉输送一旦micro-CT采集结束，从设备中取出小鼠，并放入温暖的笼子里他们会自己醒来。
微CT图像重建
1. 使用修改版本的锥形束（CB）重建图像 Feldkamp，Davis和Kress的算法（FDK，Vaquero等人，2008）包括在eXplore Vista PET-CT的软件中。
  注意：FDK是一个 ?广泛使用的滤波投影算法为三维图像重建从锥形束投影测量与圆形 ?X射线源的轨道。算法的重建时间在Dell PowerEdge工作站上运行时间<5秒。
使用ROI进行量化
1. 通过视觉检查图像识别肺肿瘤。
2. 画手动地围绕肿瘤的周界的感兴趣区域（ROI）。随后，检查软件绘制的相邻部分相同ROI;如果需要调整，可以手动完成（图6）。软件预先确定体素的大小。我们的重建软件采用50 x 50 x 50μm的立方体素来定义ROI。的所选ROI的体积（以立方厘米表示）为由系统自动计算
  
  图6. ROI的示例在CT，PET和融合图像中选择。示例显示（从左到右）向右）胸腔的轴向，矢状和冠状切面。的在所有三个部分中可见的ROI以纯黄色显示。 H：心。肿瘤用白色箭头指示。绿色箭头指向骨髓和黄色箭头标记棕色脂肪组织。

第三部分。多模式成像（微PET-CT）

小鼠在探索过程中的固定对于多模态成像研究中的图像共注册是必要的。如果在微PET和微-CT研究中的位置不同，通过微PET和显微CT获得的图像的匹配（共同对准）是不可能的。

材料和试剂

1-cc结核菌素注射器（B.BraunEspa?a，型号：Omnifix-F）
30-G针（B.BraunEspa?a，型号：Sterican）
加热垫[例如 Gaymar Mul-T-Pads（Gaymar industries）（ http：//www。 gaymar.com/）]
加热泵保持加热垫的温度[例如 Gaymar TP600（Gaymar industries）（ http：//www.gaymar.com/）]
具有内源性肺肿瘤的遗传修饰的小鼠模型（Guerra等人，2003），原发性肿瘤的肺原位植入（Ambrogio等人，2014）或尾静脉注射的肺肿瘤细胞（Ambrogio等人，2014）（图1）
必要时使用特殊的小鼠饮食（Cussó等人，2014）
吸入麻醉：
七氟烷[例如 Sevoflo（Abbott Laboratories，目录号：05458-02）（http://www.abbottanimalhealth.com/veterinary-professionals/products/anesthesia/sevoflo.html ）]
从O 2浓缩器获得的氧气
每天从局部回旋加速器（例如<40> mCi的[18 F]）中递送的[^{18 F] FDG（0.01至0.1μg/mCi） FDG，在pH6.0下缓冲的1ml生理盐水溶液中的放射化学纯度为95％至99％，用于?10个微PET扫描）}
生理盐水：0.9％（w/v）NaCl（B.BraunEspa?a）
Lacryvisc Gel 10 G（3mg/ml carbomere in benzalconium chloride）（Alcon）（ http://www.alcon.com < a>）

设备

O 2浓缩器（Eickemeyer Veterinary Equipment，型号：Oxymat e3）
红外加热灯Philips PAR38 IR 175W E27（皇家飞利浦电子）
具有诱导室和用于小鼠McKinley，2型（Everest tecnologia veterinaria）的吸入掩模的七氟烷/基于氧的麻醉系统
剂量校准器（也称为活性计）[例如 VDC-505剂量校准器（Veenstra Instruments）（ http ：//www.dosecalibrator.com/））
微型PET-CT成像系统[例如eXplore Vista PET-CT（GE Healthcare，图2）; Argus PET-CT（SEDECAL）（ http://www.sedecal.com/）]
用于图像采集，处理和分析的eXplore Vista PET-CT MMWKS软件（Desco等人，2005）或AMIDE软件（Loening和Gambhir，2003）
用于图像采集，处理和分析的工作站（ Dell PowerEdge）符合以下规格：
1. PE1950 Xeon 5120 1.86 GHz/4 MB 1066 FSB处理器
2. PE1950 PCIX Riser（2插槽）
3. PE1950挡板组件
4. 2 GB FB 667 MHz内存（2 x 1 GB双列DIMM）
Alienware Dell Studio XPS Desktop 435 MT PC（用于3DOSEM图像重建）符合以下规格：
1. 处理器：Intel Core i7 Quad CPU 940 4 x 2.93 GHz
2. 内存：6144 MB（6 x 1,024）1067 MHZ DDR3
3. 图形：ATI Radeon HD 3450 256 Mb GDDR2

