材料和试剂
无菌 6 cm 培养皿（VWR，目录号：25373-085）
铂丝（Tritech Research，目录号：PT-9010）
200 μL微量移液器吸头（Genesee Scientific，目录号：24-151RL）
1 , 000 μL微量移液器吸头（Genesee Scientific，目录号：23-165R）
带有 EZ 翻盖的 15 mL 离心管（ ThermoFisher Scientific，目录号：362694）
1.5 mL微管（ Axygen Scientific，目录号：MCT-150-C）
封口膜（Sigma-Aldrich，目录号：P7543）
10 mL一次性注射器（VWR，目录号：76290-382）
0.2 μm注射器过滤器（VWR，目录号：28145-477）
睫毛刷（由连接在巴斯德吸管上的人睫毛组成，通用，带胶带，通用）
显微镜载玻片（VWR，目录号：48312-004）
显微镜载玻片（VWR，目录号：48366-227）
剃须刀片，通用
LB粉末（ Teknova ，目录号：L9315）
硫酸镁（ MgSO 4 ）（Sigma-Aldrich，目录号：M2773）
胆固醇（Sigma-Aldrich，目录号：C8667）
氯化钙（CaCl 2 ）（Sigma-Aldrich，目录号：C3881）
硫酸链霉素（Sigma-Aldrich，目录号：S6501）
氯化钠（NaCl）（Fisher Scientific，目录号：02-004-047）
Bacto琼脂（BD，目录号：214040）
蛋白胨（BD，目录号：211820）
50％氢氧化钠（Fisher Scientific，目录号：SS254-500）
Clorox ®消毒漂白剂与 CLOROMAX ® –浓缩配方 (Clorox)
油红O（Alfa Aesar ，目录号：A12989）
DAPI（Sigma-Aldrich，目录号：D9542）
二甲基亚砜（DMSO）（Sigma-Aldrich，目录号：D2650-5X10ML）
磷酸氢二钠（Na 2 HPO 4 ）（Sigma-Aldrich，目录号：S9763）
磷酸氢二钾（K 2 HPO 4 ）（Sigma-Aldrich，目录号：P5504）
磷酸二氢钾（KH 2 PO 4 ）（Sigma-Aldrich，目录号：P0662）
氯化钾（ KCl ）（Sigma-Aldrich，目录号：P3911）
Triton X-100（Sigma-Aldrich，目录号：X100-100 ml）
异丙醇（BHD，目录号：BDH1133）
乙醇（VWR，目录号：89125-172）
指甲油（透明，通用）
用于显微镜检查的尼罗红（Sigma-Aldrich，目录号：72485）
丙酮 99.5%（BDH，目录号：1101-1LP）
线虫生长培养基 (NGM) 板（参见食谱）
M9（见配方）
油红 O 原液（见配方）
DAPI 原液（见配方）
磷酸盐缓冲盐水 (PBS)（参见食谱）
PBS + 0.01% Triton X-100 (PBST)（见食谱）
尼罗红原液（见配方）

生物材料
蠕虫菌株（可从Caenorhabditis遗传学中心获得）
大肠杆菌OP50-1（可从Caenorhabditis遗传学中心获得）

设备

2 – 20 μL微量移液器（Gilson，目录号： FA10003M ）
20 – 200 μL微量移液器（Gilson，目录号： FA10005M ）
100 –1 , 000 μL微量移液器（Gilson，目录号： FA10006M ）
用于 1.5 mL 管的微量离心机（Eppendorf，型号：5430）
用于 15 mL 管的离心机（Eppendorf，型号：5702）
安全吸气站（Gilson，型号：F110745）
蠕虫孵化器（通用，保持在 20 °C ）
管旋转器（Thermo Scientific，目录号：88881001）
具有 DIC、DAPI 和 GFP 滤光片以及 5× 和 10× 物镜的复合显微镜（Zeiss，型号：AxioScope5）
彩色相机（蔡司AxioCam 先生）
数码相机（蔡司AxioCam ERc5s）
搅拌板，通用
磁力搅拌棒，通用

