实验动物胚胎操作实验手册
胚胎学(Embryology)是一门既古老又充满活力的基础性科学学科。1935年,H.施佩曼因发现胚胎发育中的组织者效应;1995年,EF.威斯乔斯发现控制早期胚胎发育的遗传机制;2007年,M.卡佩基等利用胚胎干细胞打靶和囊胚嵌合技术制备基因修饰小鼠;2010年,R.爱德华兹在试管婴儿方面的研究取得重大成果。他们均因此获得了诺贝尔生理学或医学奖。与此同时,胚胎学被视为生命科学研究中最为复杂的科学之一,其主要原因除了胚胎学本身的复杂性之外,还因为胚胎操作(Embryo Manipulation)技术的复杂和精细。胚胎操作技术既包括基础性的实验操作如超数排卵、输精管结扎、配子冻存、体外受精、胚胎移植等,也包括复杂精细的实验操作如显微注射、胚胎切割、体细胞核移植、干细胞打靶及筛选、囊胚嵌合技术、原始生殖细胞示踪、胚胎异体移植等。掌握和发展必要的胚胎操作技术,不仅仅是开展胚胎学研究的需要,也是很多生命科学领域的研究工作及科研辅助工作的必要条件。
本次出版的《实验动物胚胎操作实验手册》共分9个章节,57个实验方案,覆盖11种实验动物,包括小鼠、长爪沙鼠、犬、猪、猴、树鼩、鸡、斑马鱼、果蝇、牛及羊。其中,小鼠胚胎操作实验方案(13个)及长爪沙鼠实验方案(7个)的编写围绕基因修饰小鼠制备、品种品系冷冻保种及病原净化控制;犬、猪、猴等大动物胚胎操作方案各有5-6条,内容围绕体细胞克隆及显微注射法制备基因修饰动物;树鼩胚胎操作方案(4个)着重于通过精原干细胞制备基因修饰动物;鸡的胚胎操作方案(7个)偏重鸡胚的应用;斑马鱼胚胎操作技术(5个)围绕品系保存及基因修饰鱼的制备;果蝇(3个)、牛(1个)、羊(1个)简单介绍了与有关受精卵的基本操作。本手册的实验方案基本是由国内高水平科研单位的一线科技工作者所提供。这些成熟的胚胎操作技术体系不仅在国家级实验动物种质资源中心及各单位实验动物支撑平台被广泛采用,而且不少由国内科学家发展优化的创新技术在引领着中国生命科学的进步:如体细胞克隆猴的诞生,精原干细胞介导基因修饰树鼩的培育,以及通过人造精子改造培育健康小鼠并大规模推广应用等。希望该实验手册能够为广大科研工作者提供帮助,希望这些基础的或是先进的胚胎操作技术方法能够推动中国生物医学事业的发展。
本手册的编写得到14家单位共82位优秀科学工作者的鼎力支持。他们认真撰稿,细致修订,毫无保留把自己的看家绝活与学界共享,在此,向所有参与者表示衷心的感谢!特别感谢本刊的科学顾问李劲松教授和赖良学教授,两位教授的实验室贡献了最多的方案,保证了本手册的高水准!感谢Bio-protocol中国编辑部的信任和支持!略显遗憾的是,由于编者们的研究领域及研究方向不同,不同物种胚胎操作实验技术的发展水平及科学目标的差异较大,本手册无法按照统一的模式组织编写实验方案;此外,大鼠、兔等常用实验动物的胚胎操作实验在本手册中尚未涉及,留待大方之家补充。
吴宝金 孙强
2023年5月