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小鼠结膜下与玻璃体腔注射

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视频简介玻璃腔注射:玻璃体腔注射是一种具有代表性的眼内注射给药途径,也是从事眼后段疾病研究的科研人员所必须掌握的实验技术。眼球作为一个特殊的独立器官,血—视网膜屏障的存在隔绝了许多药物的运输和作用。玻璃体腔注射可突破血眼屏障,使药物直接在眼内扩散,并作用于视网膜、脉络膜等部位。 结膜下注射:结膜下注射是一种常用的局部给药方式,相对于滴眼液直接点眼来说,将药物注射到结膜下,可使其停留在结膜下疏松结缔组织内,以提高药物在眼内的浓度,增强及延长药物作用时间。
  • 视频介绍

一、视频摘要

玻璃腔注射:玻璃体腔注射是一种具有代表性的眼内注射给药途径,也是从事眼后段疾病研究的科研人员所必须掌握的实验技术。眼球作为一个特殊的独立器官,血—视网膜屏障的存在隔绝了许多药物的运输和作用。玻璃体腔注射可突破血眼屏障,使药物直接在眼内扩散,并作用于视网膜、脉络膜等部位。

结膜下注射:结膜下注射是一种常用的局部给药方式,相对于滴眼液直接点眼来说,将药物注射到结膜下,可使其停留在结膜下疏松结缔组织内,以提高药物在眼内的浓度,增强及延长药物作用时间。


二、关键词

玻璃腔给药,结膜下注射,眼科,小鼠


三、实验样品信息,试剂、耗材或仪器

1. 样品信息

C57/BL小鼠

2. 试剂和耗材

抗生素滴眼液:可乐必妥;眼表麻醉剂:盐酸奥布卡因滴眼液;扩瞳滴眼液:复方托吡卡胺滴眼液;透明质酸钠滴眼液;金霉素眼膏。

耗材:微量进样针

3. 仪器和软件

小动物麻醉机,手术显微镜,眼科手术显微器械


四、实验操作

(一)玻璃体腔注射

  1. 小鼠麻醉及准备:1) 将小鼠置于小动物麻醉机诱导盒内进行吸入式异氟烷麻醉,捏小鼠后肢确认是否麻醉完全2) 将小鼠移到解剖显微镜下,连接鼻锥持续给予异氟烷和氧气3) 待注射眼睛滴加奥布卡因滴眼液防止注射引起局部反射,镊子轻夹结膜确定麻醉完全4)修剪小鼠胡须,防止遮挡术野;清理、消毒小鼠眼睑周围污物及分泌物,防止感染
  2. 扩瞳:建议双眼散瞳,以防一眼出现意外时可以迅速换眼。
  3. 维持眼表湿润:使用人工泪液(如玻璃酸钠滴眼液)点眼,防止眼表干燥引起晶体混浊,影响观察进针。
  4. 抗生素眼药水术前滴眼。
  5. 调整小鼠头位。此时小鼠头部与麻醉机的鼻椎相连,保持角膜缘水平位,充分暴露术野;若注射体积大于1uL,可提前在角膜缘做一个前房穿刺的隧道,轻压角膜,放出一部分房水,防止注射后眼压过高引起药物反流。
  6. 注射位置选择:用镊子在上下眼睑之间滑动,将眼球从眼眶中轻轻挤出,暴露角膜缘后1mm位置,避开血管进针。
  7. 注射:用Hamilton33G做巩膜通道,针尖垂直从角膜缘后1mm位置进入,随后适当倾斜。(小鼠晶状体是球形,倾斜角度小会损伤晶体,角度过大会扎伤视网膜或扎到网膜上的血管导致出血)
  8. 注射:平稳注入液体,注意注射过程避免晃动引起额外的组织损伤。推注完毕以后留针10s,迅速出针。术毕使用抗生素眼膏涂眼。
  9. 将小鼠放在恒温复苏毯上等待麻醉清醒。

(二)结膜下注射

  1. 小鼠麻醉及准备步骤同上。
  2. 将眼膏涂在另一只不接受注射的眼睛上,以防止干燥和受伤。
  3. 调整小鼠头位。此时小鼠头部与麻醉机的鼻椎相连,保持眼球水平位,充分暴露术野。
  4. 将两个手指放在小鼠上下眼睑,轻轻拉开眼睑,露出结膜,左手用镊子夹住注射位置的结膜。
  5. 松开眼皮,右手握住针头,斜面朝上。左手轻提注射位置结膜,插入针头,直到斜面完全被结膜覆盖。(可以很清楚的看到枕头位于结膜下)
  6. 平稳推注,注射完成后,将针头固定10秒,然后抽出,减少药物反流的机会。(也可以退针后用镊子夹闭一会儿)
  7. 术眼涂上抗生素眼膏,预防眼表干燥及感染,然后将小鼠放在恒温复苏毯上等待麻醉清醒。

五、注意事项

上述实验步骤已详述

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