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基于外切酶Ⅲ信号放大反应的可视化检测
郑连涛
,
张晓霞
,
刘佩钰
,
辛馨
,
吴爱宇
,
林昱辰
和
朱娅萍
| 2023-12-08 | DOI:
10.21769/BioProtoc.v1281
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视频简介
核酸外切酶Ⅲ(exonuclease Ⅲ,ExoⅢ)的单链信号放大策略是一种不直接扩增靶标的信号放大手段,尤其适用于低浓度分子的检测,且产生假阳性的频率低。单链靶DNA与发卡混合,常温反应使发卡与靶DNA互补配对。加入ExoⅢ,使其行使平末端外切酶功能,从3'端外切发卡序列,切割到不匹配序列即停止反应,探针脱离。靶基因回到扩增循环中,继续被其他探针序列识别,从而可从低浓度 DNA 中扩增获取足量单链 DNA ,实现外切酶Ⅲ的酶切信号放大。