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农杆菌介导的植物花瓣瞬时转化技术

王晓娟陈立川 |  2022-11-23  | DOI: 10.21769/BioProtoc.v1049
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视频简介基于真菌生物发光系统,利用农杆菌介导的植物瞬时转化技术,构建夜光长春花儿
  • 视频介绍

一、视频摘要

基于真菌自发光代谢通路构建的载体,利用农杆菌介导的植物瞬时转化技术,通过菌液复苏、制备侵染液、注射植物花瓣,将其成功瞬时转入植物细胞核内,并行使功能,产生肉眼可见的生物自发光。


二、关键词

生物自发光、农杆菌、植物瞬时转化、自发光花瓣


三、实验样品信息,试剂、耗材或仪器

1. 样品信息

载体、农杆菌、长春花


2. 试剂和耗材

1LB培养基、Kan抗生素、0.5×PBS缓冲液、AS(乙酰丁香酮)

2、离心管(1.5ml & 50ml)、注射器(1ml)、枪头等


3. 仪器和软件

1、移液枪、离心管架、高速离心机、恒温摇床、超净工作台

2、暗室、单反相机


四、实验操作

1、农杆菌复苏:划板、小摇、大摇;

2、制备侵染液;

3、侵染植物花瓣;

4、自发光强度观察。


五、注意事项

1、测定菌种活力,侵染液须在指定浓度范围下。

2、侵染材料需避光处理,浇水适量,避免影响侵染效率。

3、注射花瓣操作尽量轻柔,以免造成二次伤害,影响观感。


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