软件

图像采集软件
取决于使用的显微镜（在这种情况下，我们使用了 Zeiss Axioscope和相关的 ZEN 成像软件）。
ImageJ（可从 NIH 获得）用于图像量化
数据分析软件
我们使用了 GraphPad prism，尽管任何能够进行t检验的软件都足够了。如果比较多个条件，ANOVA 可能会有所帮助，但并非绝对必要。对于成对比较，可以进行 t 检验，而三个或更多比较将需要 ANOVA。

程序

准备雌雄同体蠕虫用于染色
在用 OP50 播种的 NGM 板上保持 ORO 脂肪染色和/或 NR 脂肪染色所需的菌株的生长。让种群在三代以上不挨饿，以避免表观遗传学引起的变化。
增加将用于脂肪染色的蠕虫菌株（NR 和/或 ORO）。
注意：增加蠕虫需要至少4-6 厘米的成虫板（大约 400 条蠕虫）。
通过碱性次氯酸盐处理使种群同步。
准备漂白剂溶液（需要 6 毫升/株）。
对于 6 mL 的漂白剂溶液，添加 4.5 mL 的高压灭菌 H 2 O、360 μL的 50% NaOH 和 1.2 mL 的漂白剂。
用 M9 将成虫从盘子上清洗成 15 mL 锥形管。将管子填充到 15 mL。
以 630 × g的速度向下旋转 30 秒。
将上清液吸至 3 mL，确保不干扰蠕虫颗粒。
加入 3 mL 漂白剂溶液并剧烈摇晃 1 分钟和 30 秒。（一个 15 mL 的试管将有 3 mL 的漂白剂溶液和 3 mL 的带有蠕虫的 M9，总体积为 6 mL。）
摇动后，加入 9 mL 的 M9 并摇动，然后在 630 × g下旋转30 秒。
将上清液吸至沉淀。将 M9 添加到试管顶部，摇动，并以630 × g离心30 秒。
吸出上清液至 3 mL，确保不要干扰颗粒。
加入 3 mL 漂白剂溶液，剧烈摇晃 45 秒或直到尸体溶解。
注意：此步骤不应超过 1 分钟和 20 秒，以避免样品过度漂白。
摇动后，加入 9 mL 的 M9 并摇动，然后在 630 × g下旋转30 秒。
吸出上清液至 1 mL。添加 14 mL 的 M9 并在 630 × g下旋转30 秒。再重复此洗涤步骤两到三遍。
在最后一个洗涤步骤后，吸出至 1 mL。添加 7 mL 的 M9，并在培养箱中过夜旋转样品。
注意：在试管中留出空间供空气使用很重要，否则样品不会在一夜之间孵化。理想的过夜孵育时间为 12 – 16 小时。
将幼虫阶段 1 蠕虫放到新鲜播种的 6 厘米 NGM 板上。目标是每盘 100 条蠕虫。
L4 幼虫可在下虫后 48 小时染色，第 3 天成虫可在下虫后 120 小时染色（除非菌株发育延迟）。
注意：染色也可以在第 1 天成人（掉落蠕虫后 72 小时）和/或第 2 天成人（掉落蠕虫后 96 小时）进行。
如果对成人进行成像，则每天将蠕虫转移到新鲜的盘子中，直到染色当天。
注意：如果染色蠕虫早于成年第 3 天，请每天将蠕虫移到新鲜盘子中，直到它们停止繁殖。

