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糙米体外消化实验

濮嘉梁 |  2023-12-08  | DOI: 10.21769/BioProtoc.v1388
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视频简介血糖指数是以葡萄糖或白面包为参照来反映淀粉类食品对血糖提升能力的评价指标(Shu 等,2009)。摄入大量的高血糖指数食品会增加肥胖、糖尿病、心血管疾病的风险。本实验根据数学模型,通过体外消化的方式,来测定糙米以及普通白米的快消化、慢消化、抗性淀粉、GI、HI值,具有良好的健康意义
  • 视频介绍

一、视频摘要

本实验借用了利用体外消化实验的方法,测定了糙米的HI值和GI值以及水解曲线,为研究体外消化实验提供了不错的模板

 

 

二、关键词

体外消化 糙米 HI GI 水解曲线

 

三、实验样品信息,试剂、耗材或仪器

1. 样品信息

普通糙米、白米、白面包

 

2. 试剂和耗材

盐酸、无水乙醇、柠檬酸、柠檬酸钠、淀粉葡萄糖苷酶、α—淀粉酶、氢氧化钠、氢氧化钾溶液、醋酸、醋酸钠缓冲液

 

3. 仪器和软件

500ml烧杯、锥形瓶、玻璃棒、50ml离心管、移液枪、玻璃珠、量筒、比色皿、pH试纸

 

 

四、实验操作

实验方法

预处理

米粉的制备

     将普通糙米、普通白米;ST处理糙米、ST处理白米;SE处理糙米、SE处理白米;FT处理糙米、FT处理白米分别取以上这八种各2g,用研钵将其研磨成粉,使其可以通过100目筛,当过筛率达75%时,合并筛上筛下物混合均匀。

葡萄糖标准曲线的制备

葡萄糖浓度吸光值测定

1~2g葡萄糖放入干净的托盘中,置入干燥箱90℃干燥,干燥5min后将托盘取出,称量葡萄糖质量,待到葡萄糖质量不再发生变化后取出,将干燥后的葡萄糖称取1g,溶解并定容至1000ml,配置成1mg/ml的葡萄糖标准溶液,之后按照下表来进行配置成待测样品:

葡萄糖溶液1mg/lml

0

0.1

0.2

0.3

0.4

0.5

蒸馏水(ml

0.5

0.4

0.3

0.2

0.1

0

DNS试剂(ml

0.5

0.5

0.5

0.5

0.5

0.5

浓度mg/ml

0

0.02

0.04

0.06

0.08

0.1

配置好后,沸水浴5min,加入4ml蒸馏水,分光测吸光值

标曲结果


     结果标曲如下

 

总淀粉含量测定

糙米总淀粉含量分析根据 Goñi 等(1997)提出的方法为基础稍作修改。糙米样品经粉碎机碾磨粉碎后,过 100 目滤筛。取 25 mg 糙米粉,加入 6 mL KOH 溶液(2 mol/L, 25℃震荡 30 min。然后分别加入 1 mL 醋酸(98%)、3 mL 醋酸钠缓冲溶液(0.4 mol/LpH=4.75)和 60 μL 淀粉葡糖苷酶,摇匀后于 60℃水浴中磁力搅拌 45 min。溶液中葡萄糖含量使用DNS测定

GI值测定

进行体外消化实,分别测定水解 10min20min30min40min60min90min120min180min 样液中的葡萄糖含量,计算淀粉的水解率,并绘制出水解曲线,以未处理为对照组,白面包为参比组,按下式计算 GI值。

 

HI=AUC样品/AUC参比

GI=39.71+0.549HI

 式中:

HI—水解指数(%)

AUC—水解曲线下方面积。

GI—血糖生成指数

 

 

 

五、注意事项

与《不同加工处理对糙米食用性、消化性和酸败的影响_王昊》实验中普通糙米所得数据相比,结果相近,但是快性淀粉较多,可能原因是在使用酶溶液前,我们会将实验材料(酶、米)进行37摄氏度活化30min,使其能够在开始使用时就能达到最佳活性,更好地模拟人体内环境。另外,水解曲线绘制也大致相同,但在他的论文中,实验平行做了三次,由于我们实验材料稀少,所以只平行做了2组,实验数据可能有所偏差。

 

 

六、结果分析

图形用户界面, 图表, 应用程序
中度可信度描述已自动生成

图形用户界面
描述已自动生成

表格
描述已自动生成

七、参考文献

《不同加工处理对糙米食用性、消化性和酸败的影响_王昊》

 

Afify, A. E. M. R., EI-Beltagi, H. S., EI-Salam, S. M. A., & Azza, A. O. Protein solubility, digestibility and fractionation after germination of sorghum varieties [J]. Plos One, 2012, 7(2): e31154.

 

Ahmed, J., Ramaswamy, H. S., Ayad, A., Alli, I., & Alvarez, P. Effect of high-pressure treatment on rheological, thermal and structural changes in Basmati rice flour slurry [J]. Journal of Cereal Science, 2007, 46: 148-156

 

Al-Rabadi, G. J. S., Gilbert, R. G., & Gidley, M. J. Effect of particle size on kinetics of starch digestion in milled barley and sorghum grains by porcine alpha-amylase [J]. Journal of Cereal Science, 2009, 50(2): 198-204

 

Ando, H., Fukuoka, M., Miyawaki, O., Watanabe, M., & Suzuki, T. PFG-NMR study for evaluating freezing damage to onion tissue [J]. Bioscience, Biotechnology, and Biochemistry, 2009, 73(6): 1257-1261.

Baek, M. H., Yoo, B., & Lim, S. T. Effects of sugars and sugar alcohols on thermal transition and cold stability of corn starch gel [J]. Food Hydrocolloids, 2004, 18(1): 133-142.

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