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蓝莓外植体的消毒方法

胡静张凌云 |  2020-12-29  | DOI: 10.21769/BioProtoc.v608
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视频简介 本视频为蓝莓初代操作流程介绍,从大田采摘的当年生嫩枝,经过此操作消毒后可作为实验室无菌组培苗使用,为实验室后期蓝莓组培苗的进一步扩繁打下基础。
  • 视频介绍

实验原理

本试验通过使用1%次氯酸钠和75%酒精对蓝莓茎段进行消毒,使外植体达到无菌状态,以便后续对蓝莓茎段进行组织培养,达到快速繁殖的目的。


实验材料

次氯酸钠:品牌—西陇,浓度≥10%

无水乙醇:品牌—国药,浓度≥99.7%


注意事项

(1)水洗的过程至少10s以上,超出部分时间是允许的,如30s-1min也可行。因为水是清洗作用,对外植体损伤不大。且使用过的消毒器具(包括酒精清洗、次氯酸钠清洗、水洗这3个流程的瓶子)不能重复使用,以防交叉污染;

(2)次氯酸钠溶液待超净工作台紫外灭菌完成后再喷酒精递入台子内(次氯酸钠溶液易见光分解),1%次氯酸钠溶液现用现配,配制的量要足够完全没过茎段;

(3)消毒的茎段在斜着插入广口瓶时能完全没入,在此状态下尽可能长一点,这样能够减少中间部分茎段污染的概率,同时减少伤害。

[关键词] 蓝莓;外植体;消毒方法;组织培养
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