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微生物非标记定量蛋白质组学样品制备方法
Sample Preparation of Microorganism for Label-free Quantitative Proteomics
Authors:
赵娜
汪兵
,
刘飞
,
谢波
and
date:
03/10/2021,
view:
3640,
Q&A:
0
并利用SDS-PAGE电泳方法作质量控制,查看蛋白降解情况以及半
定量
验证,不同样本上样量一致时,条带颜色差异不大 (示例见图1B)。图1. A. 蛋白标准曲线. 细胞沉淀用PBS缓冲液洗涤三次后用于
蛋白质
提取。样品也可用液氮冷冻后存放于-80 °C待用。 用同体积甲醇洗一次
蛋白质
沉淀,离心后去除上清。将样品悬浮于50 μl NH4HCO3溶液。 在洗脱肽段过程中溶液体积可能不满10 μl,这可能是存在气泡或者吸头被堵,该步骤与
蛋白质
提取的12离心步骤相关。 二、
蛋白质
提取 (Wang et al., 2