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植物组织预培养

张玉 |  2020-12-29  | DOI: 10.21769/BioProtoc.v680
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视频简介 植物的组织培养是从植物体分离出符合需要的组织、器官或细胞,原生质体等,通过无菌操作,在无菌条件下接种在含有各种营养物质及植物激素的培养基上进行培养以获得再生的完整植株。农杆菌转化是利用农杆菌介导将目的基因整合到植物染色体的DNA上并稳定维持和表达;预培养是转化的第一步,本视频主要展示了转化预培养的主要步骤。
  • 视频介绍

1)实验原理、目的与结果:植物的组织培养是利用细胞的全能性和无菌环境培养达到无菌苗大量扩繁的效果,该实验目的是利用组织培养技术和叶盘转化法将目的基因转入枣苗内,本实验是转化培养的第一步预培养。

2)实验样品:河南农业大学林学院组培室取无菌枣苗

试剂:MS培养基、6-BAIAAAgNO3KTTDZNAANaOH 1mol/L75%酒精

耗材:培养皿、组培瓶、滤纸

仪器:超净工作台、镊子、手术剪、手术刀、高温灭菌器、酒精灯、移液枪、人工气候培养室等

3)实验或操作注意事项:接种前培养瓶的瓶口要灼烧高温灭菌,防止污染;接种时镊子和手术刀尽量不要碰到外植体以外的物品,避免接触更多的细菌;接种速度要快,避免外植体材料在外界环境中暴露太久,防止污染;接种完一瓶后手术刀和镊子要及时高温灭菌,避免交叉污染,消毒后要等工具冷却后再使用,防止烫伤材料;切外植体材料时,切口要垂直茎段,使伤口最小,避免伤口过大,造成损伤;用手术刀切外植体材料时,要快、准、狠,不要来回划动,避免对材料造成损伤,尽量减小对材料的伤害。

[关键词] 组织培养、枣、转化预培养
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