ORO 脂肪染色
准备60% ORO 染色溶液。
配制染色液：在高压灭菌水中稀释 ORO 原液（每 400 μL水 600 μL ORO 原液）。根据体积，准备在 1.5 mL Eppendorf 管或 15 mL 离心管中。
注意：每个样品使用600 μL 。多做一些以考虑过滤过程中损失的体积（步骤 B.1.d.）。
用封口膜包裹管的顶部。
将ORO 染色溶液放在管旋转器上过夜。
注意：虽然最好在一夜之间准备污渍，但在本协议中使用前最多可以准备两个小时。
第二天，使用连接到 0.2 μm注射器过滤器的 10 mL 塑料注射器将 ORO 染色溶液过滤到新的离心管中。
可选：由于核大小和密度差异，使用 DAPI 共染色样品将有助于识别组织（胚系与肠道）。在 ORO 染色溶液中将1 mg/mL DAPI 库存溶液稀释至 10 μg /mL（每 1 mL ORO 染色溶液中10 μL DAPI）。
用 ORO 染色溶液染色线虫。
NGM将NGM从 6 厘米培养皿中冲洗掉同步蠕虫种群，并将其放入 1.5 mL 管中。对于每种菌株，您将需要约 100 条蠕虫。
离心1 分钟在 25 × g 。去除上清液至 0.1 mL（使用管上的标记作为指导）。
用 PBST 再清洗一次或两次。
注意：这些洗涤从待染色的蠕虫中去除大肠杆菌。洗涤直到上清液清澈且没有细菌混浊。
× g离心 1 分钟。去除上清液至 0.1 mL。
加入 600 μL的 60% 异丙醇，在室温下旋转 3 分钟以固定蠕虫。
× g离心 1 分钟。去除上清液至 0.1 mL。
加入 600 μL的 60% ORO染色溶液，在室温下旋转孵育 2 小时。
25 × g离心 1 分钟。去除上清液至 0.1 mL。
加入 600 μL的 PBST，在室温下旋转孵育 30 分钟。
25 × g离心 1 分钟。去除上清液至 0.1 mL。
使用切割移液器尖端（扩大开口），将 PBST 中的 14 μL蠕虫移液器移到显微镜载玻片上。如果你想把虫子排成一行，在盖上盖玻片之前用睫毛刷做。
盖上盖玻片并用透明指甲油密封边缘。让其干燥 5-10分钟。
蔡司AxioCam ERc5s使用 DIC 和 DAPI 滤镜以10 倍放大图像。代表性图像如图 1 所示。每个复制品至少 100 条蠕虫图像，用于对非 Asdf 与 Asdf（年龄相关的体细胞脂肪消耗）进行定性分析。

在幼虫阶段 4 (AB) 固定和染色的skn-1gf 突变动物的代表性图像，并通过 DAPI 染色的细胞核 (A) 和 ORO 染色的脂质 (B) 进行可视化。比例尺= 50 微米。 _箭头表示肠组织；箭头表示种系。

胚胎后动物的尼罗红脂肪染色
用 PBS + 0.01% Triton X-100 (PBST) 播种的 NGM 将同步蠕虫种群从 6 厘米培养皿中冲洗掉，并将其放入 1.5 mL 管中。对于每种菌株，您将需要约 100 条蠕虫。
25 × g离心 1 分钟。去除上清液至 0.1 mL（使用管上的标记作为指导）。
用 PBST再清洗一次或两次。
注意：这些洗涤从待染色的蠕虫中去除大肠杆菌。洗涤直到上清液清澈且没有细菌混浊。
以25 × g离心 1分钟。去除上清液至 0.1 mL。
加入 600 μL的 40% 异丙醇，在室温下旋转 3分钟以固定蠕虫。
当蠕虫修复时，制作 NR 染色溶液：在 40% 异丙醇中稀释 0.5 mg/mL NR 库存溶液（每 1 mL 的 40% 异丙醇6 μL NR 库存溶液）。
可选：与 DAPI 共染色样品将有助于识别组织（胚系与肠道）。添加 1 mg/mL DAPI 库存溶液（10 μL在 1 mL NR 染色溶液中）。
× g离心 1 分钟。去除上清液至 0.1 mL。
加入 600 μL的 NR 染色溶液，在黑暗中孵育2 小时。
注意：孵育前，轻弹试管底部以将沉淀重悬于染色溶液中。
25 × g离心 1 分钟。去除上清液至 0.1 mL。
加入 600 μL的 PBST，在黑暗中孵育 30 分钟。
25 × g离心 1 分钟。去除上清液至 0.1 mL。
使用切割移液器尖端（扩大开口），将 PBST 中的 14 μL蠕虫移液器移到显微镜载玻片上。
注意：如果你想把虫子排成一行，在盖上盖玻片之前用睫毛刷完成。
盖上盖玻片并用透明指甲油密封边缘。让其在黑暗中干燥 5-10 分钟。
AxioCam使用 DIC、DAPI（蓝色）和 AlexaFluor488（绿色）滤镜以 10 倍放大图像先生。代表性图像如图 2 所示。
每个复制品至少有 50 条蠕虫的图像，用于定量分析。
注意：NR 脂肪染色在 GFP/ AlexaFluor中成像 488 通道和 DAPI 在 DAPI 通道中成像。

