一、视频摘要
乙酰胆碱酶属于丝氨酸水解酶，广泛存在于各种动物组织和血清中。乙酰胆碱酯酶参与细胞的发育和成熟，能促进神经元发育和神经再生，并且催化乙酰胆碱水解，在神经传导调节中起重要作用。乙酰胆碱酶催化乙酰胆碱水解生成胆碱，胆碱与二硫对硝基苯甲酸作用生成 5-巯基-硝基苯甲酸；5-巯基-硝基苯甲酸在 412nm 处有吸收峰，通过测定 412nm 吸光度增加速率，计算乙酰胆碱酶活性。
二、关键词
乙酰胆碱酶；动物组织；酶活
三、实验样品信息，试剂、耗材或仪器
1. 样品信息
动物组织
2. 试剂和耗材
移液枪，离心管，乙酰胆碱酯酶试剂盒，移液枪吸头等
3. 仪器和软件
水浴锅，离心机，酶标仪
四、实验操作
1组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液）进
行冰浴匀浆，8000g
4℃离心 10min，取上清液待测。
2酶标仪预热30min以上，调节波长至412nm
3实验过程
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试剂名称(μL)
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测定管
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对照管
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样本
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15
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15
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试剂二
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50
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-
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-
37℃ 水浴准确反应5min。
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试剂四
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50
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50
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试剂二
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-
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50
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混匀后12000rpm常温离心5min。分别吸取10μL上清液于新的EP管或96孔板中，之后分别加入
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试剂一
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170
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170
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试剂三
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20
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20
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混匀，放置2min后于微量玻璃比色皿中或96孔板中测定412nm处的吸光度，记为A测定管，A对
照管，计算ΔA=A测定管-A对照管。
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五、注意事项
酶标仪需预热30min以上
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