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实验小鼠不同给药方式

李佳玄 |  2023-12-08  | DOI: 10.21769/BioProtoc.v1323
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视频简介选择正确的实验小鼠给药方式是研究中至关重要的一步,根据药物的物化性质、给药的剂量及频率,需要选择不同的给药方式,而不同的给药方式,又影响药物进入体内后的吸收性、生物利用度、及机体对药物的反应性。掌握常见的小鼠给药方式是做好动物实验的基石,本视频演示了不同的给药方式,讨论了操作中的各个注意事项,旨在提供一个更具体、更易理解、且拥有更多操作细节的学习资料,以期帮助更多的动物实验初学者。
  • 视频介绍

一、视频摘要

选择正确的实验小鼠给药方式是研究中至关重要的一步,根据药物的物化性质、给药的剂量及频率,需要选择不同的给药方式,而不同的给药方式,又影响药物进入体内后的吸收性、生物利用度、及机体对药物的反应性。掌握常见的小鼠给药方式是做好动物实验的基石,本视频演示了不同的给药方式,讨论了操作中的各个注意事项,旨在提供一个更具体、更易理解、且拥有更多操作细节的学习资料,以期帮助更多的动物实验初学者 [1, 2]

 

 

二、关键词

静脉注射,腹腔注射,皮下注射,皮内注射

三、实验样品信息,试剂、耗材或仪器

1. 样品信息

雌性BALB/C小鼠,7周龄。

 

2. 试剂和耗材

2.1. 试剂:75%医用酒精,0.25%三溴乙醇,生理盐水,PBS缓冲液。

2.2. 耗材1 ml注射器(中国,广东海鸥),1ml胰岛素注射器(美国BD公司),医用脱脂棉球(中国,河南飘安集团有限公司)。

 

3. 仪器和软件

自制小鼠固定器,理疗灯(中国,仙鹤)。

 

 

四、实验操作

1. 静脉注射:小鼠鼠尾有三条静脉血管,左右两侧及背部各一条,腹侧的那条是动脉。一般情况下,大多会选择左右两侧的静脉,左手拉直鼠尾,利用拇指与食指将鼠尾注射部位调整到适合进针的角度,将注射器内液体(生理盐水,300 µl)缓慢推至血管内,进液顺畅时,可见血管颜色变浅。

2. 腹腔注射:将小鼠保持仰卧姿势,头部倾斜低于身体后部,并将针头插入腹部下象限 (10°),小心避免意外穿透内脏[3],例如注射0.25%三溴乙醇,用于麻醉小鼠。

3. 皮下注射:将药物推入皮下结缔组织,皮下注射常选项背或大腿内侧的皮肤,常用于构建肿瘤模型[4] 。左手抓取固定小鼠,注射器平行刺入小鼠皮下,注射药物溶液,如 50µl PBS缓冲液,缓慢旋转拔出注射器,可见皮下出现鼓包。

4. 皮内注射:将药物注入皮肤的表皮和真皮之间,观察皮肤血管的通透性变化或皮内反应。皮内注射后可见皮内鼓包,注射液体体积有限,一般是50 µl,疫苗接种、过敏实验等一般作皮内注射[5]

 

五、注意事项

1. 静脉注射:如小鼠尾静脉不易辨认,可用理疗灯照射小鼠尾部3min以内,血管可因受热变明显,但是此操作易对小鼠造成不适,不推荐使用,可用小鼠静脉注射器(附带LED灯模块)进行辅助,或用浸泡于75%酒精的医用脱脂棉球擦拭尾部静脉。

2. 腹腔注射:药物通过腹腔注射进入机体后生物利用率较高,但是操作过程易出现小鼠腹部鼓包或小鼠直接呈现抽搐死亡现象,引起原因是操作不当,注射位置不准确,因此练习抓握小鼠的方式、进针位置的正确选取是必要的,可进针后回吸用于判断进针位置是否准确。

3. 皮下注射与皮内注射:二者易出现混淆,皮内结缔组织致密,皮下空间较疏松,皮内注射体积小于皮下。操作前均推荐给小鼠局部皮肤剃毛,后局部皮肤用75%酒精消毒,以协助注射的准确及保证无菌性。

4. 以上操作,均不应引起小鼠的强烈反抗及生理不适,保证动物伦理。

六、结果分析(可选)

七、参考文献(可选)

[1] Turner P.V., et, al. Administration of substances to laboratory animals: routes of administration and factors to consider. J Am Assoc Lab Anim Sci. 2011. 50, 600-613.

[2] https://zhuanlan.zhihu.com/p/618212903?utm_id=0

[3] Al Shoyaib A., et, al. Intraperitoneal Route of Drug Administration: Should it Be Used in Experimental Animal Studies? Pharm Res. 2019. 37, 12.

[4] Masuda J, et, al. Tumor growth limited to subcutaneous site vs tumor growth in pulmonary site exhibit differential effects on systemic immunities. Oncol Rep. 2017. 38, 449-455.

[5] Li J.L., et, al. Intravital multiphoton imaging of immune responses in the mouse ear skin. Nat Protoc. 2012. 7, 221-234.

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