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鼠下肢缺血模型制备-股动静脉结扎离断法

张永康, 殷康力, 王寅凯 和 曹烨民 |  2023-12-08  | DOI: 10.21769/BioProtoc.v1301
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视频简介鼠下肢缺血模型是用于研究外周动脉疾病的经典模型。其中,鼠下肢动脉结扎是外周动脉疾病研究中使用最广泛的造模方法。该方法通常从鼠一侧后肢内侧切口,暴露后肢动脉并于结扎后离断以达到后肢缺血。另一侧后肢作为自身对照不进行手术操作。该方法对实验室要求不高、操作简单,只需借助普通的动物手术器械及掌握基本的手术技巧便可独自完成造模,并且可于众多已发表的论文中获取详细的实验流程甚至是完整的操作视频。同时,此法易于找到目标动脉(尤其是股动脉)且死亡率低。这对于初次接触或尚不熟悉动物实验的研究人员来说十分友好。
  • 视频介绍

一、视频摘要

鼠下肢缺血模型是外周动脉疾病实验研究中常用动物模型,该模型有众多造模方法[1]。其中,股动静脉结扎离断法是广泛使用的鼠下肢缺血模型造模方法之一[2]。该方法通过双重结扎一侧鼠下肢股动静脉后离断两处结扎点之间的血管来实现下肢的缺血模型制备[3,4]。另一侧后肢作为对照用于造模评价中的对比而不进行手术操作。一般在术后采用多普勒血流灌注成像评估造模是否成功。

 

二、关键词

下肢缺血;外周动脉疾病;动物模型;鼠类

 

三、实验样品信息,试剂、耗材或仪器

1. 样品信息

C57小鼠

 

2. 试剂和耗材

2.1 试剂

碘伏、异氟烷。

2.2 耗材

手术刀片、脱毛膏、恒温垫、不可吸收尼龙缝合线、缝合针、镊子、眼科剪,棉签、胶带。

 

3. 仪器和软件

解剖显微镜、气道麻醉机、多普勒血流灌注成像仪。

 

四、实验操作

1. C57小鼠提前一日对左下肢进行脱毛处理,暴露目标区域皮肤(于恒温垫上),次日行手术麻醉;

2. 手术流程:

1)取出小鼠,行诱导麻醉,待小鼠进入麻醉状态后移至气道麻醉台的恒温垫上继续麻醉。将小鼠置于仰卧位,胶带固定头颈、四肢、躯干及尾,暴露左下肢手术区域,注意胶带不应过紧;

2)对左下肢目标区域皮肤进行碘伏消毒处理,使用无菌手术刀纵向划开或使用剪刀剪开小鼠左下肢皮肤,尽量避开股动脉;

3)缓慢剥离股动静脉附近的筋膜及神经,尽量避免让镊子的尖端触及血管。尽量游离出更长的股动静脉,使用不可吸收尼龙缝合线分别在股动静脉近段、远端以及中间进行结扎;

4)用直镊夹住中间的结扎点,在靠近近段与远端结扎处分别离断动静脉血管;

5)检查是否有出血,必要时压迫止血。

3. 缝合,碘伏消毒,结束手术;

4. 观察小鼠生命体征,多普勒血流灌注评价造模是否成功。

 

五、注意事项

5.1 由于小鼠脱毛,容易失温,因此需要使用恒温垫避免小鼠因失温导致死亡;

5.2 操作手法应尽量轻柔,不要使用锐利的仪器剥离血管,避免直接扯断或切断动脉造成的大出血;

5.3 暴露动脉前的皮肤开口不宜过大,应尽可能的缩小手术刀口的长度;

5.4 注意手术前后的消毒,避免发生感染。

 

六、参考文献

[1]张永康,殷康力,宗媛等.鼠后肢缺血模型研究进展[J].中国实验动物学报,2023,31(07):913-921.

[2] Krishna SM, Omer SM, Li J, et al. Development of a two-stage limb ischemia model to better simulate human peripheral artery disease [J]. Sci Rep, 2020, 10(1): 3449.

[3] Ministro A, de Oliveira P, Nunes RJ, et al. Assessing therapeutic angiogenesis in a murine model of hindlimb ischemia [J]. J Vis Exp, 2019, 148: 1.

[4] Westvik TS, Fitzgerald TN, Muto A, et al. Limb ischemia after iliac ligation in aged mice stimulates angiogenesis without arteriogenesis [J]. J Vasc Surg, 2009, 49(2): 464-473.

 

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