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薄层色谱法(TLC)

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视频简介薄层色谱法(TCL)是一种吸附薄层色谱分离法,它利用各成分对同一吸附剂吸附能力不同,使在流动相(溶剂)流过固定相(吸附剂)的过程中,连续的产生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附,从而达到各成分的互相分离的目的。薄层色谱法将适宜的固定相涂布于玻璃板、塑料或铝基片上,成一均匀薄层,待点样展开后,常用光学检出法、蒸气显色法、试剂显色法显色,根据比移值(Rf)与适宜的对照物按同法所得的色谱图的比移值(Rf)作对比,用于进行药品的鉴别、杂质检查或含量测定已经跟踪反应进程。薄层色谱法具有操作方便、设备简单、显色容易,展开速率快,混合物易分离,分辨力能力强等特点,是快速分离和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术。
  • 视频介绍

一、视频摘要

薄层色谱法(TLC),是将适宜的固定相涂布于玻璃板、塑料或铝基片上,成一均匀薄层。待点样、展开后,根据比移值(Rf)与适宜的对照物按同法所得的色谱图的比移值(Rf)作对比,用以进行药品的鉴别、杂质检查或含量测定的方法。


二、关键词(3-5 个关键词便于被搜索)

薄层色谱;纯度分析;药品鉴定;样品分离;


三、实验样品信息,试剂、耗材或仪器

1. 样品信息

天然产物(微生物源、植物源),溶于有机试剂中;


2. 试剂和耗材

硅胶板 (GF254)、毛细点样管、展缸、热风枪、显色剂等;


3. 仪器和软件

三用紫外分析仪ZF-6PSMicrosoft Office;


四、实验操作

1)切板、点样

切板:根据样品的数量,切割硅胶板(GF254),做标记,玻璃刀切割。点样:在薄层板的一端0.5 cm处,划线作为启始线,再根据样品数量划分样品间隔,进行点样。

2)样品展开

在层析缸中展开薄层板,按照一定比例配制合适的展开剂,待展开剂倒入展缸中后,适当摇晃,让溶剂充分挥发到缸内空气中,将薄层板放入层析缸中,盖上盖子,当展开剂上升的距离板子顶端约0.3cm时,用镊子取出薄层板。

3)样品显色

样品本身有颜色,展开后,即可直接观察到斑点,若样品无颜色,则需要借助紫外灯或者显色剂等方法进行显色,用荧光薄层色谱板点板,具有紫外吸收的样品,在紫外灯照射下在亮的荧光背景下可观察到暗色斑点,斑点用铅笔圈出,无紫外吸收的样品,可以使用显色剂显色,常用的显色方式有碘显、酸显(高温),可以多种方法交叉使用。

4)结果分析

对比移值(Rf)的计算和不同展开体系分析,综合判断样品情况,根据原点到斑点中心的距离和原点到溶剂前沿的距离来计算Rf值,通过多体系展开以及多种显色手段判断样品情况。


五、注意事项

1)样品点样后要等溶剂挥发尽才能将薄板放入展开缸中展开;

2)展开结束后,取出薄板要立刻用铅笔画下溶剂前沿;

3)点样量对分离效果影响很大,样品量过少,展开后斑点不清晰,影响观察;样品量过多,展开后拖尾严重,易造成Rf值接近的斑点相连。

4Rf值一般控制在0.30.8,当Rf值很大或很小时,应适当改变流动相的比例。


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