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利用SPR技术高通量筛选蛋白互作活性小分子
High-Throughput Screening for Small Molecules Interacting with Targeted Protein by SPR Technology
Authors:  刘伟谢华彬, 王烁英, 慈云青, 许超, 兰姝珏, 陈铭 and date: 03/06/2025, view: 1904, Q&A: 0
利用已知的可与靶标蛋白发生相互作用的生物分子比如分子化合物、多肽或者蛋白来验证固定在仪器芯片上的配体靶标蛋白是否具有结合活性。 总结本文详述了利用表面等离子共振技术高通量筛选可与靶标蛋白相互结合活性分子的完整实验方案。 该筛选系统所得阳性分子化合物在研究团队后续的细胞水平功能验证中发挥了显著的作用,这些活性分子可特异地抑制底物蛋白的甲基化水平(图14)。该功能验证结果充分体
利用荧光素酶报告系统高通量筛选影响蛋白表达的活性小分子
High Throughput Screening for Active Small Molecules Affecting Protein Expression by Luciferase Reporter System
Author:  林德颖date: 10/22/2021, view: 2772, Q&A: 0
图中黄色区域读数小于6533.45,对应的活性分子即为阳性分子。图1. 不少活性分子对细胞具有较强毒性,处理后导致细胞死亡,造成靶蛋白表达下降的假阳性结果。 另外,一般分装活性分子的96孔板最外侧两列为DMSO,故最终384孔板最左侧及最右侧两列孔中的细胞为DMSO处理组。 经活性分子处理48 h后,将37 °C预热的 ONE-G
基于Dual进样模式的中药来源活性小分子与靶标互作的异位协同表征
Dual Injection Mode-based Characterization of Allosteric Synergistic Interactions between Target and Bioactive Small Molecules from Traditional Chinese Medicine
Authors:  杨宇章陈锡祥, 徐见容 and date: 03/06/2025, view: 1047, Q&A: 0
实验结果表明通过Dual进样模式可以表征两种活性分子与靶标之间的协同作用,同时明确预结合对于协同作用的影响。本实验方法可应用于判断活性分子之间的协同互作关系,并做定量分析。 感谢上海中医药大学交叉科学研究院葛广波、朱广灏提供的两种中药来源的活性分子及靶标蛋白。 本实验采用Biacore T200的Dual进样模式(图7),即在一个循环两次进样的方式,对两种活性分子与靶标不同表位同时相互作用的协同效应进行分析[2,3]。 当分析物与金属表面上固定的配体
利用Biacore8K+高通量筛选靶向生物大分子的小分子活性物质
High-Throughput Screening of Small-molecular Targeting Biomolecular by Biacore8K+
Authors:  常卿杨姊, 李文奇 and date: 08/20/2021, view: 5387, Q&A: 0
通过Biacore8K+高通量互作分析系统的分子高通量筛选程序LMW screen快速检测了抗COVID-19中药单体库的160个天然分子。 由于分子分子量的限制,通常选择 Contact time 模式进样实现高偶联,以提高检测的灵敏度。 溶剂校正结果示意图待筛选化合物库的配制5.1用1.05x PBS-P 缓冲液稀释10 mM分子母液 (100% DMSO) 20倍,得到500 μM分子
基于表面等离子共振技术垂钓方法发现中草药活性成分
Discovery of Active Ingredients in Chinese Herbal Medicine Based on the Fishing Method of Surface Plasmon Resonance Technology
Author:  王静date: 05/17/2024, view: 1478, Q&A: 0
中药活性分子化合物母液 用1× PBS-P溶解中药活性分子化合物至10 mM。致谢感谢北京大学药学院天然药物及仿生药物全国重点实验室提供仪器技术支撑。 图5 样品名称、用量和放置位置示意图五、中草药活性分子和靶蛋白Hsp 60的亲和力和动力学检测 接下来,使用Biacore T200对这16个中草药活性分子化合物与靶蛋白Hsp 60的亲和力和动力学进行了检测 结果鉴定出16
In vitro Chaperone Activity Assay Using α-Amylase as Target Protein
以α-淀粉酶为靶蛋白的分子伴侣活性体外测定
Authors:  Jeeshma Nambidi ParambathGayathri Valsala, Karthik Menon, Shiburaj Sugathan and date: 06/20/2018, view: 6812, Q&A: 0
... 该协议描述了使用α-淀粉酶作为靶蛋白来评估麻风分枝杆菌的野生和突变重组热休克蛋白的分子伴侣活性。 ... 然而,当反应混合物中存在sHSP时,它们由于其分子伴侣活性而提供防止热降解的保护。 sHSPs防止底物α-淀粉酶热诱导聚集的分子伴侣活性可通过使用酶标仪在580nm处检测淀粉 -