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Gateway系统构建双元表达载体
Construction of Binary Expression Vector Using Gateway System
Authors:  徐远涛郑雄杰, 曾云流, 徐强 and date: 06/12/2018, view: 18527, Q&A: 3
Gateway载体非常丰富,可以满足各种转基因需求,可以在专业网站:https://gateway.psb.ugent.be/search查询载体详细信息。 获得序列正确的入门载体和终载体克隆之后,质粒保存于-20 °C冰箱,同时将菌液与60%甘油等体积2:1混合,甘油终浓度为20%,-80 °C超低温冰箱保存。 材料与试剂目的基因质粒目的基因正反向引物BP酶LR酶入门载体 (pDONR207,庆大霉素抗性)Gateway超量表达终载体 (pK7WG2D,壮观霉素抗性)Phanta Ma
荧光素酶酶活恢复法检测体内蛋白质互作
In vivo Detection of Protein Interactions Using Luciferase Assay
Authors:  王磊鄢文豪, 欧阳亦聃 and date: 04/09/2018, view: 15250, Q&A: 3
... 10043)酶活检测试剂盒Dual-Luciferase? Reporter Assay System (Promega, catalog number: E1910)仪器设备酶标仪分光光度计实验步骤载体构建 连有目的基因的载体必须分别和另外一个空载体共转化,同时需要两个空载体之间共转化,以排除背景信号的影响。同时可以转化一对确定互作的蛋白质来评价系统的有效性。 :本操作系统的载体PUC19-nLUC和PUC19-cLUC基本结构如图所示 (图1) (Chen等,2008)。 可