图 2.野生型 (N2 Bristol) (AC 和 GI) 和 SKN-1gf 突变动物 (DF 和 JL) 的代表性图像，在幼虫第 4 阶段 (AF) 或成年第 3 天 (GL) 进行固定和染色，并通过以下方式进行可视化DIC（A、D、G、J）、DA PI 染色的细胞核（B、E、H、K）和 NR 染色的脂质（C、F、I、L）。比例尺 = 50 微米。 _

胚胎动物的NR脂肪染色
注意：此协议类似于胚胎后动物的 NR 脂肪染色，但有一些细微差别。细微的差别包括整夜固定胚胎，以 10倍的速度旋转胚胎，以及以 40 – 63倍的放大倍率成像。
通过碱性次氯酸盐处理使种群同步。与其让动物在一夜之间孵化，不如将其吸至 1 mL，并将带有胚胎的 M9 缓冲液转移到 1.5 mL 离心管中。
在2,500 × g下旋转 1分钟。在不破坏颗粒的情况下尽可能多地去除上清液。
用 PBST 清洗样品。以 2,500 × g减速 1 分钟取上清至 0.1 mL。
加入 600 μL的 40% 异丙醇并在室温下旋转过夜以固定胚胎并渗透蛋壳。
第二天，制作 NR 染色溶液：在 40% 异丙醇中稀释 NR 库存溶液（每 1 mL 40% 异丙醇6 μL NR 库存溶液）。添加 1 mg/mL 的 DAPI 库存溶液（10 μL在 1 mL 的 NR 染色溶液中）。
× g离心 1 分钟。去除上清液至 0.1 mL。
加入 600 μL的 NR 染色溶液，在黑暗中孵育2 小时。
注意：孵育前，轻弹试管底部以将沉淀重悬于染色溶液中。
× g离心 1分钟。去除上清液至 0.1 mL。
加入 600 μL PBST 并孵育 30分钟在黑暗中。
× g离心 1分钟。去除上清液至 0.1 mL。
14 μL胚胎移液到显微镜载玻片上。
盖上盖玻片并用透明指甲油密封边缘。让其在黑暗中干燥 5-10分钟。
蔡司AxioCam使用 DIC、DAPI 和 GFP（AlexaFluor488-Green）滤光片以40-63× 成像先生。代表性图像如图 3 所示。
为每个复制品绘制至少 50 个鸡蛋以进行定量分析。
注意：NR 脂肪染色在 GFP/ AlexaFluor中成像 488 通道和 DAPI 映像在 DAPI 通道中。

图 3. DIC (A)、DAPI 染色细胞核 (B)和 NR 脂肪染色 (C) 可视化的固定和染色野生型 (N2 Bristol) 胚胎的代表性图像。比例尺= 10 微米。 _

