一、视频摘要(简单概括实验的原理、目的、结果或结论(约 1-3 个句子)以帮助读者更好的了解为什么要参考本视频实验内容。)
角膜位于眼球前方最外层,直接暴露于外部环境,起到抵御外界刺激或损伤的重要保护作用,同时在眼的屈光系统中也扮演了相当重要的角色。角膜上皮层位于角膜的最外层,它的损伤或延迟愈合导致角膜的屏障功能的破坏,继而引起角膜对感染的抵御能力下降以及影响角膜屈光功能。多种疾病(如糖尿病等)会导致角膜上皮的愈合延迟甚至愈合障碍,进而引发角膜溃疡、穿孔等,严重危害患者视功能。因此,角膜上皮损伤的愈合对于维持正常的角膜功能具有很大的临床意义。基础研究中,可以通过刮除实验动物角膜上皮的方式制备角膜损伤模型,为角膜伤口愈合提供模型基础。本视频展示了角膜上皮刮除小鼠模型的建立过程,旨在为相关研究提供参考。
二、关键词(3-5 个关键词便于被搜索)
角膜上皮,小鼠模型,损伤
三、实验样品信息,试剂、耗材或仪器(如果视频中没有包含关键实验试剂、耗材或仪器信息,建议对关键的实验
试剂、耗材或仪器的品牌, 产品目录号或型号等用文字或图片加以说明。)
1. 样品信息
20周C67BL/6小鼠
2. 试剂和耗材
2.5
mm角膜环钻、标记笔、上皮刮刀、麻醉滴眼液、荧光素钠、金霉素眼膏和抗生素滴眼液等
3. 仪器和软件
小动物麻醉机及手术显微镜
四、实验操作
(1)麻醉并固定动物后滴加表面麻醉剂。
(2)擦拭多余滴眼液,修剪胡须,充分开睑。
(3)标记笔标记角膜环,用角膜环标记刮除区域。
(4)使用上皮刮刀按照标记区域刮除角膜上皮。
(5)用镊子修剪刮除区域边缘。
(6)用荧光素钠对上皮刮除区域进行染色。
(7)迅速在钴蓝光下观察染色情况并拍照记录。
(8)术眼滴加抗生素眼液/涂抹金霉素眼膏,妥善安置小鼠。
五、注意事项
1. 荧光素钠染色后要迅速拍照观察,以防创口染料扩散。
2. 安置动物前须滴加抗生素眼液/涂抹金霉素眼膏,以防感染。
六、结果分析(可选)
通过框选荧光素钠染色面积大小,观察比较小鼠角膜上皮愈合速率,可选用image
J进行后续分析。
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