一、视频摘要
本实验借用了利用体外消化实验的方法,测定了糙米的HI值和GI值以及水解曲线,为研究体外消化实验提供了不错的模板 。
二、关键词
体外消化 糙米 HI值 GI值 水解曲线
三、实验样品信息,试剂、耗材或仪器
1. 样品信息
普通糙米、白米、白面包
2. 试剂和耗材
盐酸、无水乙醇、柠檬酸、柠檬酸钠、淀粉葡萄糖苷酶、α—淀粉酶、氢氧化钠、氢氧化钾溶液、醋酸、醋酸钠缓冲液
3. 仪器和软件
500ml烧杯、锥形瓶、玻璃棒、50ml离心管、移液枪、玻璃珠、量筒、比色皿、pH试纸
四、实验操作
实验方法
预处理
米粉的制备
将普通糙米、普通白米;ST处理糙米、ST处理白米;SE处理糙米、SE处理白米;FT处理糙米、FT处理白米分别取以上这八种各2g,用研钵将其研磨成粉,使其可以通过100目筛,当过筛率达75%时,合并筛上筛下物混合均匀。
葡萄糖标准曲线的制备
葡萄糖浓度吸光值测定
取1~2g葡萄糖放入干净的托盘中,置入干燥箱90℃干燥,干燥5min后将托盘取出,称量葡萄糖质量,待到葡萄糖质量不再发生变化后取出,将干燥后的葡萄糖称取1g,溶解并定容至1000ml,配置成1mg/ml的葡萄糖标准溶液,之后按照下表来进行配置成待测样品:
葡萄糖溶液1mg/l(ml)
|
0
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0.1
|
0.2
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0.3
|
0.4
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0.5
|
蒸馏水(ml)
|
0.5
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0.4
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0.3
|
0.2
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0.1
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0
|
DNS试剂(ml)
|
0.5
|
0.5
|
0.5
|
0.5
|
0.5
|
0.5
|
浓度mg/ml
|
0
|
0.02
|
0.04
|
0.06
|
0.08
|
0.1
|
配置好后,沸水浴5min,加入4ml蒸馏水,分光测吸光值
标曲结果
结果标曲如下
总淀粉含量测定
糙米总淀粉含量分析根据 Goñi 等(1997)提出的方法为基础稍作修改。糙米样品经粉碎机碾磨粉碎后,过 100 目滤筛。取 25 mg 糙米粉,加入 6 mL KOH 溶液(2 mol/L),于 25℃震荡 30 min。然后分别加入 1 mL 醋酸(98%)、3 mL 醋酸钠缓冲溶液(0.4 mol/L,pH=4.75)和 60 μL 淀粉葡糖苷酶,摇匀后于 60℃水浴中磁力搅拌 45 min。溶液中葡萄糖含量使用DNS测定
GI值测定
进行体外消化实,分别测定水解 10min、20min、30min、40min、60min、90min、120min、180min 样液中的葡萄糖含量,计算淀粉的水解率,并绘制出水解曲线,以未处理为对照组,白面包为参比组,按下式计算 GI值。
HI=AUC样品/AUC参比
GI=39.71+0.549HI
式中:
HI—水解指数(%);
AUC—水解曲线下方面积。
GI—血糖生成指数
五、注意事项
与《不同加工处理对糙米食用性、消化性和酸败的影响_王昊》实验中普通糙米所得数据相比,结果相近,但是快性淀粉较多,可能原因是在使用酶溶液前,我们会将实验材料(酶、米)进行37摄氏度活化30min,使其能够在开始使用时就能达到最佳活性,更好地模拟人体内环境。另外,水解曲线绘制也大致相同,但在他的论文中,实验平行做了三次,由于我们实验材料稀少,所以只平行做了2组,实验数据可能有所偏差。
六、结果分析
七、参考文献
《不同加工处理对糙米食用性、消化性和酸败的影响_王昊》
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