数据分析

NR染色动物和胚胎的定量分析
通过 ImageJ 下载 Fiji 以打开和分析 . Zen 成像软件中的czi文件： https ://imagej.net/Fiji/Downloads 。
打开斐济。打开.要分析的czi图像文件（文件 - 打开 - 选择文件 - 打开）。
将弹出“生物格式导入选项”窗口。格式如下：
对于堆叠视图，“View stack with: Hyperstack ”。
对于颜色选项，“颜色模式：自定义”。
无需选择其他选项。
堆叠视图和颜色选项后，按“确定”。
将弹出“控制台”窗口。您可以忽略此窗口。
将弹出“生物格式颜色定制”窗口。为用于成像的每个通道选择一种颜色。
例子：
DIC
1) “系列 0 通道 0 红色”：255
2）“系列 0 通道 0 绿色”：255
3）“系列 0 频道 0 蓝色”：255
注意：这些设置将使 DIC 看起来像在成像时一样（不添加颜色）
DAPI
1）“系列0通道1红色”：0
2) “系列 0 通道 1 绿色”：0
3）“系列 0 通道 1 蓝色”：255
注意：这些设置将使 DAPI 通道中的所有图像都变成蓝色。
GFP
1) “系列 0 通道 2 红色”：0
2) “系列 0 通道 2 绿色”：255
3）“系列 0 通道 2 蓝色”：0
注意：这些设置将使 GFP/AlexaFluor488 通道中成像的所有内容变为绿色。
按“确定”。现在图像文件将打开，并带有一个滑块，可以从一个通道移动到另一个通道。
打开“ROI Manager”窗口：编辑-选择-添加到管理器。
打开“结果”窗口：分析- 测量。
确保“结果”窗口具有以下测量值：“面积”、“平均值”和“ IntDen ”。
如果这些未显示在“结果”窗口中，请右键单击“结果”窗口中的灰色条并选择“设置测量值...” 。
选择“面积”、“积分密度”和“平均灰度值”。按“确定”。
移至NR 脂肪染色通道。选择椭圆工具并在一个只有背景的区域绘制一个小形状（没有蠕虫）。测量背景：分析- 测量。背景测量将显示在“结果”窗口中。此背景测量用于调整蠕虫的荧光，以解释图像中的任何自发荧光。
注意：您需要为每个分析的图像进行新的背景测量。如果您在一张图像中有多个蠕虫，则可以对所有蠕虫使用相同的背景测量值。如果您将其保存在“ROI 管理器”窗口中，您可以再次使用此椭圆测量。
当椭圆仍然绘制在图像上时，在“ROI 管理器”窗口中选择“添加 [t]”选项。
重命名为“背景”以记住用于以后的图像：突出显示数字，选择“重命名...”，重命名图像并按“确定”。
移至DIC 通道。选择多边形工具。完全勾勒出蠕虫的轮廓。
注意：为了包括蠕虫进行分析，整个蠕虫必须存在于图像中。
仍然勾勒出蠕虫，移动到 NR 脂肪染色通道。将大纲添加到“ROI 管理器”（“添加 [t]”）。测量轮廓蠕虫中的荧光（分析- 测量）。
关闭图像：文件 - 关闭。
对分析中的所有其他图像重复。
打开图像：文件 - 打开。
移动到 NR 脂肪染色通道。
背景测量：在标记为背景的“ROI Manager”中选择一个 ROI。测量背景：分析——测量。
蠕虫测量：移动到 DIC 通道，选择多边形工具，勾勒出蠕虫的轮廓。移动到 NR 脂肪染色通道，添加到“ROI 管理器”（“添加 [t]”）。测量蠕虫荧光：分析- 测量。
关闭图像：文件 - 关闭。
完成应变/条件后，将 ROI 保存在“ROI 管理器”中：突出显示所有 ROI 并选择：“更多...”，然后选择“保存”并保存。
通过选择所有测量值并复制到将计算区域校正蠕虫荧光强度 (CTCF) 的电子表格来保存所有测量值。
要计算每个图像的 CTCF：将背景区域乘以背景平均值。从蠕虫综合密度中减去该值。除以蠕虫区域。最终值是 CTCF。

((Worm Integrated Density)-(Background Integrated Density))/(Worm Area)

要将所有样本标准化为对照，请计算对照样本的平均 CTCF 值。将所有 CTCF 值（包括对照）除以平均对照 CTCF。现在一切都归一化为控制。
在图表上绘制 CTCF 值。如果有多个样本，可以执行t检验或 ANOVA 以确定样本脂肪含量之间的显着差异。数据的代表性量化如图 4 所示。

