一．试验原理
接种是微生物学实验技术中最基本的操作，即把已获得的纯种微生物，于无菌条件下移植于新鲜的无菌培养基的过程。带有适宜的培养基的小空间可以造成微生物宜的生长环境。这样培养的微生物可以保持菌体的完整形态和结构，便于观察和研究在自然界和人体存在的各种微生物。由于微生物与各种不同性质的染料具有一定的亲和力，着色后的菌体折光性弱，色差明显，在显微镜下容易观察细胞的内部结构及其内含物。
二．试验目的
使用无菌操作技术接种菌种，培养微生物菌落，并熟练运用革兰氏染色法制备微生物临时装片，使用显微镜进行有效观察。
三．材料与试剂
1. L-B培养基
2. 蕈状芽孢杆菌菌液
3. 漏斗、胶皮管
4. 接种环
5. 试管
6. 酒精灯、火柴
7. 无菌水
8. 草酸铵结晶紫（染液）
9. 碘液（媒染剂）
10. 95％乙醇（脱色剂）
11. 番红（复染剂）
12. 蒸馏水
13. 玻璃载玻片
14. 显微镜
15. 香柏油、二甲苯和擦镜纸
四．仪器设备
洁净工作台 (DL-CJ-2ND)
立式自动压力蒸汽灭菌器(GI54DS)
五．试验步骤
1、制作斜面培养基
将牛肉膏蛋白胨培养基分装试管，每管约为管高1/5，使用立式自动压力蒸汽灭菌器灭菌（121℃、30分钟）后制成斜面备用。
2、接种菌
在紫外杀菌30分钟后的超净工作台上对蕈状芽孢杆菌进行接种。
3、培养
将接种好的斜面培养基放于恒温培养箱中培养，培养条件为30℃，24h。
4、制片与染色
将培养好的菌制成临时玻片，使用革兰氏染色法进行染色，备镜检。
5、观察
使用显微镜经过低倍和高倍物镜的初步观察，转换成油镜正式观察。
六. 试验结果
致谢
感谢资源环境学院环境材料与农村水土环境治理课题组成员的帮助，感谢刘奋武老师的支持，感谢李旭伟老师为本实验提供的技术支持，感谢尚研萌师姐的细心指导。
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