薄层色谱法（TLC）

一、视频摘要

薄层色谱法（TLC），是将适宜的固定相涂布于玻璃板、塑料或铝基片上，成一均匀薄层。待点样、展开后，根据比移值（Rf）与适宜的对照物按同法所得的色谱图的比移值（Rf）作对比，用以进行药品的鉴别、杂质检查或含量测定的方法。

二、关键词（3-5 个关键词便于被搜索）

薄层色谱；纯度分析；药品鉴定；样品分离；

三、实验样品信息，试剂、耗材或仪器

1. 样品信息

天然产物（微生物源、植物源），溶于有机试剂中；

2. 试剂和耗材

硅胶板 (GF254)、毛细点样管、展缸、热风枪、显色剂等；

3. 仪器和软件

三用紫外分析仪ZF-6、PS、Microsoft Office;

四、实验操作

（1）切板、点样

切板：根据样品的数量，切割硅胶板（GF254），做标记，玻璃刀切割。点样：在薄层板的一端0.5 cm处，划线作为启始线，再根据样品数量划分样品间隔，进行点样。

（2）样品展开

在层析缸中展开薄层板，按照一定比例配制合适的展开剂，待展开剂倒入展缸中后，适当摇晃，让溶剂充分挥发到缸内空气中，将薄层板放入层析缸中，盖上盖子，当展开剂上升的距离板子顶端约0.3cm时，用镊子取出薄层板。

（3）样品显色

样品本身有颜色，展开后，即可直接观察到斑点，若样品无颜色，则需要借助紫外灯或者显色剂等方法进行显色，用荧光薄层色谱板点板，具有紫外吸收的样品，在紫外灯照射下在亮的荧光背景下可观察到暗色斑点，斑点用铅笔圈出，无紫外吸收的样品，可以使用显色剂显色，常用的显色方式有碘显、酸显（高温），可以多种方法交叉使用。

（4）结果分析

对比移值(Rf值)的计算和不同展开体系分析，综合判断样品情况，根据原点到斑点中心的距离和原点到溶剂前沿的距离来计算Rf值，通过多体系展开以及多种显色手段判断样品情况。

五、注意事项

（1）样品点样后要等溶剂挥发尽才能将薄板放入展开缸中展开；

（2）展开结束后，取出薄板要立刻用铅笔画下溶剂前沿；

（3）点样量对分离效果影响很大，样品量过少，展开后斑点不清晰，影响观察；样品量过多，展开后拖尾严重，易造成Rf值接近的斑点相连。

（4）Rf值一般控制在0.3～0.8，当Rf值很大或很小时，应适当改变流动相的比例。