革兰氏染色

实验材料

大肠杆菌，葡萄球菌，芽孢杆菌

革兰氏染色液：结晶紫染液、碘液、 95% 乙醇、稀释

石炭酸蕃红染液,载玻片，酒精灯，接种环（移液枪），吸水纸等。

实验步骤

一，涂片的制作

1. 取干净载玻片一块，在载玻片的中间加一滴单蒸水，按无菌操作法取菌涂片，做成浓菌液。
2. 再取干净载玻片一块将刚制成的浓菌液挑 2 3 环涂在玻片两边制成薄的涂面，注意取菌不要太多。
3. 将玻片反复在酒精灯上方通过几次（ 用手指触摸涂片反面，以不烫手为宜 ），对标本进行干燥、固定（也可自然干燥）。

二，革兰氏染色

1. 初染：在涂片上加结晶紫（以盖满细菌涂面为宜），染色约1分钟后水洗。
2. 媒染：滴加碘液染色1分钟，水洗。
3. 脱色：把玻片上的水吸净，用95%酒精滴洗玻片，直到滴出的酒精刚好不出现紫色，大约30秒钟，立即用水洗。
4. 复染：滴加稀释石炭酸复红染液染色1-2分钟，水洗后涂片用吸水纸吸干或者放空气中晾干。

三，显微镜观察

1. 先用低倍镜观察，再用高倍镜观察，找出适当的视野观察
2. 革兰氏 染色 Gram stain