一、视频摘要
Western blot（也称为蛋白质免疫印迹）是一种常用于研究中分离和鉴定蛋白质的技术。它利用 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS-PAGE) 来分离指定样品中包含的各种蛋白质，然后将分离的蛋白质转移到硝酸纤维素或 PVDF 膜上，接下来将膜与对感目标蛋白质的特异抗体一起孵育。在洗膜过程中，未结合的抗体被洗掉，只留下与目标蛋白质结合的抗体，最后通过显影胶片或荧光扫描来检测结合的抗体。
二、关键词
大分子量蛋白、western blot、SDS-PAGE
三、实验样品信息，试剂、耗材或仪器
1. 样品信息
示例：脑组织蛋白样本
2. 试剂和耗材
NuPAGE™ LDS 样品缓冲液 (4X) #NP0007
NuPAGE™ Tris-乙酸 SDS 电泳缓冲液 (20X) #LA0041
NuPAGE™ 样品还原剂 (10X) #NP0009
NuPAGE™ 3-8%，Tris-乙酸，1.0–1.5 mm，#EA0375BOX
protein ladder #LC5699
10x Tris/Glycine Buffer for Western Blots and Native Gels #1610734
甲醇、0.2um PVDF膜、海绵垫、滤纸
3. 仪器和软件
BIO-RAD Mini-PROTEAN® Tetra 电泳槽
PowerPac™ 基础电泳仪电源
四、实验操作
1.煮蛋白：蛋白裂解液加入合适比例的loading buffer，70℃加热10分钟。
2.加样：按照顺序依次加入marker及样本
3.电泳：160V；60min。
4.转膜：75V恒压；150min。
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