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高糖培养基除菌过滤(Nalgene™ 可重复过滤装置)

袁德龙 |  2023-12-08  | DOI: 10.21769/BioProtoc.v1239
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视频简介可重复使用的过滤装置包括两个膜支撑板:一个用于灭菌的透明一体式板和一个用于分析的两体式白色板。可容纳直径为 47 或 50 mm 的膜。两个侧臂可连接真空管线。使用该滤器可抽滤粉末配置培养基或者污染的培养基重复使用,可大幅度节约成本。
  • 视频介绍

一、视频摘要

本实验为使用可重复使用的过滤装置包括两个膜支撑板,可容纳直径为47或50 mm的过滤膜用于过滤杂质。两个侧臂可连接真空管线用于抽滤。使用该滤器可抽滤粉末配置培养基或者污染的培养基以便重复使用,不用直接购买液体培养基成品,可大幅度节约成本。抽滤完成后需要进行检菌操作以便确实抽滤是否完全,没有杂质从而干扰实验结果。

 

二、关键词

抽滤培养基重复过滤装置检菌操作

 

三、实验样品信息,试剂、耗材或仪器

1.试剂和耗材

1)高糖DMEM粉末(Thermo,型号:12800017)

2)NaHCO3粉末

3)Nalgene™可重复过滤装置

4)直径50mm过滤膜

5)ddH20

6)6cm dish

2.仪器和软件

1)吸泵

2)超净工作台

3)搅拌器

 

 

四、实验操作

1)将滤膜安装在过滤装置中并加水润湿;

2)将过滤装置和ddH20进行高温灭菌;

3)配置DMEM溶液,1L ddH20加入3.7g NaHCO3粉末再加入一包高糖DMEM粉末混匀;

4)提前打开超净工作台,将所有物品拿到超净工作台

5)一端真空管线连接吸泵,另一端封闭;

6)倒入混匀好的高糖培养基,打开吸泵

7)待下方容器满后关闭吸泵,将过滤好的培养基倒入新的容器中密封保存。

 

 

五、注意事项

1)整个过程保持无菌操作,所有装置都要高温灭菌,切勿污染;

2)切记要检菌操作。

 

 

六、结果分析(可选)

检菌三到五天后显微镜观察有没有长菌,如没有则代表过滤成功。

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