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小鼠脑组织冰冻切片

田雨 |  2021-12-10  | DOI: 10.21769/BioProtoc.v826
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视频简介在对脑组织进行免疫染色或原位杂交等实验之前,需要对组织进行切片处理。冰冻切片是基础研究中的常用技术,它是在低温条件下将生物组织快速冰冻至一定硬度后进行恒温冰冻切片的一种实验方法。与石蜡切片相比,冰冻切片无需脱水、透明、浸蜡等复杂的前处理过程,使细胞免于抗原活性损伤,且操作简便快捷。相较于振动切片,冰冻切片具有切片厚度限度宽、适用范围广等优点。本视频以小鼠脑组织为实验材料,对冰冻切片的操作步骤进行了较为详细的介绍。
  • 评审评语摘选
点评:①本视频拍摄清晰,镜头全面;②仅有文字解说,建议添加配音更能补足了视频中未能展现的技术细节或其他相关信息;③用细毛笔将切下的脑片转移到孔板中前,可在液体中展开,便于检查收集脑片是否完整;④在切片制作过程中的注意事项和关键操应有细节展示;⑤实验操作较为规范。
常规小鼠脑冰冻切片操作,实验规范,操作步骤详细。
该视频操作较为规范,将冰冻切片的基本步骤都展示清楚,同时文字说明也简明扼要。可以推荐给没有操作经验的实验人员进行参考学习。但是也有一些不足之处:① 一些重要的操作步骤不完整,如大脑样品的制备,这是冰冻切片的关键,文中只提到了从蔗糖溶液中取出大脑,如果首次接触切片的实验人员会不明所以;②视频中虽然介绍了切片机的设置,但是没有详细说明设置条件,比如样品架、以及切片机的温度如何调节,同时应该从开机到关机的每个步骤都应该详细说明;③大脑OCT包埋后没有提及如何快速冷冻;④希望增加如何将切片切好的一些关键操作,增加troubleshoot部分;⑤最关键的是安全注意部分,因为切片机的操作具有危险性,安全操作的注意完全没有提及,导致本视频的可推荐性大大降低,比如如何防止冻伤,注意刀头切割,以及在不进行切割操作的时候一定要锁死刀头,这是非常重要的。