材料和试剂

手术手套（Cardinal Health，目录号：2D72N80X）
1 ml结核菌素（TB）注射器（BD，目录号：309625）
可溶性缝合线，尺寸：0000
动物：8-12周龄雌性小鼠
注意：切除的腺体需要移植到同一株鼠标中。如果供体和受体具有不同的菌株，受体必须免疫受损（即，从Balb / c小鼠切除并移植到NSG小鼠）。
Nembutal钠溶液CII（Pentobarbital sodium injection，USP）（Akorn，Oak Pharmaceuticals，NDC 76478-501-20）
Ketofen ^{®（酮洛芬）（Zoetis，目录号：10004029）}
70％乙醇

设备
1. 平衡
2. 吹风机（Remington，型号：PG525）
3. 止血钳（Roboz Surgical Instruments，目录号：RS-7131L）
4. 夏普/球尖剪刀（精细科学工具，目录号：14086-09）
5. 大鼠牙镊子（Sklar Surgical Instruments，目录号：19-1260）
6. 弯曲镊子（精细科学工具，目录号：11052-10）
7. 加热垫（Sunbeam Products，目录号：000771-810-000U）
8. 绕线夹施放器，拆卸器和夹子（BD，目录号：427638）
  
  程序
  1. 乳腺切除术（视频中不包括）
    1. 使用相同的手术准备和下述手术步骤C1-C2，定位要切除的乳腺并使用弯曲的钳子，确保整个腺体暴露并完全与体腔分离。
    2. 使用大鼠牙镊子抓住腺体，使用锋利的剪刀开始将腺体从皮肤上切开，直到整个腺体从皮肤上脱离出来，并一体成型。
    3. 立即将切除的腺体转移到受体鼠，并继续进行手术步骤C3
    4. 准备老鼠进行手术
      1. 称重鼠标。
      2. 使用1 ml TB注射器，腹膜内腹膜内给予40 mg / g体重的Nembutal（这将提供1小时的镇静）。
      3. 等到老鼠睡着了;通过踩脚检查后肢反射来确认。
      4. 用剪刀刮腹部。
      5. 使用1ml TB注射器，在氯胺酮注射部位的相对侧腹膜内施用5mg / kg体重Ketofen 。这是为了缓解疼痛。
      6. 将鼠标放在手术板上，用手术胶带固定四肢。
      7. 用70％酒精消毒腹部。
      8. 手术
        
        使用球头剪刀，倒置Y切口，露出腹壁和腹股沟垫。从腹股沟乳头下方的中线开始延伸约1英寸;延伸两侧的第四和第五个乳头之间的另外两个切口。
        
        用鼠齿镊子握住皮肤，并使用弯曲的镊子，将皮肤与腹壁分开。用针固定皮瓣以露出腹壁。
        
        将切除的腺体置于腹壁两侧的腹壁上。确保腺体平躺在墙上，不会如下所示扭曲（图1）。
        
        图1.排泄的腺体必须平放在腹壁上
        
        使用止血钳，弯曲镊子和缝合线，将移植腺的每一端缝合到腹壁，如下所示（图2）。
        
        图2.切除腺体两端的一条缝合线
        
        重新定位皮瓣，并用伤口夹闭合切口。
        
        手术后
        
        允许鼠标在加热垫恢复到最低设置（〜110 F）。让老鼠重新恢复意识，然后返回笼子（30分钟到1小时）。
        注意：请注意，镇静剂持续1小时。
        
        24小时腹腔内腹膜内给予5 mg / kg体重的Ketofen ^。
        
        手术后7-10天取出伤口夹。
        
        监测，每周触诊肿瘤形成。
        
        笔记
        
        受试者为8至12周龄的处女女性NSG，购自Jackson Laboratories。堪萨斯大学医学院动物护理与使用与人体科学委员会批准的方案进行动物实验。所有研究人员必须在执行程序之前通过自己的机构批准该协议。
        
        致谢
        
        该协议是在堪萨斯大学医学院贝勒医学院和病理学和实验室医学系的分子和细胞生物学系开发的。这项工作得到NCI（1K99 / R00 CA127462）对FB的支持。
        
        参考
        
        Medina，D.和Kittrell，F.（2005）。 Stroma不是DMBA介导的小鼠乳腺发育不全的肿瘤发生的主要靶点。细胞科学118（Pt 1）：123-127。