材料和试剂

硬线布，0.635厘米网眼尺寸，0.61 x 3.05米（Lowe's，Blue Hawk，目录号：492388，型号：840147）
拉链，28厘米，白色，100克拉（Lowe's，Utilitech TM ，目录号：76025，型号：SGY-CT18）
铝饼盘，直径22.2厘米。 x 2.9 cm（Handi-Foil，目录号：20305E-3）
塑料杯，9盎司，透明（Solo，Walmart，554949033）
Woodenskewers /榫钉，直径4.76毫米，长30.5厘米（沃尔玛，554544726）
白色新娘面纱面料，0.22米x 0.18米，网眼尺寸：1毫米 2 （Hobby Lobby，目录号：852640）
A4尺寸白纸（Staples，目录号：135855，型号：135855 / 135855WH）
A4尺寸醋酸纤维板（订书钉，目录号：APOCG7031S，型号：CG7031S）
玻璃瓶40.7ml（Fisher Scientific，目录号：03-338L）
蒸馏水
无臭缠结脚粘胶（Tangle-Trap ®粘性涂层）（TANGLEFOOT，目录号：300000676，部件号LB8249）
Micro 90无味洗涤剂（Micro-90）（Cole-Parmer，目录号：SK-18100-05）
80％乙醇（Sigma-Aldrich，目录号：793191-4X1GA-PB）

设备

剪刀
Hardwire布线切割机，Fatmax 5.08 cm 60 CrV剪刀（Stanley Black＆amp; Decker，目录号：FMHT73563）
4°C冰箱
显微镜

软件

Minitab v.14 /

程序

笼子建筑和数据收集工作流程：

物料
带拉链的硬线布笼组装（见视频1-3）
泛陷阱
陷阱陷阱
新娘面纱和缠结脚
完成笼子与平底陷阱和陷阱陷阱
数据采集
数据存储
视频1-3

在决定寄主植物和陷阱内使用的叶面积之后，展开硬线布并测量构建笼子所需的长度。建议以笼子的圆周足够接近饼盘的标准尺寸的方式构建笼子（参见图1;视频1-4）。然后，使用等式。

周长（长度） = 2π r （r：平移半径）测量长度

图1.陷阱设置和相关的昆虫群落被陷阱吸引。笼内植物产生的挥发物发出一系列化合物，介导昆虫的吸引力，主要属于三个主要的行会，食草动物，传粉者和捕食者/寄生蜂。由于视觉线索被新娘面纱片掩盖，昆虫仅由于挥发性有机化合物而被吸引。三种类型的陷阱（A.泛陷阱，B。粘性新娘面纱和C.陷阱陷阱）相结合，捕获土壤栖息，爬行，低和高飞虫，从而允许我们获得昆虫的社区水平数据集丰富。（UTRGV的Annette Diaz插图）

视频4
使用剪线钳将硬线布料切割成指定的尺寸。生成的矩形可以卷成圆柱体（图2;视频5和6）。

图2.使用钢丝钳切割成规定尺寸后生产的矩形硬线布的圆柱形。 A.硬线切割机根据所需尺寸制作保持架; B.制作笼子所需的硬线布料; C.矩形硬线布的圆柱形。

视频5-6
使用拉链，沿着圆柱长度的多个点关闭笼子（图3和图4;视频7和8），然后将拉链剪断到靠近笼子的小块。

图3.用于固定钢丝笼的拉链

图4.拉链带的近视图，用于固定硬线布料切割成圆柱形的端部

视频7-8
将馅饼盘放在笼子顶部，在锅的两侧做两个孔，用拉链将其固定在笼子上。此时，平底锅陷阱应紧贴笼子顶部（图1;视频9）。将水倒入锅的3/4 th 用于饼盘捕集器，以及杯子的3/4 th 用于陷阱陷阱。添加一滴Micro-90清洁剂以打破表面张力，因此被困昆虫将无法爬出陷阱。

视频9
用一把剪刀剪下三块大小相等的新娘面纱（A4）（图5）。首选尺寸为18 x 22厘米，因此纸张适合A4尺寸纸张。

图5.白色的新娘面纱材料制作粘性陷阱
将面纱片卷成球状，然后慷慨地浸入无味的缠结脚胶中（图6）。

图6.用于制造粘性陷阱的无气味缠结粘性涂层/胶水
将新娘面纱球展开成薄片，并将三个新娘面纱片沿着笼子的周边放置在笼子上彼此等距离（图1和图7;视频10）。

图7.最终陷阱设置。最终陷阱整合了三个新娘面纱粘滞陷阱，铝饼盘陷阱和两个陷阱陷阱，以检查和量化与笼内寄主植物相关的昆虫多样性。

视频10
将笼子放在感兴趣的植物上。如果土壤太干，则沿着土壤表面形成一个凹陷（10厘米），以便固定笼子。在潮湿/潮湿的土壤中，将笼子推入土壤通常就足够了。
沿着笼子的直径将两根扦插入土壤中，以确认笼子固定在土壤中（图8）。

