碘-碘化钾染色法鉴定水稻花粉育性
Identification of Rice Pollen Fertility by Iodine-potassium Iodide Staining   

材料与试剂

1. 离心管
   
2. 载玻片
   
3. 盖玻片
   
4. 75%乙醇
   
5. 碘
   
6. 碘化钾
   
7. 1%碘-碘化钾溶液 (见溶液配方)
   

仪器设备

1. 镊子
   
2. 烧杯
   
3. 显微镜
   

实验步骤

1. 花药采集：水稻抽穗时，取稻穗第二天开花的颖花放于装有75%乙醇的离心管内，一般要求取稻穗的上、中、下部位，花药长度超过颖壳长度的2/3视为成熟花药。
   
2. 镜检：取稻穗上、中、下各一朵颖花的花药放在载玻片上，加1～2滴1%碘-碘化 钾溶液，然后用镊子将花药夹碎，使花粉粒充分释放，盖上盖玻片，用镊子轻压下，静置2-3 min。将其于10倍显微镜下观察。随机观测一个视野，每个视野花 粉量多于200粒。
   注：如果花药不能当天检测，要放入4 °C或 -20 °C冰箱。
   

结果与分析

显微镜下观测结果:
可育花粉粒呈圆形、大而饱满、深蓝色、着色均匀；不育花粉包括无花粉型、典败、圆败和染败共四种类型。无花粉型指显微镜下观测，无花粉或仅留残余花粉壁；典败指显微镜下观测花粉不染色，形状不规则状，如三管形、多边形等；圆败指花粉粒外观圆形，无染色淀粉粒；染败指大多数花粉形态正常，但着色较浅或着色不均匀，也有部分花粉深染色，但粒形明显异于正常可育花粉粒。

溶液配方

1. 1%碘-碘化钾溶液
   称取1克碘放入盛有8 g碘化钾及20 ml水的烧杯中。待碘全部溶解后，将溶液移入100 ml棕色容量瓶中，稀释至刻度，摇匀。
   注：1%碘-碘化钾溶液要避光储存于棕色瓶中。