凝胶阻滞(EMSA)
EMSA Protocol
Authors: 王鹏杨莹,
余四斌 and
date: 03/15/2018,
view: 20725,
Q&A: 2
压X光片电泳结束后,将含有凝胶的玻璃板从电泳仪上卸下。 分开胶板后,用比玻璃板略大的一块滤纸对准EMSA凝胶,缓慢小心将EMSA胶从胶板上粘下,再用另一块同样大小的滤纸将凝胶的另一面盖住,轻轻把滤纸和胶压紧,然后用单层保鲜膜将含有胶的滤纸包好压在暗夹内。 注意凝胶内不能产生气泡以免影响样品电泳和放射自显影结果。该步骤可不在同位素室制备,电泳时利用同位素室配置的电泳仪进行操作。 再用同一移液枪吸取内壁指示剂和管底所有样品进行点样到制好的凝胶的梳孔内。电压设置为80-90 V,用新制备的电泳缓冲液进行电泳约1