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微生物非标记定量蛋白质组学样品制备方法
Sample Preparation of Microorganism for Label-free Quantitative Proteomics
Authors:  赵娜汪兵, 刘飞, 谢波 and date: 03/10/2021, view: 3640, Q&A: 0
并利用SDS-PAGE电泳方法作质量控制,查看蛋白降解情况以及半定量验证,不同样本上样量一致时,条带颜色差异不大 (示例见图1B)。图1. A. 蛋白标准曲线. 细胞沉淀用PBS缓冲液洗涤三次后用于蛋白质提取。样品也可用液氮冷冻后存放于-80 °C待用。 用同体积甲醇洗一次蛋白质沉淀,离心后去除上清。将样品悬浮于50 μl NH4HCO3溶液。 在洗脱肽段过程中溶液体积可能不满10 μl,这可能是存在气泡或者吸头被堵,该步骤与蛋白质提取的12离心步骤相关。 二、 蛋白质提取 (Wang et al., 2