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大肠杆菌质粒转化实验

王佳齐 |  2021-12-10
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视频简介本实验通过感受态细胞使每微克超螺旋质粒DNA,如一些插入目的DNA片段的重组质粒,产生转化的菌落。当质粒与这些大肠杆菌混合后,质粒粘附在大肠杆菌的表面,在42℃的温度时,大肠杆菌出现热休克,质粒可通过大肠杆菌细胞膜上形成的空隙进入菌体内。随后,加入LB培养液,于37℃振动培养可使细菌复苏,并且表达质粒编码的抗生素抗性基因,提高转化效率。转化成功的大肠杆菌可以在相应抗生素培养皿中传代,形成菌落。