一、视频摘要
本视频中所示方法利用酶分子与抗原或抗体分子共价结合的原理，使酶标记抗体与吸附在固相载体上的抗原或抗体发生特异性结合，在滴加底物溶液后通过颜色反应的深浅与标本中相应抗体或抗原的量呈正比来判定免疫反应的强弱。
二、关键词
血清 ELISA 免疫反应
三、实验样品信息，试剂、耗材或仪器
1. 样品信息
经过不同处理后的小鼠血清
2. 试剂和耗材
试剂:包被稀释液、待包被抗原（抗体）、封闭液（5%
BSA）、HRP偶联二抗、PBST、2mol/L硫酸、底物缓冲液、TMB、30%过氧化氢溶液
耗材:costar
96孔板
3. 仪器和软件
仪器：37℃温箱、洗板机、酶标仪、排枪
四、实验操作
①取出抗原与包被稀释液均匀混合，加入固相载体96孔板上，4℃包被过夜；
②PBST洗板三次，加入封闭液（5%BSA）在37℃温箱封闭2h；
③封闭期间，提前梯度稀释待检样品（如血清）；
④封闭后PBST洗板三次，加入稀释好的待检样品，在37℃温箱孵育1h；
⑤孵育后PBST洗板三次，加入PBST稀释后的二抗，在37℃温箱孵育1h；
⑥二抗孵育后PBST洗板五次，加入底物显色液，避光孵育10min左右；
⑦加入2mol/L硫酸终止反应；
⑧使用酶标仪进行吸光度值的检测；
⑨ELISA结果的判读。
五、注意事项
①二抗孵育结束洗板时要记得多洗两遍，降低背景值。
②所有ELISA板子要控制显色时间一致，控制变量；
六、结果分析（可选）
利用酶标仪输出数据，得出样品的最高滴度，随后使用GraphPad
Prism进行组间差异分析。
七、参考文献（可选）
暂无
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