PCR扩增及克隆基因
PCR Amplification and Gene Cloning
Authors: 徐远涛徐强 and
date: 06/12/2018,
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Q&A: 0
3.3取出琼脂糖胶放入凝胶成像系统中拍照，检查扩增产物目标条带。 7.4菌液PCR检测阳性：吸取0.5 μl菌液作为模板进行PCR反应扩增目的基因。7.5根据菌液PCR检测结果，挑取3-4个阳性克隆菌液送公司测序。 1.7引物5'端对扩增特异性影响不大，可在引物设计时加上限制酶位点、核糖体结合位点、起始密码子、缺失或插入突变位点以及标记生物素、荧光素、地高辛等。 : 95 °C30 s变性Step 3: 55 °C30 s退火Step 4: 72 °C30-60 s/kb延伸，时间依据PCR产物长度而定Step 5: goto St