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果蝇组织解剖

孙振东 和 黄云鹏 |  2023-12-08  | DOI: 10.21769/BioProtoc.v1436
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视频简介目的:对果蝇组织进行染色和免疫组织化学等实验操作
原理:基于果蝇生理结构进行解剖
  • 视频介绍

一、视频摘要

果蝇价格低廉,易饲养,周期短,染色体少,容易进行基因操作[[1]],而且与人类的致病基因有75%的同源[[2]],因此果蝇研究人类疾病的非常重要的模式生物。解剖果蝇的组织,不仅可以直接观察果蝇组织形态变化,还可以通过组织染色,直接观察组织中的细胞、蛋白水平、细胞器形态等的变化。本视频通拍摄了四种实验室常用的果蝇组织解剖方法和技巧,希望可以为广大科研工作人员提供一些帮助。

二、关键词

果蝇组织解剖,果蝇肌肉解剖,果蝇脑解剖,果蝇肠道解剖,幼虫脂肪体解剖

 

三、实验样品信息,试剂、耗材或仪器

1.  试剂和耗材

1×PBS

95乙醇

解剖镊

解剖皿

吸水纸

瓷盘

2. 仪器和软件

体视解剖镜

 

四、实验操作

1. 果蝇成虫的脑组织解剖。使用镊子固定果蝇,并使其贴近解剖皿底部。使用镊子的一侧插入到果蝇的口器及眼部的缝隙中,另一个镊子,夹住同样部位,向两侧轻轻撕开,即可暴露脑组织。去除多余外壳后,用镊子小心去除其脑组织上多余的气管。将脑组织上多余的气管及杂质去除后,即可进行后续的固定染色或抗体免疫。

2. 果蝇成虫肌肉组织的解剖。将果蝇遗移至视野中央,去除头部和尾部,对其胸部进行解剖。在胸部上方或侧面使用镊子轻轻划开,附着在外壳上的一条条白色组织,即为肌肉组织。解剖时应尽可能使肌肉组织成块分布,不要将其撕扯成条。去除肌肉组织上附着的气管以后,就可以进行后续操作。

3. 果蝇成虫马氏管解剖。截取雌性果蝇腹部,从腹部内侧位置撕开,暴露出果蝇的中肠,马氏管和卵巢。将中肠和后肠交界处的马氏管轻轻分离出来,即可完成该解剖。

4. 果蝇幼虫脂肪体解剖。用镊子夹住幼虫身体中间部分,并向两侧撕开,灰黑色片状组织,即为幼虫的脂肪组织,撕掉两侧外皮后,把附着在肠子周围的脂肪体分离出来即可,在体视镜下放大200300倍,即可看清脂肪体细胞。

 

五、注意事项

1. 果蝇放入解剖皿之前,要用酒精浸泡,去掉其体表的几丁质,方便后续果蝇浸入PBS中进行解剖。

2. 去除果蝇脑袋上的气管,要小心谨慎,防止将脑袋撕破。

 

六、参考文献(可选)

[1] Volonté C, Alberti F, Vitale G, Liguori F. Delineating Purinergic Signaling in Drosophila. Int J Mol Sci. 2022 Dec 2;23(23):15196. doi: 10.3390/ijms232315196. PMID: 36499534; PMCID: PMC9738970.

[2] Bier, Ethan. Drosophila, the golden bug, emerges as a tool for human genetics. Nature reviews. Genetics vol. 6,1 (2005): 9-23. doi:10.1038/nrg1503

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