图8.木制扦子为笼子提供额外的支撑，防止不利的天气条件
在地面上，在土壤水平，挖两个洞（r = 4.5厘米，h = 7厘米，l = 7.3厘米）深度足以适合两个杯子。这些孔应在靠近笼子的位置斜向相对地挖出（参见图1）。
将杯子放入孔内时，确保陷阱处于土壤水平。将水倒入杯子的3/4 th 并加入一滴洗涤剂（Micro-90）以破坏表面张力。
在实验期间（48-72小时）将陷阱留在现场。如果实验仅考虑日/夜社区，则根据实验处理和参数，使用垃圾桶（32 Gallon / r = 28 cm，h = 67.5 cm，Walmart Inc.）以所需的间隔覆盖笼子。
在完成实验后，首先收集陷阱陷阱，将它们汇集（如果需要），并在排出水后将内容物转移到含有80％乙醇的玻璃小瓶（Fisher Scientific，4盎司）中。
对笼子顶部的平底锅捕捉器重复相同的步骤。
小心地从笼子中取出每个新娘面纱片（将昆虫粘在它们上面）并将其粘贴在新的A4纸上。立即将醋酸纤维板放在新娘面纱上，以减少粘在新娘面纱上的昆虫的进一步损坏。得到的文件（对于每个笼子）将具有三个单独的数据表，每个数据表具有（a）A4纸层，（b）面纱层，和（c）醋酸纤维素片。
这些薄片可以在4°C下储存，直到用于识别，或者可以直接放在显微镜下进行进一步检查。
在前哨毛虫被喂食的实验中（除了用于笼子实验的移除），必须修改笼子以限制笼子内寄生蜂的任何进入。为此，使用1/8 th 英寸网眼尺寸（0.3 x 0.3 cm 2 ）。

数据分析

分类：根据实验的目的，昆虫可以按照家庭，属和物种的顺序进行识别 - 然后可以根据系统发育和饲养公会进行分类（例如，吸吮刺穿，咀嚼和研磨，虹吸; Kariyat et a l 。，2012）。对于食草和营养相互作用的实验，方法如下：翅翅目的膜翅目（寄生蜂和捕食性黄蜂），蚂蚁;通才和专家鞘翅目食草动物，鳞翅目（毛虫和成虫），捕食性鞘翅目动物（例如，瓢虫科）;双翅目，蚜虫和蚂蚁。来自每个笼子的所有三个陷阱（坑落陷阱，一个平底锅陷阱和三个新娘面纱板）的数据也可以合并以检查与宿主植物相关的整个群落（Kariyat 等人，2012）。
统计：使用MANOVA的多变量统计是使用昆虫行会作为变量分析此类数据集的常用方法（统计软件Minitab v.14; Kariyat et al。，2012）。在分析之前，必须转换每个变量的昆虫计数数据（例如，排名转换，因为它是计数数据）。在MANOVA分析之后，这些变量可以进行单变量ANOVA，减少的模型包括在整个MANOVA中被识别为重要的因子和相互作用项。

笔记

该协议提供了一种简单且廉价的方法来收集昆虫群落数据，对样本的损害最小。此外，与许多其他陷阱不同，雨，风和灰尘只会造成最小的伤害。这种粘性胶水具有防水性，即使在雨中也能保持粘性。可以使用垃圾桶覆盖陷阱以专门针对收集时间（例如，日/夜分离，活跃食草动物/食肉动物喂食时间），并且因为它们由金属丝制成，所以主要陷阱也是可重复使用的。还可以通过改变笼子的大小和形状以适应不同生长模式的植物，基于问题是什么以及宿主植物的类型来修改方案。同样的笼子也可以根据需要拆卸和改造。醋酸纤维上的新娘面纱板可在4°C下保存多年，并可存放在相对较小的空间内。与任何其他野外诱捕/生态协议一样，该组也易于变异，主要是由于田间条件。根据景观和坡度，可能需要额外的土壤加固。应注意确保铝饼盘和陷阱陷阱不会在雨中溢出或变得泥泞。

致谢

我们感谢Drs。 Andrew Stephenson和Mark Mescher帮助设计了笼子。我们还要感谢Kerry Mauck博士对主要手稿的统计数据的帮助。我们也承认许多其他实验室和人员使用我们设计的相似类型的笼子。我们还要感谢Annette Diaz的插图。这项工作由UTRGV战略计划奖和Rupesh Kariyat博士的启动资金资助。作者没有利益冲突或利益冲突。
该协议的简要版本发表在Kariyat 等。，2012 [Inbreeding改变了挥发性信号传导表型并影响了马鞭中的三营养相互作用（ Solanum carolinense L.）] 。

参考

Howe，G。A.和Jander，G。（2008）。植物对昆虫食草动物的免疫力。 Annu Rev Plant Biol 59：41-66。＆nbsp;
Kariyat，R.R.，Mauck，K.E.，De Moraes，C.M.，Stephenson，A.G。和Mescher，M。C.（2012）。近亲繁殖改变了挥发性信号表型并影响了马蹄铁中的三营养相互作用（ Solanum carolinense em> L.）。 Ecol Lett 15（4）：301-309。
Kariyat，R.R.，Mauck，K.E.，Balogh，C.M.，Stephenson，A.G.，Mescher，M.C。和De Moraes，C.M。（2013）。在马蹄内进行近亲繁殖（ Solanum carolinense ）会改变夜间挥发性排放通过 Manduca sexta 飞蛾引导产卵。 Proc Biol Sc i 280（1757）：20130020。
Kariyat，R.R.，Scanlon，S.R.，Moraski，R.P.，Stephenson，A.G.，Mescher，M.C。和De Moraes，C.M。（2014）。植物近亲繁殖和先前的食草动物影响毛毛虫的吸引力（ Manduca sexta < / em>）寄主植物 Solanum carolinense （茄科）的气味。 Am J Bot 101（2）：376-380。
Pare，P.W。和Tumlinson，J.H。（1999）。植物挥发物作为防御昆虫食草动物。植物生理学 121（2）：325-332。