程序

准备小鼠
1. 在多模态探索之前准备小鼠，如所述 ?micro-PET探索在相应的协议，步骤1至6.
  注意：多模态探索需要极度注意护理的小鼠以及不断监测的温度，因为研究时间比单独使用CT或PET更长。
获取微CT图像
1. 在[^{18 F] FDG摄取期间进行微CT图像的采集 ?（持续45分钟）。参见micro-PET方案，步骤8和显微CT 协议。}
获取PET图像
1. 按照与相应的方案步骤7至13中所述相同的程序进行微PET图像采集。
重建图像
1. 单独重建两个图像，并使用MMWKS软件获得协同寄存器（图6-7）。
  
  图7.肺肿瘤的PET-CT成像。代表轴向 FDG-PET扫描的投影显示肿瘤FDG-PET信号（由一个箭头）。 H：心脏，B：骨髓。肿瘤用黄色表示箭头。
量化图像
1. 一旦肺肿瘤已经确定，量化的微CT图像和微型PET图像，如上述方案中所述。
呈现卷
1. 生成数据的3-D渲染，以更加图形化的方式获得肺肿瘤位置和体积的信息（图8）。
  
  图8.肺癌的纵向研究的实施例。 3-D肺在指定的两个时间点的PET-CT研究的效果图携带遗传诱导的肺肿瘤（红色）的个体小鼠，用载体（上图）或用治疗化合物治疗 ?（下图）。

致谢

该协议已经改编自先前公开的研究"通过PET，CT和组合PET-CT成像在小鼠中的癌症"（Mulero等人，2011）。我们感谢分子成像核心单位的专业知识和对这里描述的协议的优化的关键贡献。这项工作得到了CDTI（西班牙科技部西班牙工业技术发展中心），AMIT项目"高级分子成像技术"（5710001425）到FM的资助。 CA是西班牙抗癌协会（AECC）的博士后研究员的接受者。

参考文献

Ambrogio，C.，Carmona，FJ，Vidal，A.，Falcone，M.，Nieto，P.，Romero，OA，Puertas，S.，Vizoso，M.，Nadal，E.，Poggio，T.，Sanchez- Cespedes，M.，Esteller，M.，Mulero，F.，Voena，C.，Chiarle，R.，Barbacid，M.，Santamaria，D.和Villanueva，通过原位小鼠同种异体移植建模肺癌的进展和临床前反应。癌症研究 74（21）：5978-5988。
Cusso，L.，Vaquero，J.J.，Bacharach，S。和Desco，M。（2014）。在小鼠中减少心肌18F-FDG摄取的方法比较：钙通道阻滞剂与高脂肪饮食。 PLoS One 9（9）：e107999。
Desco，M.，Penedo，M.，Gispert，J.D.，Vaquero，J.J.，Reig，S.and Garcia-Barreno，P.（2005）。 ROC评估在[15O] -H 2中脑活动的统计小波分析 O PET扫描。 Neuroimage 24（3）：763-770。
Gleason，S.S.，Austin，D.W.，Beach，R.S.，Nutt，R.，Paulus，M.J.and Yan，S。（2007）。一种新的多功能多模式小动物成像平台。在： IEEE核科学研讨会会议记录。 pp 2447-2449。
Guerra，C.，Mijimolle，N.，Dhawahir，A.，Dubus，P.，Barradas，M.，Serrano，M.，Campuzano，V.and Barbacid，M.（2003）。内源性K-ras致癌基因的肿瘤诱导高度依赖于细胞环境。 em> Cancer Cell 4（2）：111-120。
Loening，A.M。和Gambhir，S.S。（2003）。 AMIDE：用于多模态医学图像分析的免费软件工具 Mol成像 2（3）：131-137。
Mulero，F.，Donate，L.E。和Serrano，M。（2011）。通过PET，CT和组合PET-CT成像小鼠中的癌症 Curr Protoc Mouse Biol 1（1）：85-103。
Pascau，J.，Vaquero，J. J.，Chamorro-Servent，J.，Rodriguez-Ruano，A.and Desco，M。（2012）。小动物PET/CT对准校准的方法。 Phys Med Biol。57（12）：N199-207。
Vaquero，J.J.，Redondo，S.，Lage，E.，Abella，M.，Sisniega，A.，Tapias，G.，Soto Montenegro，M.L。，和Deseo，M。（2008）。一个新的高性能小动物X射线断层扫描仪的评估。在：关于核科学的IEEE交易。 pp 898-905。