材料和试剂

纸毛巾
实验室饲养的小鼠
注意：将小鼠保持在每组3-5只，保持在具有控制温度（?23℃）和湿度的房间中，12小时光照/黑暗循环（上午7:00点亮），随意进入到食物和水。
70％乙醇

设备

用于明/暗转换测试的装置由分为小（三分之一）暗室和大（三分之二）发光隔室（Crawley和Goodwin，1980）的盒子（42×21×25cm）组成。 3厘米高，4厘米宽的限制开口连接两个室（图1）
间接白光源
数字照度计
摄像机（直接放在设备上方）
用于手动分析的数字计时器或用于自动分析的计算机

图1.光暗转变测试仪

软件

TSE-Systems，型号：VideoMot2（用于自动分析的计算机软件）

程序

该设备放置在隔离的房间中，远离任何外部干扰和低强度白光源的噪声
实验者必须限制在测试期间产生任何过度的噪声和具有强烈气味的气味产品的佩戴，因为它可以作为小鼠的抗焦虑刺激。
在照明室内的照明必须是200-400勒克斯或更多，而另一个室是黑暗（5勒克斯或更少）。
在实验前将小鼠在家笼中转移到行为测试室至少30分钟
用70％乙醇清洁设备的两个隔室
打开相机，将第一个鼠标放在明亮照明的房间中间。
实验者尽可能远离箱子，并且远离测试动物的视线。
允许小鼠在两个室之间自由移动5分钟（Costall等人，1989）。
每次试验后，取出所有的尿和粪便，并用70％乙醇清洗两个室
记录的视频可以通过自动计算机软件或者借助于计时器手动地分析。对以下参数进行评分（图2）：

进入暗室的延迟时间（Costall等人，1989）。
在照明/暗室中的时间
在照明室内行进的距离。
转换次数。

代表数据

图2.来自光 - 暗转换测试的样品数据显示TG小鼠的抗焦虑样行为。 A.在光照室中花费的时间; B.在照明室内行驶的距离; C.进入暗室的延迟时间; D.转换数。

笔记

LDT最初由Crawley及其同事开发（Crawley和Goodwin，1980）。在原始版本和我们的测试之间有两个区别。首先，在原始版本中，测试的持续时间为10分钟，而我们仅使用5分钟测试时间（Costall等人，1989）。第二，在原来的版本中，照明隔间的墙是透明的，而我们使用不透明的白色塑料的墙壁。因此，与原始版本相比，我们的测试协议对于检测明亮空间焦虑更具体，其中也开放空间焦虑得分。
通常，雄性小鼠用于行为实验，因为发情周期的变化可能影响雌性在这种测试中的表现（Simpson等人，2012）。
基线活性可根据小鼠品系和年龄而变化
为了确保均匀的亮度，使用间接光以避免产生阴影，这可以是鼠标的优选地点。
两个隔室必须在每个动物测试后始终清洁，并在清洁后完全干燥，因为清洁剂的强烈气味可能改变小鼠的行为。
只有当动物在其中放置2只额爪时，才考虑进入亮的或暗的隔间。如果动物用这两只爪子回到隔间，则没有登记入口

致谢

这里描述的协议已经改编自以前的研究（Serchov等人，2015），成功地识别小鼠的抗焦虑样行为。这项工作是由德国研究委员会（DFG）（CA 115/5-4）授予D.v.C。和K.B.，欧盟FP7程序"MoodInflame"至D.v.C.和德国研究和教育部（DMBF）给予K.B.的生物模拟I-ReelinSys（项目B：031 6174A）。

参考文献

Costall，B.，Jones，BJ，Kelly，ME，Naylor，RJ和Tomkins，DM（1989）。在黑色和白色试验箱中探测小鼠 - 作为焦虑模型的验证药物生物化学：777-785。
Crawley，J.和Goodwin，FK（1980）。苯并二氮杂卓的抗焦虑作用的简单动物行为模型的初步报告.Pharmacol Biochem Behav 13（2）：167-170。
Serchov，T.，Clement，HW，Schwarz，MK，Iasevoli，F.，Tosh，DK，Idzko，M.，Jacobson，KA，de Bartolomeis，A.，Normann，C.，Biber，K.and van Calker， D.（2015）。通过腺苷A1受体增加信号传导，睡眠剥夺，丙咪嗪和氯胺酮通过诱导Homer1a抑制抑郁样行为。 Neuron 87（3）：549-562。
Simpson，J.，Ryan，C.，Curley，A.，Mulcaire，J.和Kelly，JP（2012）。