用尼罗红染色的秀丽隐杆线虫的定量。
ImageJ 中概述了一条蠕虫（白色），用于尺寸分析和脂质密度（总荧光）。比例尺= 50 微米。 _指定基因型动物种群中脂质丰度的量化[n = 100 for (B) and n = 50 for (D) ];图 2 中的代表性图像）。

ORO 染色动物的定量分析
ORO 染色的动物用于测量整个身体的脂肪滴大小和脂肪分布。例如，ORO 可用于确定已经历 Asdf 的动物的脂肪分布类别，如前所述（ Nhan 等人，2019）。

笔记

NGM 库存板应为所有实验新鲜准备和新鲜播种。
染色溶液应在染色当天 (NR) 或染色前一天 (ORO) 准备好。
始终包括一个对照组，以便在每个实验组内进行比较。
虽然洗涤步骤使用 PBS + 0.01% Triton X-100，但蠕虫和胚胎往往会粘在试管的侧面。建议使成像所需的种群数量增加一倍以上，以补偿一些样本的损失。

食谱

线虫生长培养基 (NGM) 板
4 、5 mg/mL 胆固醇、1 M KH 2 PO 4 、1 M CaCl 2和 2.5% (w/v) 链霉素的库存溶液。
每 1 L 水 (1 M)溶解 120.366 g MgSO 4 。过滤除菌。
每 1 升 100% 乙醇（5 毫克/毫升）溶解 5 克胆固醇。储存在 4 °C。
每 1 L 水 (1 M)溶解 136.086 g KH 2 PO 4 。过滤除菌。
每 1 L 水 (1 M)溶解 110.98 g CaCl 2 。过滤除菌。
每 1 L 水 (2.5%) 溶解 25 g 硫酸链霉素。过滤除菌。储存在 4 °C。
在玻璃烧瓶中加入 3 克 NaCl、17 克琼脂、2.5 克蛋白胨和 950 毫升水。包括搅拌棒。
用箔纸和高压灭菌器覆盖以消毒和溶解琼脂。
在搅拌下冷却至 55 – 60 °C。
添加 1 mL 的 1 M MgSO 4 、1 mL 的 5 mg/mL 胆固醇、25 mL 的 1 M KH 2 PO 4 、1 mL 的 1 M CaCl 2和 7.5 mL 的 2.5% 链霉素。
搅拌15分钟。
使用无菌技术将 11 mL 分配到 6 cm 培养皿中。
让其凝固过夜。
μL OP50-1 过夜培养的种子储备 NGM 板（在 LB + 链霉素中生长，不摇晃）。
让盘子干燥（覆盖）2 – 3 天。
磷酸盐缓冲盐水 (PBS)
在玻璃瓶中加入 26.5 g Na 2 HPO 4 ·H 2 O、80 g NaCl、2 g KCl 和 2 g KH 2 PO 4 。
用水定容至 1 L。
通过高压灭菌消毒。
PBS + 0.01% Triton X-100 (PBST)
使用切割移液器尖端（扩大开口），将 100 μL的 Triton X-100 添加到 1 L 的无菌 PBS 中。
充分混合（不要摇晃）。
M9
在玻璃瓶中加入 30 go f KH 2 PO 4 、60 g Na 2 HPO 4 、50 g NaCl 和 120 mg MgSO 4 。
用水定容至 1 L。
通过高压灭菌消毒。
高压灭菌后可能会发生钙盐沉淀。重新溶解可能需要几天时间。激动有帮助。
DAPI 原液
在 DMSO 中溶解 1 mg/mL。
ORO 的库存解决方案
在玻璃瓶中加入 1.5 g ORO 到 300 mL 的 100% 异丙醇中，最终浓度为 5 mg/ mL。添加搅拌棒。
搅拌过夜。在室温下储存在黑暗中，用箔纸覆盖（可以储存数月）。
可选：搅拌后过滤储备溶液，然后在室温下避光保存。
NR 原液
盖住玻璃瓶。
在玻璃瓶中添加 100 mg NR 用于显微镜检查到 200 mL 的 100% 丙酮。添加搅拌棒。
让我们在黑暗中搅拌过夜。在室温下存放在用箔纸覆盖的黑暗处（可存放数月）。

