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支气管肺泡灌洗

张志敏 |  2020-12-29  | DOI: 10.21769/BioProtoc.v606
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视频简介 支气管肺泡灌洗液获得的整个流程,具体内容为:1. 小鼠CO2窒息处死(切勿断颈),固定小鼠,用酒精对小鼠颈部表面消毒;2. 分离气管周围的肌肉组织,暴露气管,在气管一侧用针头(50ml注射器)斜戳一个小口或者用剪刀剪一个三角口(切勿剪断气管);3. 将制备的简易冲洗针小心插入气管中,用线结扎固定灌胃针以防其脱落出气管;4.将1ml PBS分2次冲洗肺泡(一定要慢慢注入,慢慢反复冲洗,切勿胀破肺泡导致出血),一般冲洗3~5遍。5. 灌洗液40C 1200r离心10分钟,上清置于-20℃等待进行细胞因子等检测;细胞沉淀由于流式检测(本步骤未在视频中展示)。