一、视频摘要
基于鱼类学研究,实验养殖动物(鱼)的取材对研究者来说是非常重要的一步,因此认识鱼体内脏结果分布尤为关键。本视频通过对鲤鱼的解剖,向读者展示鱼的内部构造:消化器官(肠道)、免疫器官(脾)、代谢器官(肝胰脏、体肾)和鱼体尾静脉采血。视频中完好的展示鲤鱼肠道结构成迂回状,脾是附着在肝胰脏上面,肝胰脏在肠道附近成弥散状分布,而体肾在肠道下面,鳔附近。
二、关键词
鲤鱼,解剖,取材,肠道,采血
三、实验样品信息,试剂、耗材或仪器
1. 样品信息
鲤鱼(从河南师范大学水产学院养殖基地取材),体重15.23g,鱼的生理和行为(运动、食欲)正常并且没有疾病,鳍、鳃、眼睛和皮肤无明显受伤情况。
2. 试剂和耗材
试剂: 3-乙氧雨基苯胺甲碼酸盐(MS-222,购买自上海阿拉丁生化科技股份有限公司),肝素(可选)
材料:毛巾,无菌注射器,1.5ml离心管,镊子,眼科剪刀,解剖盘
3. 仪器和软件
无
四、实验操作
1、水中加入适量MS-222,鱼体麻醉后,将鱼取出;
2、取干净的解剖盘,用湿毛巾将鱼体裹住;
3、在靠近尾部约5-6个侧线鳞处,稍微向下,缓缓插入针头,触碰到脊柱后停止,稍作移动后开始抽血,完成后血液样本可以转移到干净的1.5ml离心管中,4 ℃ 静置可析出血清用于实验;
4、去除毛巾,用酒精灯创造相对无菌的环境,使其腹部向上,用剪刀在肛门前与体轴垂直方向剪一小口,将剪刀尖插入切口,沿腹中线向前经腹鳍中间剪至下颌;使鱼侧卧,左侧向上,自肛门前的开口向背方剪到脊柱,沿脊柱下方剪至鳃盖后缘,再沿鳃盖后缘剪至下颌,除去左侧体壁肌肉,使心脏和内脏暴露。
5、在胆囊附近,剪断与咽相连的肠道,后端剪下与泄殖孔相连的后肠,轻轻的将整个内脏团取出,原位观察或分离,把各个组织分装到无菌无酶离心管中,液氮速冻转至-80 ℃ 超低温冰箱待用。
五、注意事项
1、用酒精灯创造相对无菌的环境,75%酒精对鱼体进行消毒,空气中RNA酶的存在会影响后续RNA实验进行,也可使用TRIzol(Takara Biomedical Technology (Beijing) Co., Ltd)浸没组织后冻存;
2、血液应全部抽取,否则会影响组织的辨认;
3、从腹部泄殖孔处剪开鲤鱼体壁时剪刀尖不要插入太深,而应向上翘,以免损伤内脏;
4、移去左侧体壁肌肉前,注意用镊子将体腔腹膜与体壁剥离开,以不致损坏覆盖在前后鳔室之间的肾脏;
5、研究肠道微生物时,要注意在超净台内取出内容物。
六、结果分析(可选)
在腹腔里,脊柱腹方是白色囊状的鳔,覆盖在前、后鳔室之间的三角形暗红色组织,为肾脏的一部分。鳔的腹方是长形的生殖腺,雄性为乳白色的精巢,雌性为黄色的卵巢。腹腔腹侧盘曲的管道为肠管,在肠管之间的肠系膜上,有暗红色、散漫状分布的肝胰脏。在肠管和肝胰脏之间一细长红褐色器官为脾脏。在研究中,肠道分为三部分,前肠(肠道前端到第一个生理弯曲),后肠(肠道后端到倒数第一个生理弯曲),其余为中肠。
七、参考文献(可选)
[1]马琳. 鱼类学实验[M]. 中国海洋大学出版社, 2010.
[2]谢从新. 鱼类学[M]. 中国农业出版社, 2010.
[3] Chang X, Li H, Feng J, et al. Effects of cadmium exposure on the composition and diversity of the intestinal microbial community of common carp (Cyprinus carpio L.)[J]. Ecotoxicology and Environmental Safety, 2019, 171:92-98.
[3] Chang X, Kang M, Feng J, et al. Effects of BDE-209 exposure on growth performance, intestinal digestive enzymes, and intestinal microbiome in common carp (Cyprinus carpio L.) - ScienceDirect[J]. Aquaculture and Fisheries, 2021.
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