摘要:主要介绍制备果蝇总RNA的方法,为后面的RNA实验做准备。
关键词: 果蝇, 总RNA, 制备
材料与试剂
仪器设备
实验步骤
注:该实验需要在RNA洁净区操作,RNA易降解,需要使用RNA专用试剂耗材和设备。务必佩戴洁净的手套甚至口罩。
如果您对本实验方案有任何疑问/意见, 强烈建议您发布在此处。我们将邀请本文作者以及部分用户回答您的问题/意见。为了作者与用户间沟通流畅(作者能准确理解您所遇到的问题并给与正确的建议),我们鼓励用户用图片的形式来说明遇到的问题。
通过这个portal 我没有办法upload 胶图。注意:果蝇total RNA的带型和哺乳动物不一样。其中果蝇的ribosome RNA会被切割。刘南
刘老师,感谢您为读者解答!您可以把胶图以图片形式直接在这回复框上传,或发给到这个邮箱eb@bio-protocol.org)我们来替您上传。Bio-protocol 编辑部
没想到会收到您的回复,非常感谢您。这个问题是基于我们在提取果蝇total RNA时,大多数情况下跑胶鉴定只能看见2条rRNA亮带,28S的条带较弱,在这种情况下,我们进行RNA-seq时候发现建库条带大小偶尔会偏小,建库质量较差。所以想了解下大家一般情况28S条带亮度能够达到多少,什么样的情况下,质量足以进行RNA-seq~
关于RNA提取及建库质控的问题 我介绍我组钟叶丹,他是果蝇RNA抽提和建库specialist。钟叶丹的电话(同微信):13661616910。一般我们不用琼脂糖胶来判断果蝇RNA质量,果蝇total RNA(因为存在切割)是非典型胶图。可以咨询叶丹他质控的方式。
非常感谢~