材料和试剂

血吸虫感染的仓鼠组织（肠和肝脏）
NaCl
1.2％（w/v）NaCl（高压灭菌）（见配方）
0.85％（w/v）NaCl（高压灭菌）（见配方）

设备

Waring搅拌机，可变速度控制（Eberbach，型号：8580半微容器和2速Waring电源基本单元）
不锈钢筛（Newark Wire Cloth sieve No.40,80,140,325;网孔为420μm，180μm，105μm和45μm）
塑料喷雾瓶（如 Curtin-Matheson）
具有平底的玻璃培养皿（Corning Incorporated，100×20mm）
巴斯德移液器
血细胞计数器
显微镜

程序

在最大肝脏和肠血吸虫卵水平（感染后18周）时杀死仓鼠。
用剪刀剁碎感染的组织（肠和肝），悬浮在1.2％NaCl中，然后置于Waring混合器中。低速混合组织30秒。筛子从顶部到底部（420μm，180μm，105μm和45μm）（参见图1）组装，具有逐渐减小的孔径。使混合的材料通过粗糙的筛子（420μm孔）
收集保留在筛子顶部的组织并再次混合30秒，这一次在中等速度。
使所得材料通过之前的多孔菌，从筛子的上表面收集剩余的组织，并在最高速度设置下混合30秒。让组织通过粗筛子再次。
将滤液通过一系列孔径不断减小的不锈钢筛，使用装有1.2％NaCl的塑料喷雾瓶通过连续筛选冲洗滤液。
在通过上筛重复洗涤后，蛋将保留在最终筛（孔径为45μm）上。
为了减少残留仓鼠组织的污染，准备第二组筛并将含蛋溶液通过粗筛（420μm开口），并重复步骤4和5.
将蛋从最后的筛子洗涤到玻璃培养皿中。轻轻旋转，将鸡蛋集中在盘子的中间（鸡蛋看起来像棕色沙粒，用肉眼），用巴斯德吸管抽吸，并将它们放在冰管中。在每次取出蛋以保持体积不变时，向培养皿中加入足够的1.2％NaCl，并重复旋转和浓缩蛋，直到不再能够集中在培养皿的中间。
注意：为了获得最佳效果，应使用底部完全平坦的培养皿收集鸡蛋。
当在旋转时没有更多的蛋可以集中在培养皿的中间时，丢弃培养皿的内容物，将收集的蛋放回具有新鲜的1.2％NaCl的培养皿中，并重复旋转技术，并如前所述收集浓缩的蛋。
最后，使用血细胞计数器计数鸡蛋在几个系列的这些纯化步骤后，大部分组织碎片和未成熟的卵将被消除。最终的卵群将富集成熟的卵。虽然最好使用新鲜的鸡蛋，鸡蛋可以在4℃下保存几天，在0.85％NaCl，没有明显的生存能力的损失。

图1 。

食谱

1.2％（w/v）NaCl（高压灭菌）
0.85％（w/v）NaCl（高压灭菌）注意：对于体内研究的下游，可以将抗生素 - 抗真菌溶液（Life Technologies，Gibco ）加入到最后步骤中使用的盐水溶液中。

致谢

我们承认以下引用本协议的改编：Fu em et al。（2011）; Fu等人（2012）。我们也承认NIH DK087895的资金支持。

参考文献

Fu，C.L.，Apelo，C.A.，Torres，B.，Thai，K.H.and Hsieh，M.H。（2011）。鼠标膀胱壁注射 J Vis Exp （53 ）：e2523。
Fu，C.L.，Odegaard，J.I.，Herbert，D.R.and Hsieh，M.H。（2012）。血吸虫血吸虫卵诱导的免疫病理学的一种新型小鼠模型 /em> Pathog 8（3）：e1002605。
Lewis，F.，Schistosomiasis，in Current Protocols in Immunology。 2001，John Wiley& Sons，Inc.