致谢

协议源自原始研究论文Nhan等人。 “SKN-1 的重定向减少了感知病原体感染的负面代谢结果”Proc Natl Acad Sci 美国，2019 年 10 月 29 日；116(44):22322-22330。 doi ：10.1073/pnas.1909666116 （Nhan等人， 2019）。这项工作由 NIH R01AG058610 资助 SPC ， T32AG052374 资助 NLS 和 BVC，T32GM118289 资助 NLS，以及 T32AG000037 资助 JDN 和 AMH

利益争夺

作者声明没有竞争利益。

伦理

本研究未使用人类或脊椎动物受试者。

参考

卡斯特罗，C.，萨尔，F. ，肖， WR ， Mishima，M. ， Miska ， EA 和 Griffin 。， JL（2012 年）。代谢组学策略定义了秀丽隐杆线虫中 Delta9 去饱和酶对脂质含量和全局代谢的调节。 BMC 基因组学 13:36 。
Greenspan, P., Mayer , EP 和 Fowler ., SD (1985)。尼罗红：细胞内脂滴的选择性荧光染料。细胞生物学杂志100（3）：965-973。
Hammerquist，上午，埃斯科西亚， W. 和 Curran ， SP（2021 年）。 Maf1 调节细胞内脂质稳态以响应 DNA 损伤反应激活。摩尔生物细胞32（11）：1086-1093。
Johnson, AA 和 Stolzing , A. (2019)。脂质代谢在衰老、寿命调节和年龄相关疾病中的作用。老化细胞e13048。
Lynn，DA，Dalton，HM ， Sowa，JN ， Wang，MC ， Soukas ， AA 和 Curran ， SP（2015 年）。 Omega-3 和 -6 脂肪酸分配体细胞和种系脂质，以确保秀丽隐杆线虫在营养和氧化应激期间的健康。 Proc Natl Acad Sci USA 112（50）：15378-15383。
Nhan，JD，Turner，CD，Anderson，SM，Yen，CA，Dalton，HM，Cheesman，HK，Ruter，DL，Uma Naresh，N.，Haynes，CM，Soukas，AA等。（2019）。 SKN-1的重定向减少了感知病原体感染的负面代谢结果。 Proc Natl Acad Sci USA 116（44）：22322-22330。
O'Rourke, EJ, Soukas, AA , Carr , CE 和 Ruvkun , G. (2009)。秀丽隐杆线虫的主要脂肪储存在与溶酶体相关细胞器不同的囊泡中。细胞代谢10（5）：430-435。
Pang, S. 和 Curran , SP (2014)。对细菌饮食的适应能力调节秀丽隐杆线虫的衰老。细胞代谢19（2）：221-231。
Pino，EC，Webster，CM ， Carr ， CE 和 Soukas ， AA（2013 年）。秀丽隐杆线虫脂肪量的生化和高通量显微镜评估。 J V是E xp JoVE(73)。
Stuhr, NL 和 Curran , SP (2020)。细菌饮食不同地改变秀丽隐杆线虫的寿命和健康轨迹。通讯生物学3（1）：653。
Webster, CM, Pino, EC , Carr, CE , Wu, L. , Zhou, B. , Cedillo, L. , Kacergis, MC , Curran , SP 和 Soukas , AA (2017)。用于秀丽隐杆线虫中调节基因的全基因组RNAi筛选确定了蛋白质稳态-AMPK对饥饿的生存至关重要。细胞代表20(3)：627-640。
Zhang, Y., Zou, X. , Ding, Y. , Wang, H. , Wu , X. 和 Liang , B. (2013)。秀丽隐杆线虫脂质代谢基因的比较基因组学和功能研究。 BMC 基因组学14：164。