一、视频摘要
SDS-PAGE蛋白电泳是根据检体中蛋白质分子量大小的不同，使其在电泳胶中分离的实验方法。本实验使用前期诱导的蛋白进行SDS-PAGE蛋白电泳和考马斯亮蓝染胶进行蛋白检测。染色后目的蛋白1、2、3与空载对照相比均出现特异性条带，且条带大小符合预期，即目的蛋白诱导成功。
二、关键词
SDS-PAGE蛋白电泳；考马斯亮蓝染胶；蛋白检测
三、实验样品信息，试剂、耗材或仪器
1. 样品信息
前期诱导的三个蛋白
2. 试剂和耗材
ddH2O、30% Acrylamide、1M Tris-HCL（PH 8.8）、1M Tris-HCL（PH 6.8）、10% SDS 、10% AP、TEMED、蛋白Marker、70%乙醇
3. 仪器和软件
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仪器
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品牌
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型号
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PowerPacTM Basic Power Supply基础电泳仪
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BIO-RAD
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164-5070
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ATTO垂直电泳槽
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ATTO株式会社
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AE-6500
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蛋白染色仪
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GenScript
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eStain L1
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四、实验操作
1、选用ATTO板，配置两块蛋白胶
(1) 配制10% 蛋白分离胶（15 ml），加至板的五分之四处，然后加无水乙醇封边，30min后，倒掉酒精。
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试剂
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体积
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H2O
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5.9 ml
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30% Acrylamide
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5 ml
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1M Tris-HCL（PH 8.8）
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3.8 ml
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10% SDS
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0.15 ml
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10% AP
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0.15 ml
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TEMED
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0.006 ml
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(2) 配制5% 蛋白浓缩胶（5 ml），加满后插入白色梳子，30 min后，将夹子和胶条取下，用保鲜膜把板包好，置于4 ℃冰箱保存。
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试剂
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体积
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H2O
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5 ml
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30% Acrylamide
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0.83 ml
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1M Tris-HCL（PH 6.8）
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0.63 ml
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10% SDS
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0.05 ml
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10% AP
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0.05 ml
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TEMED
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0.005 ml
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2、将蛋白上清从-80℃ 冰箱取出后置于冰上解冻后，按照比例 蛋白上清：蛋白上样Buffer=4:1的比例吸取40ul蛋白上清和10ul 蛋白上样缓冲液（5×）混合。
3、将样品放入提前预热到100℃的金属加热仪中高温变性染色10min（中途打开盖子放气，防止温度过高把管盖弹起）。
4、把蛋白胶放进电泳槽并安装好，往胶板中倒入1×电泳液至没过胶梳，并在两侧倒入电泳液至没过下端绿条处，然后将梳子取下。
5、将样品按照顺序上样5ul（第一个孔以及最后一孔不加），加完样品后，调整电泳仪参数，点击电压模式，先在80V的电压下跑20min 待样品跑至分离胶后，再换成120V 100-120 min（根据目的条带的大小选择相应的电泳时间），待样品条带跑至玻璃板绿色横条底部即可停止。
6、随后，将蛋白胶取出，根据点样数把胶切成相应的大小，随后将胶放入单蒸水中缓慢摇晃浸泡。
7、检查洗脱液和考染液的体积，如不足要及时配置，将蛋白胶装板（在板的一侧放入滤纸用于固定蛋白胶，随后检查是否有气泡，如有气泡需将气泡赶出）放入考马斯亮蓝染色仪染色9分钟，染色完后用单蒸水清洗，并用保鲜膜包起来，使用page房间的仪器观察蛋白诱导情况。
五、注意事项
1、蛋白100℃高温处理过程中，要及时开盖放气，防止温度过高将管盖弹起。
2、蛋白点胶过程中，尽量使用双手点胶，增加稳定性。
3、加TEMED等有毒试剂时，一定要佩戴口罩在通风橱操作。
4、注意污染区域跟非污染区域的划分，减少环境污染。
5、考马斯亮蓝染色前要检查考染仪的洗脱液和考染液是否充足。
六、结果分析（可选）
如下图所示，目的蛋白1、2、3与空载对照相比均出现特异性条带，且条带大小符合预期，即诱导成功。
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很好地展示了SDS-PAGE的基本操作过程，实验操作非常娴熟规范，具有很好的实用价值，创新性不错。
可以介绍一下在无染色仪情况下，简易染色方法。
实验基本完整，但创新性不足。