mRNA反转录
Reverse Transcription of mRNA to cDNA
Authors: 王磊都浩,
欧阳亦聃 and
date: 04/09/2018,
view: 6538,
Q&A: 0
步骤3需要防止复性，RNA易产生高级结构，影响反转录效果。反转录产物为单链cDNA，-20 °C保存，减少反复冻融次数，可以使用一年以上。 按每μg起始RNA量终体积20-30 μl加水稀释反转录得到的cDNA。检测反转录效果可用Ubiquitin引物做PCR扩增，判断有无基因组污染及浓度。 注意事项实验前应确定RNA浓度及质量, RNA吸光值比例OD260/OD280 > 1.8和OD260/OD230 > 1.8才可以进行反转录操作。 加入5x First strand buffer 4