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酵母双杂交技术检测蛋白互作
Yeast Two-hybrid Assay for Detecting Protein Interaction
Authors:
毛文文
魏灵芝
,
李冰冰
,
贾文锁
and
date:
11/29/2018,
view:
8824,
Q&A:
1
分子生物学,
蛋白
质,植物科学,植物分子生物学,...
免疫共沉淀(Co-IP)检测草莓果实中蛋白互作
Protein-protein Interaction Detection in Strawberry Fruit by Co-IP Assay
Authors:
毛文文
魏灵芝
,
李冰冰
,
贾文锁
and
date:
11/29/2018,
view:
7036,
Q&A:
1
buffer (见溶液配方)仪器设备移液枪注射器研磨用具涡旋振荡器离心机实验步骤将待测
蛋白
菌液按1:1混合注射于草莓大绿果或白果 (图1) 中,此时注射菌液
蛋白
表达效果较好,3天后取样 (所用菌株为pSPYNE 草莓果实
蛋白
提取和Western Blot. Bio-101 e1010222. Doi: 10.21769/BioProtoc.1010222. 溶液配方
蛋白
裂解buffer磷酸缓冲液 (pH 7.8)1xEDTA1 mM甘油10%TritonX-1000.5%DTT1 mM参考文献毛文文,魏灵芝,李冰冰,贾文锁
基于Dual进样模式的中药来源活性小分子与靶标互作的异位协同表征
Dual Injection Mode-based Characterization of Allosteric Synergistic Interactions between Target and Bioactive Small Molecules from Traditional Chinese Medicine
Authors:
杨宇章
陈锡祥
,
徐见容
and
date:
03/06/2025,
view:
1024,
Q&A:
0
根据协同系数的计算公式得到无预结合条件下分析物A、分析物B与靶标
蛋白
互
作
的协同系数为29.2%。 进一步计算得到分析物B预结合条件下分析物A、分析物B与靶标
蛋白
互
作
的协同系数为9.5%,表明分析物B预先结合靶标
蛋白
也使得分析物A与分析物B之间的协同作用下降。 根据协同系数的计算公式得到分析物A预结合条件下分析物A、分析物B与靶标
蛋白
互
作
的协同系数为9.8%,表明分析物A预先结合靶标
蛋白
使得分析物A与
外源蛋白在烟草叶片瞬时表达
Transient Expression of Exogenous Protein in Tobacco Leaves
Authors:
陈香嵩
李甜甜
,
周少立
,
赵毓
and
date:
04/27/2018,
view:
21731,
Q&A:
3
注意事项有的文献报道烟草注射前需黑暗处理,有的文献则报道需要持续光照处理,个人经验至少对于
蛋白
表达这一操作来说不需要任何处理,正常条件生长即可,但是用于
蛋白
互
作
(BiFC)可能需要特定的条件,可参见BiFC 一般情况下,转化后24小时即有
蛋白
表达,而48小时后会渐渐消失。 若需要提高外源
蛋白
的表达,可用同样的方法制备含有番茄丛矮病毒基因p19超表达载体的农杆菌,与目的基因的农杆菌等量混合后再注射烟草,此方法的
蛋白
表达时间为注射后3-7天,且可以大幅提高表达量,但是只适用
糖基化修饰对新型冠状病毒S蛋白与ACE2相互作用的影响(SPR法)
The Effect of Different Glycosylation Modifications on the Interaction between SARS-CoV-2 S and ACE2 (SPR)
Authors:
侯敬丽
汤玉
,
叶发荣
and
date:
04/08/2024,
view:
1351,
Q&A:
0
(2)100nM RBD
蛋白
与ACE2
蛋白
互
作
时的结合响应约50~100RU,满足测试需求,因此用100 nM RBD
蛋白
2倍梯度稀释,共8个浓度点。 再生条件摸索: 由于Protein A 芯片能够耐受Glycine 1.5缓冲液,为保证再生彻底,做
蛋白
互
作
实验时可以直接选用Glycine 1.5缓冲液做再生试剂。 实验注意要点配体偶联: 用CM5芯片采用氨基偶联方法固定ACE2
蛋白
时,ACE2
蛋白
会丧失活性。因此
利用SPR技术高通量筛选蛋白互作活性小分子
High-Throughput Screening for Small Molecules Interacting with Targeted Protein by SPR Technology
Authors:
刘伟
谢华彬
,
王烁英
,
慈云青
,
许超
,
兰姝珏
,
陈铭
and
date:
03/06/2025,
view:
1860,
Q&A:
0
以筛选靶标
蛋白
互
作
小分子化合物为例,图1展示了中国科学院分子细胞科学卓越创新中心化学生物学技术平台创建的利用Biacore 8K仪器发现与靶标
蛋白
互
作
小分子化合物的高通量筛选完整流程。 相比其它分子
互
作
筛选体系而言,基于SPR技术的高通量筛选体系主要缺点是其筛选成本相对较高。但其高灵敏度性能以及宽广的可适用范围是其它分子
互
作
筛选体系目前未能超越的。 图1 利用SPR技术发现与靶标
蛋白
互