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日期
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小鼠受精卵原核注射及胞浆注射
Pronuclear Microinjection and Cytoplasmic Microinjection in the Mouse
Authors:
唐蔚
李周结
,
俞骞
,
陈子尘
,
王倩雯
,
陈国元
,
丁一夫
,
吴宝金
and
date:
09/20/2022,
view:
3054,
Q&A:
0
一般情况下,可以明显的分辨出受精卵的两个
原
核
,而未受精的卵母细胞只能观察到1个或无法观察到
原
核
。 使用持卵针吸取边缘清晰、形状饱满且细胞
核
明显的受精卵,调整受精卵的位置,使受精卵体积较大的雄性
原
核
正对
注射
针尖且两者之间的距离最小。 将
注射
针和持卵针安装在显微操作臂上。
原
核
注射
的操作:在100 mm的培养皿中央制作两排20 μl的CB-HCZB操作液,加入5ml矿物油覆盖。
注射
受精卵RNA或DNA显微注射
Fertilized Oocyte Injection
Authors:
樊娜娜
欧阳振
,
王教伟
,
张全军
,
赖良学
and
date:
12/20/2022,
view:
1258,
Q&A:
0
注射
针穿破透明带和质膜进入胞质,将RNA
注射
入胞质,用
注射
泵对每个胚胎注 2-10 pl 的RNA,
注射
后受精卵有明显臌胀。若
注射
物为DNA则将DNA
注射
入雄
原
核
。 在60 mm皿的皿盖中央区域做几个去
核
操作液液滴,并用石蜡油覆盖,用于胞质
注射
。 DNA和RNA需要瞬时离心以去除杂质,避免
注射
时堵塞
注射
针。 用无RNA 酶的枪头将RNA注入
注射
针中,将固定针和
猴胚胎mRNA胞浆注射
Cytoplasmic Injection of mRNA In Monkey Embryos
Authors:
王燕
许玉婷
,
李春杨
,
孙强
and
date:
03/20/2023,
view:
965,
Q&A:
0
,在显微镜下检查
原
核
形成情况,出现两个
原
核
的胚胎视为正常受精;用胚胎转移管将一组受精卵转移到操作皿中,操作尽可能在20-30 min内完成;高倍镜下观察合子状态,确信观察到双
原
核
而且形态良好;用左侧持卵针抓取并固定合子后 观察
注射
针尖端是否通畅,若不通畅,将
注射
针在持卵针上轻轻碰击以增大
注射
针尖的直径,调整合适的
注射
压力;完成
注射
后,将
注射
针从合子中迅速撤出,持卵针放开合子;所有合