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果蝇成虫复眼免疫电镜样品的制备及观察
Preparation and Observation of Immunogold Electron Microscopic Samples of Adult Fly Compound Eye
Authors:
田垚
韩俊海
and
date:
06/20/2019,
view:
4165,
Q&A:
0
图5为
果蝇
复眼
免疫电镜结果图,图中展示了野生型
果蝇
的单个小眼。
果蝇
的单个小眼包含了七个感光细胞 (R1-R7/8),其中感光细胞R1-R6表达光受体Rh1。 取实验所需的
果蝇
品系 (为保证实验成功率,一般每个品系6~8只成虫),用刀片将
果蝇
成虫头部切下,切除口器后从中间将其切成左右两半 (即每个
果蝇
品系样品包含12~16个
果蝇
复眼
),放入固定液中 (可用镊子轻夹样品 包埋板及包埋剂填充烘焙完整样品:取出烘焙好的尖端,用LR White
果蝇感光神经元细胞内记录
Intracellular Recording of
Drosophila
Photoreceptors
Authors:
吴静琳
胡雯
,
韩俊海
and
date:
06/20/2019,
view:
3767,
Q&A:
0
玻璃电极和毛细管挑选1~3日龄的
果蝇
,用镊子夹住
果蝇
翅膀,将
果蝇
翅膀轻轻粘在双面胶上,并使其身体倾斜45°左右,完整露出一侧
复眼
,操作过程中避免触碰到
果蝇
复眼
,以防止
复眼
被损坏。 固定
果蝇
示意图在显微镜下,利用两个1 ml无菌注射器在
果蝇
复眼
表面上开一个0.5 mm左右的小口,尽量避免破坏
果蝇
复眼
内部结构,损伤感光细胞,在开口处抹上少量凡士林,避免开口处干燥,细胞死亡。 最后用单面
果蝇视网膜电图记录
Electroretinogram Recording of
Drosophila
Eye
Authors:
吴静琳
胡雯
,
韩俊海
and
date:
06/20/2019,
view:
4091,
Q&A:
0
(图4和图5)挑选1~3日龄的
果蝇
,用镊子夹住
果蝇
翅膀,将
果蝇
翅膀轻轻粘在双面胶上,并使其身体倾斜45°左右,完整露出一侧
复眼
。操作过程中注意不要触碰到
复眼
,以保持
复眼
的完好。 通过操控三轴精细机械显微操纵器将参比电极轻轻搭在
果蝇
背部涂有导电溶液的位置,记录电极轻放在
果蝇
复眼
表面。 最后用单面胶带固定住
果蝇
腹部,这样既可以保证
复眼
结构完整,又能够避免
果蝇
在实验过程中颤动。(图6)图