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革兰氏染色

吴思宇 |  2020-12-29  | DOI: 10.21769/BioProtoc.v643
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视频简介 革兰氏染色反应是细菌分类和鉴定的重要性状。
革兰氏染色法( Gram stain )不仅能观察到细菌的形态而且还可将所有细菌区分为两大类:染色反应呈蓝紫色的称为革兰氏阳性细菌用 G+ 表示染色反应呈红色(复染颜色)的称为革兰氏阴性细菌用 G 表示。细菌对于革兰氏染色的不同反应,是由于它们 细胞壁的成分和结构不同 而造成的。
  • 视频介绍

实验材料

大肠杆菌,葡萄球菌,芽孢杆菌

革兰氏染色液:结晶紫染液、碘液、 95% 乙醇、稀释

石炭酸蕃红染液,载玻片,酒精灯,接种环(移液枪),吸水纸等。

 

实验步骤

一,涂片的制作

  1. 取干净载玻片一块,在载玻片的中间加一滴单蒸水,按无菌操作法取菌涂片,做成浓菌液。
  2. 再取干净载玻片一块将刚制成的浓菌液挑 2 3 环涂在玻片两边制成薄的涂面,注意取菌不要太多。
  3. 将玻片反复在酒精灯上方通过几次( 用手指触摸涂片反面,以不烫手为宜 ),对标本进行干燥、固定(也可自然干燥)。

二,革兰氏染色

  1. 初染:在涂片上加结晶紫(以盖满细菌涂面为宜),染色约1分钟后水洗。
  2. 媒染:滴加碘液染色1分钟,水洗。
  3. 脱色:把玻片上的水吸净,用95%酒精滴洗玻片,直到滴出的酒精刚好不出现紫色,大约30秒钟,立即用水洗。
  4. 复染:滴加稀释石炭酸复红染液染色1-2分钟,水洗后涂片用吸水纸吸干或者放空气中晾干。

三,显微镜观察

  1. 先用低倍镜观察,再用高倍镜观察,找出适当的视野观察
  2. 革兰氏 染色 Gram stain

 

[关键词] 细菌分类、细菌鉴定、革兰氏染色
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