染色质免疫共沉淀的搜索结果

染色质前处理和免疫共沉淀(4 °C)4.1孵育抗体和磁珠 (Protein A/G beads) (Tube A’和Tube B’)1)取1 ml的0.3x Nuclei lysis buffer至1.5 separation)酶标仪滤膜 (膜布) Miracloth (Calbiochem, catalog number: 475855)水浴锅-20 °C冰箱-80 °C冰箱实验步骤实验之前： 在进行水稻染色质免疫共沉淀实验之前 4.3免疫沉淀1)将4.2中的Tube

该协议描述了在实验室条件下扩展线虫培养物的基本工作流程，其用于随后制备RNA（微阵列），蛋白质（IP）和DNA /蛋白质（ChIP）。 材料和试剂板材和培养材料：高生长（HG）平板正常生长（NG）平板OP50或RNAi细菌培养物LB培养基（高压灭菌）注意：准备足够的板（用额外的板替换污染的板）。 其他材料：抗生素（羧苄青霉素，四环素）IPTG 胆固醇CaCl MgSO 4 4 /KPO 4 KOH 次氯酸钠M9缓冲区NP40缓冲区O/N文化Triton X-100（Sigma-Aldrich，目录号：9002-93-1）次氯酸钠（Thermo Fisher Scientific，目录

... 染色质免疫沉淀（ChIP）是用于确定特定目标蛋白质的基因组上的DNA结合位点的位置的方法。 交联后，裂解细胞，通过超声处理将DNA断裂成长度为0.2-1.0kb的片段。 ... 加入免疫沉淀抗体（每次抗体的量将不同）到2ml上清液部分中，并在4℃下旋转孵育2小时。 对于阴性对照，通过将上清液部分与0.1μl/μl鲑鱼精子DNA和蛋白A琼脂糖珠的60μl混合物在4℃下旋转孵育1小时来进行无抗体免疫沉淀。